- ¥80
- 晶抗
- JK2722
- 进口/国产
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
12个月
- 供应商：
上海晶抗生物工程有限公司
- 保存条件：
4℃
- 规格：
5ml
蛋白上样缓冲液有很多种，如SDS-PAGE Sample Loading Buffer、PAGE连续蛋白上样缓冲液、Tricine加样缓冲液、TruPAGE LDS蛋白上样缓冲液等，其中TruPAGE LDS蛋白上样缓冲液是一种经过改良的以溴酚蓝为染料的2倍浓缩的蛋白上样缓冲液。
作步骤(仅供参考)：
在室温或不超过37℃的水浴中溶解SDS-PAGE蛋白加样缓冲液(2×)。水浴溶解后立即室温存放，尽量避免长时间置于水浴中。
取适量的蛋白样品和TruPAG LDS Sample Buffer(4×)，按1:3混合，充分混匀。如有必要可加入DTT，使DTT终浓度达到25nM。
70℃水浴加热10min，以充分变性蛋白。
冷却到室温后，直接上样到TruPAG胶加样孔内即可。
通常电泳至染料到达PAGE胶的底部附近即可停止。
注意事项：
TruPAG LDS Sample Buffer(4×)，有轻微刺激性气味，但不含由毒物质β-巯基乙醇。
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文献和实验或 4℃过夜以捕获免疫沉淀复合物。 离心（3000 rpm，5 min）收集 Agarose 珠子，弃掉上清，用 800 µL-1000µL 预冷的 PBS 缓冲液洗涤珠子 3 次。（小心吸取上清，避免触碰底部珠子） 收集沉淀，加 60 µL 2×SDS 蛋白上样缓冲液中重悬沉淀，轻混均匀后煮沸 5 min，12000 rpm 离心 10 min。 将上清转移至一新离心管，进行 Western 检测。
从小鼠腹水中纯化mcab的方法有盐析、离子交换层析、凝胶过滤和亲合层析等。应用tsk deae-spw离子交换层析柱从小鼠腹水中纯化mcab不仅纯化速度快，回收率和得率高，而且保持良好的生物学活性。一、原理根据离子交换原理，将经硫酸铵粗提的含mcabγ球蛋白上样结合于层析柱上，通过增加洗脱液中的离子强度，洗脱并收集蛋白峰。二、试剂和器材1、tsk deae spw离子交换层析柱（75mm×7.5mm，bio rad）2、高效液相色谱仪（包括控制系统、溶剂传递系统、高压加压活门和紫外280nm
洗脱流速1ml/min 0～1min：0→5%缓冲液B(20mM Tris, PH8.5, 含2.0M醋酸钠) 1～20min(线性梯度洗脱)：5→20%缓冲液B 20～22min：20→0%缓冲液B 洗脱液用紫外280nm进行监测 收集蛋白峰，进行含量、纯度和活性测定 (三) 试剂和器材 1. TSK DEAE SPW离子交换层析 柱(75×7.5mm, Bio Rad
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