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培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。
(1)固体培养基。是在培养基中加入凝固剂,有琼脂、明胶、硅胶等。固体培养基常用于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。
用于微生物分离,鉴定,计数。如图,微生物分离成菌落、菌苔。图中为大肠杆菌菌落,是用涂布平板法得到。
用于分离微生物的固体培养基
用于分离微生物的固体培养基
(2)半固体培养基。是在液体培养基中加入少量凝固剂而呈半固体状态。可用于观察细菌的运动、鉴定菌种和测定噬菌体的效价等方面。
用于观察微生物运动特征。如图,左侧试管中微生物不运动,而右侧试管中微生物运动,因而两试管中现象不同
用于观察微生物运动特征的半固体培养基
用于观察微生物运动特征的半固体培养基
(3)液体培养基。液体培养基中不加任何凝固剂。这种培养基的成分均匀,微生物能充分接触和利用培养基中的养料,适于作生理等研究,由于发酵率高,操作方便,也常用于发酵工业。
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AHM鉴别培养基品牌按培养基组成物质的化学成分区分
根据对培养组成物质的化学成分是否完全了解来区分,可以将培养基分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基。
(1)天然培养基。天然培养基是指利用各种动、植物或微生物的原料,其成分难以确切知道。例如培养细菌常用的肉汤蛋白胨培养基:牛肉膏3g,蛋白胨5g,水1000mL。
用做这种培养基的主要原料有:牛肉膏、麦芽汁、蛋白胨、酵母膏、玉米粉、麸皮、各种饼粉、马铃薯、牛奶、血清等。用这些物质配成的培养基虽然不能确切知道它的化学成分,但一般来讲,营养是比较丰富的,微生物生长旺盛,而且来源广泛,配制方便,所以较为常用,尤其适合于配制实验室常用的培养基和大生产上的培养基。
这种培养基的稳定性常受生产厂或批号等因素的影响,另外自养微生物一般不能在其上面生长。
(2)合成培养基。合成培养基是一类化学成分和数量完全知道的培养基,它是用已知化学成分的化学药品配制而成。例如培养细菌的葡萄糖铵盐培养基:C6H12O60.2%,K2HPO40.7%,KH2PO4 0.3%,Na3C6H5O70.05%,MgSO4·7H2O0.01%,(NH4)2SO40.1%,H2O 100mL。
这类培养基化学成分精确、重复性强,但价格昂贵,而微生物又生长缓慢,所以它只适用于做一些科学研究,例如营养、代谢的研究。
(3)半合成培养基。在合成培养基中,加入某种或几种天然成分;或者在天然培养基中,加入一种或几种已知成分的化学药品即成半合成培养基。例如马铃薯蔗糖培养基等。如果在合成培养基中加入琼脂,由于琼脂中含有较多的化学成分不太清楚的杂质,故也只能算是半合成培养基。这种培养基在生产实践和实验室中使用最多。
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大鼠C型尿肽(CNP)ELISA试剂盒 ,英文名: CNP ELISA Kit
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改良甘露醇卵黄多粘菌素琼脂基础250g用于蜡样芽孢杆菌分离培养和计数
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卵黄双抗培养基(EPV) 250g 用于脑膜炎双球菌分离培养
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MIU培养基 20支/包 用于细菌的复合生化试验
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科玛嘉大肠杆O157菌显色培养基 1000ml 此培养基用于分离和鉴定大肠杆菌O157
BLB培养基250用于双歧杆菌的分离培养incubationmediaBLB培养基250用于双歧杆菌的分离培养
SCHAEDLER琼脂 250g 用于厌氧菌的分离培养
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文献和实验细胞来说要少很多。 最后,针对细胞上清液的外泌体的提取。这个是老生常谈的问题,这里就不再多讲了。如果实验室有超速离心机的话,那就使用超速离心的方法,按照前文建议的预处理操作后,超离后的沉淀也会增加的,同时外泌体的质量也会提升。如果实验室没有超离的情况下,也可以通过试剂盒的方法来提取,除了进口品牌外,也可以使用一些国产试剂盒,质量也不亚于进口品牌的。 总结一下,为了获得高质量的外泌体:需要在细胞培养时减少正常血清的使用,推荐去外泌体血清或者外泌体专用无血清培养基;收获
方法见示意图1)。 图1 脾脏研磨方法示意图 2)将悬有脾脏细胞的分离液立即转移入无菌离心管中,在上层覆盖适量的RPMI 1640培养基,且需保持液面分界清晰。 3) 800g,室温,离心 20min-30min(注:设置较慢的加速度和减速度,如果有十档,设为第三档)。 4) 离心结束后,吸弃RPMI 1640培养基,小心吸取脾脏单个核细胞层(即白膜层)并转移至15mL离心管中。离心结束后,管内液面从上至下依次为RPMI 1640培养基层、脾脏单个核细胞层、分离液层和红细胞层(见图
血,按照1:1比例加入RPMI 1640培养基,将血液进行稀释(以降低血液粘稠度),轻柔混匀,备用。 2) 向无菌离心管内加入适量的单个核细胞分离液,将稀释后的脐带血平铺到分离液液面上方(分离液:稀释脐带血=1:2),保持两液面界面清晰。 3) 800g,室温,离心 20min-30min(注:设置较慢的加速度和减速度,如果有十档,设为第三档)。 4) 离心结束后,吸弃血浆层,小心吸取CBMC层(即白膜层)并转移至15mL离心管中。离心结束后,管内液面从上至下依次为稀释血浆层、CBMC层、分离
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