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上海康朗生物科技有限公司
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1
外泌体(Exosome)是直径约为30-150nm,密度在1.13-1.21g/m1的小囊泡。Exosome天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液和母乳,外泌体是活细胞分泌的来源于晚期核内体(也称为多囊泡体 )的膜性囊泡。
总外泌体捕获和定量试剂盒(血清)研究发现,Exosome内含有与细胞来源相关的蛋白质rRNA和microRNA,并且exosome能够通过生物屏障,在细胞间传递功能性核酸分子,从而发挥各种生物学功能。
总外泌体捕获和定量试剂盒(血清)服务内容:
1,外泌体提取服务
从体外培养的细胞中分离和提取exosome的主要方法是超速离心法,这种方法缺点也不少:耗时耗力,往往需要30个小时左右;每次最多只能处理6个样品;需要大量的起始材料;产量不高。
我公司自主开发外泌体快提取试剂盒,快速高效获得高纯度外泌体颗粒。
- 外泌体电镜检测服务
全血,血浆;
细胞上清液;
体液:尿液、心包积液、唾液、脑脊液、腹水等。
用于分离外泌体类型及所需量:
血清样本: 5ml (全血10ml);
血浆样本: 5ml (全血 8-10ml);
无血清培养细胞上清:50ml;
体液: 20ml;
总外泌体捕获和定量试剂盒(血清)外泌体粒径检测服务
来自细胞培养上清液提取的外泌体,通过美国PSS Nicomp 380 Z3000粒度仪检测
3,外泌体基因、蛋白检测分析服务
外泌体microRNA检测分析;
外泌体lncRNA检测分析;
外泌体蛋白表达检测分析;
4,外泌体NSG测序服务
总外泌体捕获和定量试剂盒(血清)相关产品
外泌体提取纯化试剂盒;
Cd63-GFP真核表达质粒;
Cd63-GFP腺病毒颗粒;
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文献和实验1、外泌体提取纯化试剂盒如何保存? 室温保存(10℃~30℃),无需低温保存。温度过低时 ECS 试剂会出现冻结状态,此时用 65℃ 水浴 1 h 进行解冻即可。 2、外泌体提取纯化试剂盒能否分离纯化 200-1000 nm 直径的囊泡? 不能,本试剂盒不适用于直径大于 200 nm 囊泡的分离。粒径在 200 nm 以上的属于大囊泡,而非外泌体。 3、样品在提取外泌体之前是否可以低温保存? 可以。长期保存请放置于 -80℃,无需加冻存液;短期保存(1-2 天内)则放置于 4℃ 即可
第一步细胞培养:外泌体来自于细胞,必须先从源头抓起,高质量的细胞及上清液产出高质量的外泌体。 收集上清的细胞培养原则:在细胞健康正常生长的前提下,尽可能的减少血清外泌体或是不使用血清。 培养条件 优点 缺点 1 含血清的完全培养基 ✘ 血清中含有大量异源外泌体 2 含去外泌体血清的培养基 ✔ 营养相对丰富 去外泌体血清难以做到 100% 的去除的,因此即使 1% 的血清外泌体残留也带来大量的异源外泌体 3 基础培养
细胞来说要少很多。 最后,针对细胞上清液的外泌体的提取。这个是老生常谈的问题,这里就不再多讲了。如果实验室有超速离心机的话,那就使用超速离心的方法,按照前文建议的预处理操作后,超离后的沉淀也会增加的,同时外泌体的质量也会提升。如果实验室没有超离的情况下,也可以通过试剂盒的方法来提取,除了进口品牌外,也可以使用一些国产试剂盒,质量也不亚于进口品牌的。 总结一下,为了获得高质量的外泌体:需要在细胞培养时减少正常血清的使用,推荐去外泌体血清或者外泌体专用无血清培养基;收获
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