FITC抗小鼠免疫荧光染色试剂盒

特别提示：包括FITC抗小鼠免疫荧光染色试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：FITC抗小鼠免疫荧光染色试剂盒
英文名称：Immunol Fluorence Staining Kit with FITC-Labeled Goat Anti-Mouse IgG
产品货号：YT117
产品规格：>300次

本试剂盒含有FITC标记的山羊抗小鼠IgG(H+L)抗体，可以用于检测小鼠来源的相应一抗，观察到的颜色为非常鲜艳的绿色。FITC是一种常用的绿色荧光探针。FITC的吸收峰492nm、发射峰520nm。本试剂盒提供了含有荧光标记抗体稳定剂的免疫荧光染色二抗稀释液，可以确保荧光标记抗体稀释后在4℃可以保存长达6个月，并且在6个月内至少可以重复使用10次。本试剂盒含有抗荧光淬灭封片液，可以使荧光更加持久。本试剂盒对于六孔板内的细胞样品或常规切片，至少可以检测300个样品。

试剂盒组份：
抗小鼠FITC———————————30μl
免疫荧光染色二抗稀释液—————50ml
抗荧光淬灭封片液————————15ml

注意事项：
1. 需荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
2. 在使用抗荧光淬灭封片液的情况下可以减缓淬灭，但仍宜尽量避光，特别是需要尽量缩短在荧光显微镜下的观察时间。
3. 荧光物质均易发生淬灭，染色后宜尽快进行荧光显微镜下的观察。如果不能及时观察可以4℃避光保存，但存放时间通常不宜超过一周，随着存放时间的延长可能会导致观察效果越来越差。
4. 免疫荧光染色效果的好坏和一抗的关系非常密切。建议选购有较多文献报道的并注明可以用于免疫荧光染色的一抗用于本实验。
5. 如果观察时发现荧光过弱，可以适当提高一抗的浓度；如果荧光还是比较弱，可以适当提高荧光标记抗体的浓度。

储存条件：-20℃，有效期一年。

除了FITC抗小鼠免疫荧光染色试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：



名称：超灵敏ECL化学发光试剂盒
货号：YT061
规格：共100ml
本Western萤光检测试剂是一种特超敏ECL化学发光试剂盒，发光效果显著优于YT060高灵敏ECL化学发光试剂盒，可与二抗上耦连的辣根过氧化物酶发生化学反应，发出萤光，从而可以通过用X光片压片或其它适当萤光成像设备检测样品。

本试剂盒灵敏度极高，比DAB显色的灵敏度至少高1000倍，比原Pierce公司(现Thermo公司)的SuperSignal West Pico Substrate的灵敏度高10倍以上，实际检测效果与原Pierce公司的SuperSignal West Dura和SuperSignal West Femto的检测灵敏度相近。对于辣根过氧化物酶的最低检测灵敏度可以达到飞克级，500飞克辣根过氧化物酶用本试剂盒检测并用化学发光仪进行发光强度的定量检测时，信噪比大于5。

本试剂盒系统发光时间更长。在10微升1-10纳克/微升辣根过氧化物酶标记IgG中，加入100微升本试剂盒工作液后在不同时间点通过化学发光仪检测化学发光。检测数据显示20分钟后发光无明显减弱， 60分钟后发光强度减弱至初始发光强度的约85%左右，120分钟后发光强度减弱至初始发光强度的约70%左右。


检测不同剂量HRP-IgG，20分钟后发光效果几乎不变，120分钟后发光效果仍然良好。

本试剂盒系统的高灵敏度可以大大节省宝贵的样品以及非常昂贵的一抗和二抗的用量。同时必须注意适当减少一抗和二抗或样品的用量，以免获得过深的难以比较灰度的条带。本试剂盒系统稳定性较好，37℃水浴孵育30天，和4℃保存的试剂相比，对相同样品的检测效果无任何明显差异。此外本试剂盒系统背景很低，对PVDF膜和硝酸纤维素膜均适用。

