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标本溶血:
1、脱水、休克等疾病使得穿刺困难而溶血;
2、抽血器质量不合格导致溶血;
3、血清分离不当导致溶血;
4、红细胞有先天或获得性缺陷而易破坏溶血;
5、患溶血性疾病。
溶血的干扰机理:
1、血细胞中浓度远高于血清浓度:血细胞中高浓度物质溢出,测定结果偏高。如K、CK、LDH、AST等,轻度溶血即可有很大影响。
2、血细胞中浓度低于血清浓度:此时溶血相当于血清稀释而结果偏低。如血糖、r-GT等。
、检测大多是检测化学反应前后颜色变化程度来计算待检物浓度。血红蛋白的红颜色会造成干扰。
控制影响因素:
开展常规项目的室内质量控制,绘制质控图和观察室内环境;谨慎使用检测方法学;
在使用某一方法时,先虑标本量是否太少或血清凝固,需重新处理标本进行测定;如果是采用速率法,要考虑是否是酶活力过高;动态反应曲线是否正常,注意有无提示数据报警;
仪器方面,如果发现某一时间的结果全部偏低,就要考虑是否引入了系统误差,是否发生仪器的样品针堵塞,搅拌棒搅拌不均等情况,或样品针注射器漏气,或试剂的交叉污染,或光源灯老化等问题;避免标本的溶血或脂血现象。
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文献和实验铁氰化物,后者与铜离子结合成亚铁氰化铜而呈棕色沉淀,以此证明酶活性的存在。若用四异丙基焦磷酰胺ISO-OMPA抑制非特异性胆碱酯酶,则可单独显示乙酰胆碱酯酶。 1)孵育液配制 乙酰硫代胆碱碘盐 5mg 0.1mol/L醋酸缓冲液(pH l 5) 6.5ml 完全溶解后依次加入以下溶液: 0.1mol/L (2.94%)枸橼酸钠 0.5ml 30mol/L (0.75%)硫酸铜 lml 5mol/L (0.164%)铁
蒸馏水将之溶解后,定容至100ml。 (2)0.1mol/L正丁酸溶液:称取13g碘和约40g碘化钾,放置于研钵中。加入少量蒸馏水后,将之研磨至溶解。用蒸馏水定容到1000ml,在棕色瓶中保存。此时可用标准硫代硫酸钠溶液标定其浓度。 (3)0.5mol/L正丁酸:取0.05ml正丁酸,用0.5mol/L氢氧化钠溶液100ml溶解即成。 (4)0.1mol/L碘酸钾(KIO3)溶液:称取0.8918g干燥的碘酸钾,用少量蒸馏水将之溶解,最后定容至250ml (5)0.1mol
酸钾钠的热水溶液中,再加5g结晶酚和5g亚硫酸钠,搅拌溶解,冷却后加蒸馏水定容至1000mL,贮于棕色瓶中备用。(3)碘-碘化钾溶液:称取5g碘和10g碘化钾,溶于100mL蒸馏水中。(4)酚酞指示剂:称取0.1g酚酞,溶于250mL70%乙醇中。(5)6M HCl 和6M NaOH各100mL。四、操作步骤1. 制作葡萄糖标准曲线取7支20mL 具塞刻度试管编号,按表1分别加入浓度为1mg/mL 的葡萄糖标准液、蒸馏水和3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂,配成不同葡萄糖含量的反应液。表1 葡萄糖标准
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