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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
251
- 英文名:
Coomassie Brilliant Blue G-250
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
冷藏
- 规格:
5g
特别提示:包括考马斯亮蓝G-250在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:考马斯亮蓝G-250
英文名称:Coomassie Brilliant Blue G-250
产品货号:SNM384
产品规格:5g
除了考马斯亮蓝G-250,,我公司还供应以下相关产品:
名称:十二烷基磺酸钠
货号:BTN131049
规格:100g
本产品是促进溶解的理想去垢剂。在SDS(十二烷基)中碳链长度的独特分布利于在凝胶电泳实验中溶解病毒蛋白。可用于需要在SDS-PAGE后进行复性的实验(如果按照Blank,等的方法处理凝胶来去除C14和C16烷基磺酸盐)。
储存条件:常温运输和保存,有效期一年。
名称:Tris HCl(粉剂)
货号:SNM395
规格:500g
名称:膜蛋白和胞质蛋白提取试剂盒
货号:SNM416
规格:50T
名称:考马斯亮蓝脱色液
货号:SNM443
规格:250ml
名称:复合消化液
货号:SNM485
规格:10ml
名称:细菌蛋白提取试剂盒
货号:RFT159
规格:100次
细菌蛋白提取试剂盒使用温和的非离子型去污剂,适用于大肠杆菌表达的重组蛋白提取。提取过程中不需进行超声破碎等复杂的操作步骤,有效避免了外源蛋白的污染。该试剂盒在抽提试剂的基础上添加了溶菌酶、DNaseⅠ和蛋白酶抑制剂混合物,可提高蛋白提取效率并减轻因DNA引起的粘稠现象,有效避免蛋白降解。所提取的蛋白保持了生物学活性,可进行IP、Western blot实验,也可直接通过Ni-NTA 等纯化填料进行蛋白纯化。该试剂盒既可适用于小量蛋白表达检测,也适用于大量蛋白的表达纯化试验;既适用于纯化可溶型蛋白,也适用于纯化包涵体蛋白。每次提取使用1ml 缓冲液计算,该试剂盒可以使用100次。
试剂盒组成:
| 组份 | 规格 | 贮存 |
| 细菌蛋白提取缓冲液 | 100 ml | 常温 |
| 蛋白酶抑制剂(100×) | 1 ml | -20℃ |
| 溶菌酶 50mg/ml | 1 ml | -20℃ |
| DNase I | 1000 U | -20℃ |
使用方法:
一、可溶型蛋白操作方法(1 ml菌液为例)
1、8000rpm常温离心 3min 后,弃上层培养基,留取管底部菌体(尽量弃除掉培养基) 。
2、加入 200μl细菌蛋白提取液,2μl DNase I和4μl 溶菌酶重悬菌体,用吸头吹打至无可见细胞团块。
3、置于常温孵育 10-15min,期间轻弹离心管数次以加速裂解。
4、裂解完成后 13,000rpm 于4℃离心5 min,将上清转移至新的容器中,溶液可直接进行下一步纯化或检测试验。
二、包涵体蛋白操作方法(1 ml菌液为例)
1、上述步骤4 中,弃上清,保留沉淀组分,用200μl 的细菌蛋白提取液重悬沉淀。
2、加入4μl溶菌酶,混合均匀,常温孵育 10-15 min。
3、加入 800μl 的灭菌水混合均匀。
4、13,000 rpm常温离心5min,弃上清后用 900μl 灭菌水重悬沉淀,然后加入 200μl 细菌蛋白提取液,混合均匀。
5、13,000rpm 室温离心5 min,重复步骤4 三至五次。
6、将沉淀溶解于变性溶液中,进行下一步纯化或复性试验。
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文献和实验一、目的 学习和掌握考马斯亮蓝G-250 测定蛋白质含量的原理和方法。二、原理 考马斯亮蓝G-250(Coomassie brilliant blue G-250)测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。考马斯亮蓝G-250 在游离状态下呈红色,最大光吸收在488nm;当它与蛋白质结合后变为青色,蛋白质-色素结合物在595nm 波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比,因此可用于蛋白
一般R250 染蛋白,G250 一般测蛋白浓度,也可染胶,敏感性更高但较慢脱色较难。 G250常用的蛋白染料,作定性试验用,染色后为蓝绿色;R250较敏感,,做定量实验用,染胶效果较好.染色后为红蓝色 考马斯亮蓝R250(Coomassie brilliant blue R250)。C45H44O7H3S2Na,MW=824,λmax
一、原理:考马斯亮蓝G—250法于1976年由Bradform建立。考马斯亮蓝G—250具有红色和蓝色两种色调,在酸性溶液中,其以游离态存在呈棕红色,当它与蛋白质通过疏水作用结合后,变为蓝色。色素对可见光谱的最大吸收值从465nm转移到595nm处。蛋白质和色素的结合反应很快速,约在2分钟左右的时间内达到平衡,在室温1小时之内是稳定的。在0.01一1.0mg蛋白质/m1范围内,蛋白质含量与A 595值呈正比。二、染液配制: 100mg的考马斯克蓝G—250溶解于50m1 95%的乙醇中,加入
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