储存条件：4℃避光，有效期一年。

名称：二乙酸荧光素(FDA)
货号：ZN1972
规格：1g/5g
产品性状：白色固体粉末
产品保存：避光-20℃保存，一年有效
产品说明：
二乙酸荧光素(Fluorescein Diacetate,FDA)是一种常用的培养动植物细胞以及植物细胞原生质体的生活力鉴定染料，其染色机理也利用了死活细胞在代谢上的差异：FDA本身不产生荧光，也无极性，能自由渗透出入完整的细胞膜。当 FDA 进入活细胞后，被细胞内的脂酶分解，生成有极性的、能产生荧光的物质——荧光素，该物质不能自由透过活的细胞膜，积累在细胞膜内，因而使有活力的细胞产生绿色荧光；而无活力的细胞因不能使 FDA 分解，而无法产生荧光。FDA 也可用于流式细胞仪。荧光素的激发和发射波长分别是 488nm和 530nm。
使用方法：
(1)配制溶液：将 FDA 溶于*酮中，配成浓度为5 mg./ml的溶液，置于 4℃冰箱中保存。染色时将 FDA 加入到细胞液中，使其终浓度为100μg/ml。
(2)活细胞染色：取处于对数增长期的细胞液，离心浓缩，生理盐水清洗1次，加入 FDA，在室温黑暗处放置 5 min 染色；染色后离心，生理盐水清洗1-2次，最后用蒸馏水悬浮细胞，涂片观察。
(3)死亡细胞胞染色：取鲁哥氏溶液固定的死亡细胞按活细胞相同的方法进行染色。
(4)观察：用荧光显微镜观察和拍照(明场和荧光分别拍照，物镜使用 20×)。活细胞被 FDA 染成亮绿色，当细胞膜受损，荧光素无法在细胞内累积，而使细胞无法发出荧光。活性高的细胞发出强烈的绿色荧光，活性弱或死亡的细胞发光较弱或不发光。
注意事项：
(1)使用方法可依据细胞的具体情况适当调整。
(2)鲁哥氏即 Lugol’s 溶液，也就是碘液。取 6 克碘化钾溶于 20 毫升蒸馏水中，搅拌到溶解后，加入 4 克碘，等碘充分溶解，再加入 80 毫升蒸馏水，贮存在棕色
试剂瓶内。

名称：双显色免疫组化试剂盒(大鼠源一抗)(DyLight488和POD)
货号：ZN2937
规格：1ml|2ml|5ml
本试剂盒适于一抗来源为大鼠的抗体，是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的。链霉亲和素同亲和素一样，对生物素分子有极高的亲和力，是一般抗原抗体亲和力的一百万倍，兼具高敏感性，低背景和操作简便的优点。此免疫组化双显色试剂盒采用荧光素 DyLight 488 与过氧化物酶(POD)标记的链酶亲和素（SABC-DyLight 488+POD）。DyLight 是一种近年来被广泛应用的新型荧光染料，具有很好的光谱宽度、更强的荧光强度，更高的抗淬灭性和特异性，对 pH 不敏感、分子较小渗透性好等优势。DyLight 488 最大吸收峰 493nm；最大发射峰 518nm。呈黄绿色。加入显色剂 DAB 显色后，染色呈棕黄色。用户根据实验需要，可在同一张切片上用两套显示系统观察。

试剂盒组成：

组分	规格
正常兔血清封闭液(稀释比1:10)	1ml/2ml/5ml
生物素化兔抗大鼠IgG(参考效价1:100)	0.1ml/0.2ml/0.5ml
SABC-DyLight 488(参考效价1:200～800)	0.1ml/0.2ml/0.5ml
SABC-POD(参考效价1:100)	0.1ml/0.2ml/0.5ml

另附有四个滴瓶可供稀释试剂用。

保存条件：4℃可保存一年，应避免冷冻。

石蜡片染色步骤：
1. 石蜡切片，常规脱蜡至水。
2. 3%H2O2去离子水室温孵育5-10分钟,以消除内源性过氧化物酶活性.PBS冲洗，5分钟×3次。
3. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
4. 封闭。滴加用稀释后的正常兔血清封闭液(稀释比 1:10)，37℃孵育30分钟，甩干，勿洗。
5. 滴加一抗(大鼠IgG)，37℃孵育1-2小时或4℃过夜。PBS冲洗，5分钟×3次。
6. 滴加生物素化兔抗大鼠IgG，37℃孵育30 分钟。PBS冲洗，5分钟×3次。
7. 滴加SABC-DyLight 488(参考效价1:200-800)或SABC-POD(参考效价1:100)，37℃孵育30分钟。PBS冲洗，5分钟×3次。
8. 显色液显色，镜下控制反应时间。显色剂可选DAB(ZN1968)。自来水充分冲洗。
9. 根据需要进行苏木素(ZN1971)复染，染色时间为0.5-2分钟。选用中性树胶，水溶性封片剂(ZN2946)或抗荧光衰减封片剂(ZN1974)封片。
10. 结果观察。荧光显微镜下有黄绿色颗粒者为阳性染色。普通光学显微镜下有棕黄色颗粒者为阳性染色。

建议：
1. 热修复可选用枸橼酸盐缓冲液(ZN1955)、EDTA抗原修复液(ZN1951)、PBS缓冲液、TBS缓冲液(ZN1953)等作为抗原修复液。
2. 酶修复可选用复合修复液(ZN1952)、抗原修复液Ⅰ(ZN1954，与热修复配合使用)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化组织。