B16-F1 小鼠黑色素瘤细胞

B16鼠黑色素瘤细胞培养的经验

B16鼠黑色素瘤细胞。好像这株细胞还有亚型的，不过中科院说不清，我也就说不清了。总之是B16。细胞总的来说比较好养，操作基本都是常规的。要求用胎牛10%1640、5%CO2、37度培养，一段时间为了省钱用过新生牛也不错。但是传代多了，细胞有形态改变。可以弃掉重新复苏。血清国产的杭州四季青，感觉不灭活比灭活要好养一些。传代操作，主要是无菌操作。细胞增殖快非常好养，但是及时换液，否则也很容易死亡、或变形。消化用胰酶0.25%，可以用含EDTA的，效率更高一点。消化步骤：弃血清——用D-hank's

「没爹」小鼠来了！科学家只用 1 个卵细胞培育出健康小鼠，还可正常繁殖后代

mammalian oocytes 的研究论文，通过基因编辑技术，他们探索了靶向表观遗传改造是否可以改善哺乳动物的孤雌生殖。他们的研究结果证明，在对 ICRs 进行基因编辑改造之后，能够直接从单个未受精的小鼠卵母细胞产生可存活的足月后代。 本研究报道的哺乳动物的孤雌生殖，是单性生殖的重要科学进步。 图片来源：PNAS 主要研究内容 研究人员指出，由于基因组印记的存在，先前旨在产生哺乳动物孤雌生殖后代的研究工作均失败了。因此，研究人员首先采用了不同的方法尝试去克服这个问题。 他们从雌性小鼠身上取出

B16细胞的传代

细胞增殖快非常好养，但是要及时换液，否则也很容易死亡、或变形。我养的最好的时候，天天都在换液，两三天就要消化传代。我用的消化液一般是 消化用含EDTA的胰酶0.25%，个人感觉效果比较好一点。消化步骤：吸出培养液，加入PBS洗涤（视培养瓶大小加入相应的量，25CM加入1-2ML）而后加一次胰酶（25CM培养瓶加0.6ML）作用2-3分钟，轻轻摇晃使均匀作用在细胞层面上。要一直在显微镜下观察，以防消化过头，等细胞从梭形变成椭圆形（或是棱角变钝），本来连成片的细胞之间开始有小小的空间，细胞与细胞