EcoP15I限制性内切酶

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EcoP15I限制性内切酶
规格：2500U|500U
产地：国产|进口
编号：R0646L
品牌：百奥莱博
在不同反应缓冲液的活性:
BalbBuffer 1.1: 75%
BalbBuffer 2.1: 100%
BalbBuffer 3.1: 100%
CutSmart Buffer: 100%
特性:
重组酶、省时酶。
反应条件:
BalbBuffer 3.1 + ATP，37℃。
热失活:65℃ 20 分钟。
浓度:
10,000units/ml。
甲基化敏感性:
对 dam、dcm 和哺乳动物 CpG 甲基化均不敏感。
注意事项:
DNA 酶切需要 ATP，有效切割需要有两个反方向底物位点。以头对头方向最佳，序列的“头”是指当 dG 位于 CAGCAG的 3´ 端(上链)时。切割效率也受两个底物位点之间距离的影响。

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·抗 CBD 单克隆抗体
编号：E8034S
规格：0.05ml
特性:
单柱纯化且无需使用蛋白酶
目的蛋白质不含来自载体的氨基酸
可融合到目的蛋白的 N 端或 C 端
重组蛋白的连接或标记
可分离有或无 N 端甲硫氨酸的蛋白
关于产品详细描述和 pTXB1 和 pTYB21 载体图谱，包括 MCS（多克隆酶切位点），请见目录 355-356 页。载体序列文件请联系我们咨询 查询。
概述:
IMPACT（Intein Mediated Purificaiton with an Affinity Chitin-binding Tag）试剂盒利用经改良过的蛋白剪接元件（内含肽）进行一步亲和纯化重组蛋白（图1）。该系统与其它蛋白融合表达系统的主要区别在于:无需蛋白酶作用，即可将重组蛋白与其亲和标签（Tag）分离。
IMPACT 试剂盒能够融合表达含有内含肽及几丁质结合结构域（CBD）的蛋白，融合标签可以融合到目标蛋白的 C 端（pTXB1）或 N 端（pTYB21）（图 2）。在硫醇试剂（如 DTT）的参与下，内含肽进行特异性的自我剪切，释放出目的蛋白。pTXB1 载体还可用于表达和纯化 C 端含硫脂键的蛋白，并用于内含肽介导的蛋白连接（IPL，图 3）。IPL 反应，即表达蛋白连接，可通过一种天然肽键将 N 端为半胱氨酸的多肽或蛋白和一段细菌表达出的 C 端硫脂键蛋白连接起来，此反应可用于蛋白标记或半合成。有关 IMPACT 系统和 IPL 的更多信息请联系我们咨询 查询。
pTYB21 的内含肽标签包含酿酒酵母（Sce）VMA1 内含肽和几丁质结合域融合在目的蛋白的 N 末端。
pTXB1 是大肠杆菌表达载体，携带有一个小的蛋白自剪切元件即来自 Mycobacterium xenopi gyrA 基因的 mini 内含肽［Mxe GyrA 内含肽，22 kDa］。蛋白自剪切元件经修饰后与来自芽孢杆菌（Bacillus circulans）的几丁质结合域（CBD）一起共同形成一个内含肽标签。该标签可与几丁质珠（S6651）结合。使用硫醇试剂（如 DTT）或 MESNA（2-mercaptoethanesulfonic acid）（后续连接用）诱导内含肽自我剪切并释放出目的蛋白。
iMPACT 试剂盒组成l
– 大肠杆菌表达载体:pTXB1、pTYB21 和 pMXB10 对照载体
– 几丁质珠:纯化融合蛋白的亲和基质（结合容量 = 2 mg/ml）
– 抗 CBD 单克隆抗体
– DTT 与 SDS 上样缓冲液


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