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文献和实验生成羧基氨基咪唑核苷酸(carboxyamino imidazole ribotide,CAIR)。 (8)获得N1原子:由天门冬氨酸与AIR缩合反应,生成5-氨基咪唑-4-(N-琥珀酰胺)核苷酸(4-aminoimidazole-4-(N-succinylocarboxamide)ribotide,SACAIR)。此反应与(3)步相似,由ATP水解供能。 (9)去除延胡索酸:SACAIR在SACAIR甲酰转移酶催化下脱去延胡索酸生成5-氨基咪唑-4-甲酰胺核苷酸(5-
( 1)氨甲酰磷酸转移酶( EC 2, 7, 2, 9) ( 2)天门冬氨酸转氨甲酰酶(( 2, 1, 3, 2) ( 3)二氢乳清酸酶( 3, 5, 2, 3) ( 4)二氢乳清酸脱氢酶( 1, 3, 1, 14) ( 5)乳清酸磷酸核糖基转移酶( 2, 4, 2, 10) ( 6) 5-磷酸脱羧酶乳清酸核苷( 4, 1, 1, 23) ( 7)核苷单
荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)
放大,因此灵敏度不如间接标记的方法。实验用具及材料相关溶液的配制1)20×SSC:175.3g NaCl,88.2g柠檬酸钠,加水至1000mL(用10mol/L NaOH调pH 至7.0)。2)去离子甲酰胺(DF):将10g混合床离子交换树脂加入100mL甲酰胺中。电磁搅拌30min,用Whatman l号滤纸滤。3)体积分数70%甲酰胺/2×SSC:35mL甲酰胺,5mL 20×SSC,10mL水。4)体积分数50%甲酰胺/2×SSC:100mL甲酰胺,20mL 20×SSC,80mL水。5)体积
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