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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海邦景
- 库存:
大量
- 靶点:
ASB10
- 克隆性:
多克隆
- 抗体英文名:
Anti-ASB10
- 抗体名:
含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族10抗体
- 标记物:
HRP/AKP等
- 宿主:
人、小鼠、大鼠、兔等
- 适应物种:
人、小鼠、大鼠、兔等
- 亚型:
IgG
- 形态:
液体或固体
- 应用范围:
WB IHC-P IHC-F IF
- 保存条件:
低温冻存
- 规格:
100ul
英文名:Anti-ASB10
价格:电询
我司提供各种科研所需的抗体,包括一抗、二抗、抗原,单克隆抗体、多克隆抗体以及标记抗体等,同时我们也提供定制服务以及抗体标记服务,具体详情可点击这里咨询!
免疫-PCR技术:
1、基本原理
免疫-PCR主要由两个部分组成即类似于普通酶联免疫吸附实验(ELISA)的抗原抗体反应和常规的PCR扩增和电泳检测。以一段特定的双链或单链DNA来标记抗体,用PCR扩增抗体所连接的DNA,并进行电泳检测,因此可由PCR产物的量来反映抗原分子的量。免疫-PCR结合了抗原抗体反应的特异性和PCR的高度敏感性,成为一种极为敏感的抗体依赖的抗原检测技术。
2、免疫-PCR的改进
将不同的抗体标上特异的DNA序列,形成一种新的、基于双抗夹心免疫模式的免疫-PCR,并可同时检测多种抗原,避免了免疫实验敏感性的限制和在一个实验中检测抗原的种类。免疫-PCR夹心模式可以用常规的免疫实验完成。这样就大大降低了原先免疫-PCR实验的复杂性,并减少了大量的操作时间。这种免疫-PCR系统的关键改进就是用异双功能化学关联剂制备标记DNA-抗体偶联物。
3、多分析物免疫-PCR
含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族10抗体制备过程如下:
(1)氨基修饰寡核苷酸与SATA反应,形成乙酰硫代乙酰修饰DNA。
(2)Sulfo-SMCC与抗体反应,形成马来酰亚胺修饰抗体。
(3)混合马来酰亚胺修饰抗体和乙酰硫代乙酰修饰DNA,并加入羟胺盐酸,在黑暗条件下反应,使抗体和标记DNA偶联。
(4)反应混合物用HPLC凝胶过滤纯化偶联物,收集的偶联物在4℃下保存。
在多分析物免疫-PCR实验中,几千个bp的dsDNA可以通过生物学和生物化学方法制备。通过PCR和单向缺失在以Puc18为基础的重组质粒上制备了各种长度、具有相同引物序列的的dsDNA,选择适合长度的dsDNA作为特异性抗体的标记物。而且dsDNA比ssDNA具有更高的稳定性。此外,长链DNA分子更容易用荧光标记和光吸收检测,并且可以引入更多的非同位素标记,序列长度的提高可以促进杂合检测。
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文献和实验细胞染色buffer(或含1%BSA的PBS)重悬细胞,用流式细胞仪进行检测和分析。 注意事项 在抗体使用之前,快速离心一下,使之聚集到管的底部。 荧光标记的抗体应该避光4℃保存,不要冷冻。 当染色的时候,固定或延迟分析可能降低某些抗体的荧光信号。为了得到更好的结果,染色后应该马上分析。 二、细胞内细胞因子染色步骤 细胞准备 1.1 收集细胞。经刺激和阻断处理的细胞(具体处理方案请参考文献进行),加细胞染色buffer(或含1%BSA的PBS)制成单细胞悬液,调整细胞浓度约为1 × 107/mL
人外周血单细胞悬液制备流程 1.采集人外周血样本于抗凝管中。 离心管内加入100 μL新鲜血和2 mL 1×红细胞裂解液,混匀,4℃裂解10 min。 300 g离心5 min(裂解完立即离心,防止时间过长损伤细胞),弃上清,得到白色细胞沉淀。 PBS洗涤一次。 加入100 μL细胞染色缓冲液重悬细胞,不用计数,即可进行后续流式抗体染色实验。按照100 μL新鲜血样本制备的单细胞悬液,加入1 Test对应的流式抗体混匀进行后续实验。 注意事项: 1. 采血用抗凝管,有肝素和EDTA两种
「癌细胞」:是我杀了我?PNAS 这项研究竟让肿瘤自己杀死自己
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