矿物油(石蜡油)

特别提示：包括矿物油(石蜡油)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：矿物油(石蜡油)
英文名称：Mineral oil

产品货号：矿物油(石蜡油)
产品规格：20ml

本品为矿物油，也叫石蜡油，可用于PCR或其它酶反应等液面的封闭，本品密度为密度为0.838-0.854g/ml。

储存条件：室温。

除了矿物油(石蜡油),，我公司还供应以下相关产品：



名称：PCR抑制物清除剂
货号：BTN60804
规格：1mL
用血液、土壤、植物、中药材等样品中提取的DNA 经常含有会抑制PCR的产物。本产品专门用于解除这些PCR 抑制剂的抑制作用，使DNA 能够用于PCR扩增。

产品特点：
1. 使用简单，直接加入PCR反应体系中使用。
2.适用范围广，可以用于解除血液、土壤、植物、中药材等DNA样品中的PCR 抑制剂。

低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：将本产品按1：10的比例加入到PCR反应体系中即可进行PCR，如果PCR反应体系为50μL，则需要加本产品5μL。

名称：一步式RT-PCR Mix
货号：BTN130609
规格：1mL
本产品是基于Tth DNA聚合酶的单酶一管式RT-PCR试剂盒。Tth DNA聚合酶通过其逆转录酶活性合成cDNA，再通过其DNA聚合酶活性进行PCR扩增。它跟常规MMLV和AMV的最大区别是逆转录过程可以在高温进行，能有效打开RNA的二级结构，其示意图如下：

同时操作简单一步完成，其操作流程图如下：


产品特点：
1.中途添加试剂，省去反复打开和关闭反应管盖的麻烦，便于同时处理多个检测样品。
2.样品之间的交叉感染和纵向感染的危险性比较低，可以避免假阳性。
3. 改良了酶的品质，实现了优良的检测敏感度。
4. 即开即用，非常方便。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

名称：富含GC PCR Buffer
货号：YT377
规格：2ml
本品提供了4种不同的GC-rich PCR Buffer，为扩增高GC含量的DNA片段提供了多种不同的选择，大大提高了高GC含量DNA片段的扩增成功率。

本套装提供的Buffer可以单独使用，也可以组合使用。这样可以在更多条件下优化PCR条件。

提供了推荐的几种经过优化的GC-rich PCR Buffer的组合方式，便于用户直接选用。

根据相关文献报道，单一的GC-rich PCR Buffer对于某一个高GC含量的DNA片段的扩增效果很好，但对于另外一个高GC含量的DNA片段则很可能会扩增效果不太理想。正因为很难采用一种通用的GC-rich PCR Buffer 完成对于不同的高GC含量DNA片段的扩增，因此对于高GC含量DNA片段的扩增一直是分子生物学操作过程中的一个难点。针对这一实际情况，我司推出了可以给予用户多种条件进行优化组合的4管套装GC-rich PCR Buffer。

本GC-rich PCR Buffer可以适用于各种常见的耐热DNA 聚合酶例如Taq DNA polymerase、Pfu DNA polymerase等。

产品组份：
5×GC-rich PCR Buffer A————0.5ml
5×GC-rich PCR Buffer B————0.5ml
5×GC-rich PCR Buffer C————0.5ml
5×GC-rich PCR Buffer D————0.5ml

注意事项：
1）在使用本试剂盒提供的GC-rich PCR Buffer的同时，必须同时使用和DNA聚合酶配套的最终浓度为1×的含镁离子PCR Buffer。
2）由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍，在操作时请注意避免微量待扩增DNA的污染，并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。

储存条件：-20℃。

名称：miRNA cDNA第一链合成试剂盒
货号：WE0157
规格：25次
  本试剂盒采用在miRNA 3’末端加多聚A尾的方法来使miRNA具有Poly(A)尾，之后再使用Oligo(dT)-Universal tag通用逆转录引物进行逆转录反应，最终合成miRNA对应的第一链cDNA。

  miRNA cDNA第一链合成试剂盒包含miRNA 3’末端Poly(A)尾修饰过程及修饰后逆转录过程需要的全部试剂。该试剂盒具有非常高的Poly(A)修饰和逆转录效率，可以从1ng-2μg的total RNA中有效获得miRNA对应的cDNA第一链。并且操作简便、快捷，可以用于从一个反应合成的cDNA中同时检测多种miRNA，不仅减少了误差、节约了样品，同时还实现了检测的高通量。

试剂盒组成：

组份	25次
Tris-Hcl，1 mM，PH 8.0	1ml
E.coli Poly(A)Polymerase，5U/μl	15μl
10×Poly(A)Polymerase Buffer	80μl
ATP，10 mM	15μl
RT Primer，25μM	90μl
5×UltraRT Buffer	120μl
UltraPure dNTP Mix，10 mM each	30μl
UltraRT	15μl
RNase-Free Water	1ml

备注：本试剂盒须与miRNA荧光定量检测试剂盒(WE0158)配套使用。

自备实验材料：1ng-2μg的总 RNA，或0.1ng-1μg的小分子RNA。

注意事项：
预防RNase污染，应注意以下几方面：
1、使用无RNase的塑料制品和枪头，避免交叉污染。
2、玻璃器皿应在使用前于180℃高温下干烤4小时，塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分钟，用水彻底冲洗后高压灭菌。
3、配制溶液应使用无RNase的水。
4、操作人员戴一次性口罩和手套，实验过程中要勤换手套。

使用方法：

A．miRNA加Poly(A)尾的过程：
1、首先根据所用RNA的量，按如下公式，用1 mM Tris(PH8.0)来稀释10 mM ATP：
ATP稀释系数=5000/__ng的总RNA
例：如果总RNA的起始用量为100ng，那么ATP稀释系数=5000/100=50。即将ATP稀释50倍(1μl的10 mM ATP加49μl的1 mM Tris，PH8.0)。
2、向冰浴中预冷的无RNase反应管中加入以下试剂至总体积25μl。
 

试剂	25μl反应体系	终浓度
total RNA	Xμl	可达2μg
10×Poly(A)Polymerase Buffer	2.5μl	1×
第“1”步中稀释好的ATP	1μl	—
E.coli Poly(A)Polymerase, 5U/μl	0.5μl	2.5 U
RNase-Free Water	up to 25μl	—

注意：反应中使用的total RNA必须含有小分子RNA。

此过程也可以直接使用小分子RNA(建议加入量为2-5μl。请根据目的miRNA的丰度来确定加入量)。

3、轻轻混匀上述反应液，短暂离心将液体收集于管底。37℃，孵育15分钟。此过程结束后，立刻进行第一链cDNA的合成，或于-20℃暂存。如需长期保存，建议存放于-80℃。

B．修饰后的miRNA cDNA第一链合成的过程：
1、向冰浴中预冷的无RNase反应管中加入下表中试剂，至终体积20μl：
 

试剂	20μl反应体系
上述Poly(A)反应液	4μl
UltraPure dNTP Mix，10 mM each	1μl
RT Primer，25 μ M	3μl
5×UltraRT Buffer	4μl
UltraRT	0.5μl
RNase-Free Water	7.5μl

2、轻轻混匀上述反应液，短暂离心将液体收集于管底。42℃，孵育50分钟。
3、85℃，孵育5分钟，终止反应。合成的cDNA反应液可以直接进行荧光定量检测实验，也可以于-20℃保存备用。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。