第一链cDNA高效合成试剂盒批发

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名称：第一链cDNA高效合成试剂盒批发
产地：国产|进口
规格：20μl×50次
编号：ALH262
英文名：First Strand cDNA Synthesis Kit
本试剂盒以RNA为模板，用RTase/RNase抑制剂Mix、5×RT Reaction Mix高效合成第一链cDNA，操作简单。制品使用通过基因重组技术克隆表达的点突变型RNase H活性缺失的M-MuLV反转录酶。野生型的M-MuLV 包含的RNase H活性能够催化降解DNA/RNA杂合体中的RNA，因此在cDNA第一条链的合成反应中可能会降解RNA/DNA杂合体中的模板RNA。本酶M-MuLV(RNase Hˉ)的RNase H活性缺失，与M-MuLV 相比，具有更强的延伸能力和稳定性，可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。本试剂盒适用于第一链cDNA合成。可用于高拷贝、低拷贝基因的检测。合成cDNA片段长度最高可达12kb。

试剂盒组分(50次)：
RTase/RNase Inhibitor Mix-———————50μl
5×RT Reaction Mix———————————200μl
Oligo(dT)18(0.5μgμl)—————————50μl
Random primer (N6)———————————50μl
RNase free H2O—————————————1ml

注意事项：
1. 避免RNase污染。
2. 为保证反转录成功建议使用高质量的RNA样品。
3. 可选步骤（一般不需要）：如果RNA模板GC含量丰富或者有复杂二级结构，可以先只加RNA模板、引物和RNase free H2O混匀，65℃变性5分钟，冰上冷却，短暂离心后加入其它成分继续下面的反转录步骤。
4. RTase/RNase Inhibitor Mix非常粘稠，溶液容易吸附在管壁和吸头外导致损失，用前请点甩离心后使用，并且避免吸头外壁沾附损失。可以每次按照0.8μl使用，也不影响使用效果。

储存条件：-20℃，有效期1年。


本品别名：第一链cDNA高效合成试剂盒|cDNA第一链合成试剂盒|高效RT-PCR试剂盒

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十五醇 MDH 629-76-5
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F030808 BIOTIN标记山羊抗小鼠IgG1抗体 Goat Anti-Mouse IgG1*BIOTIN
BTN60705 一管式植物DNAOUT One-Tube Plant DNAOUT
PY04-011  脑浸液(猪)  100ml/瓶  根据要求适量添加，用于配制培养较难生长的微生物培养
聚乙*(代"烯")醇磷酸铵 β-D-Glucan from barley
BTN50903 微量核酸沉淀剂 NA Precipitation Solution
HC0040 酶标板(不可拆 独立包装)
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·一管式定点突变试剂盒
编号：ALH355
英文名称：One Tube Site-specific Mutagenesis Kit
规格：10次|20次
本试剂盒是基于PCR原理向目的DNA片段（一般为质粒）中引入碱基的点突变，多个邻近密码子的突变，单个或多个邻近密码子的缺失(deletion)或插入(insertion)等。一般宿主菌培养扩增的质粒DNA是甲基化的，PCR扩增新合成的DNA是非甲基化的。首先以待突变的甲基化质粒为模板，利用超快高保真的SuperPfu聚合酶实现突变质粒的合成（非甲基化，包含突变点，且有两个缺刻点nick点），再利用Dpn I酶选择性降解甲基化的模板质粒 ，剩下的新合成非甲基化的突变质粒转入大肠杆菌后，质粒中有两个nick位点可以被大肠杆菌修复，得到的克隆就会含有预期的突变质粒了。一般可以产生大于90%的突变效率。本试剂盒适用于<12kb甲基化质粒中核苷酸的突变。

试剂盒组分(10次)：
SuperPfu DNA polymerase——————5μl
10×SuperPfu Buffer————————100μl
Dpn I——————-——————-——5μl
10mM dNTP Mixture-——————-——25μl

试剂盒特点：
1、简单，一个PCR管中完成所有操作，速度最快。
2、采用部分重叠引物设计，使PCR呈指数扩增，扩增产物凝胶电泳可见增加成功率。
3、效率高，使用Dpn I去除非突变模板，突变效率高达90%；不需要使用特殊感受态细胞降解非突变质粒。
4、采用分子进化改造的SuperPfu可以提供4倍-6倍于pfu的扩增速率提高和3倍于pfu的超高保真性。

储存条件：-20℃，有效期一年。


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·DNA消化试剂盒(DNase I)
编号：ALH044
英文名称：DNA digestion kit
规格：1500U
Dnase I中文名称为脱氧核糖核酸酶I，是一种可以消化单链或双链DNA产生单脱氧核苷酸或单链或双链的寡脱氧核苷酸的核酸内切酶。DNase I水解单链或双链DNA后的产物，5"端为磷酸基团，3"端为羟基。DNase I活性依赖于*离子，并能被*离子或二价锰离子激活。*离子存在条件下，DNase I可随机剪切双链DNA的任意位点；二价锰离子存在条件下，DNase I可在同一位点剪切DNA双链，形成平末端，或1-2个核苷酸突出的粘末端。

经过本试剂盒独特的反应液消化后不需要繁琐的*酚/*仿抽提灭活，可直接用于反转录反应，使用起来非常快速方便。

活性单位：37℃ 10分钟内，将能够完全降解1μg pBR322 质粒DNA 所需的酶量定义为1 个活性单位。
来源：大肠杆菌表达的31kd 重组蛋白。
酶贮存缓冲液：50 mM Tris-HCl (pH7.5)，10 mM CaCl2，50% (v/v)glycerol。
10×DNase Buffer：100 mM Tris-HCl (pH7.5 at 25℃)，25 mM MgCl2，1 mM CaCl2。
纯度：不含其它DNA 内切酶和外切酶，不含RNA 酶。
适用范围：制备不含DNA的RNA样品； RT-PCR反应前RNA 样品中去除基因组DNA 等可能的DNA污染；体外T7,T3,SP6等RNAPolymerases催化的RNA 转录后去除DNA模板；DNase I footprinting 研究DNA-蛋白质相互作用；缺口平移(nick translatioin)；产生DNA 随机片断文库；细胞凋亡TUNEL 检测中部分剪切基因组DNA 作为阳性对照。

反应体系与条件：
1.在RNAse free 管里面加入以下成分
RNA：＜3μg (＜8μl)
10×DNase Buffer：1μl
DNase I：1μl
RNase free water：Up to 10μl
2. 37℃孵育30分钟。
3. 加1μl EDTA Stopper。
4. 65℃孵育10 分钟，灭活DNase I。
4. 取适量或者全部10μl 的处理过的RNA 直接用于反转录。

注意事项：
每μl DNase I 最多处理不超过3μg RNA。如果需要RNA 较多，需要根据RNA 的处理量按比例放大DNase I、10×DNase Buffer 使用量和反应体积。如果处理后需要得到纯净RNA，可以使用RNA 清洁纯化试剂盒在第2 步后（37℃孵育30 分钟后）直接清洁纯化（不需要加EDTA Stopper 和65℃孵育10分钟的步骤了）。

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