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标本溶血:
1、脱水、休克等疾病使得穿刺困难而溶血;
2、抽血器质量不合格导致溶血;
3、血清分离不当导致溶血;
4、红细胞有先天或获得性缺陷而易破坏溶血;
5、患溶血性疾病。
溶血的干扰机理:
1、血细胞中浓度远高于血清浓度:血细胞中高浓度物质溢出,测定结果偏高。如K、CK、LDH、AST等,轻度溶血即可有很大影响。
2、血细胞中浓度低于血清浓度:此时溶血相当于血清稀释而结果偏低。如血糖、r-GT等。
、检测大多是检测化学反应前后颜色变化程度来计算待检物浓度。血红蛋白的红颜色会造成干扰。
控制影响因素:
开展常规项目的室内质量控制,绘制质控图和观察室内环境;谨慎使用检测方法学;
在使用某一方法时,先虑标本量是否太少或血清凝固,需重新处理标本进行测定;如果是采用速率法,要考虑是否是酶活力过高;动态反应曲线是否正常,注意有无提示数据报警;
仪器方面,如果发现某一时间的结果全部偏低,就要考虑是否引入了系统误差,是否发生仪器的样品针堵塞,搅拌棒搅拌不均等情况,或样品针注射器漏气,或试剂的交叉污染,或光源灯老化等问题;避免标本的溶血或脂血现象。
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文献和实验在由复合蛋白质构成的酶中,特别是能利用透析和其它方法可逆地解离其低分子成分时,称蛋白部分为脱辅基酶蛋白,低分子部分为辅酶,具有两者结合催化效应的复合蛋白质称为全酶。即辅酶 脱辅基酶蛋白 全酶。当辅酶的结合强固时称为辅基,例如硫胺素焦磷酸是丙酮酸脱羧酶( EC 4. 1. 1. 1)的辅酶,从全酶分离出后再加入到脱辅基酶蛋白中恢复其催化作用。 NAD与其说是辅酶,不如说是底物。由于脱辅基酶蛋白的某个脱氢酶的作用而转变为它的还原型,此还原型可由其它脱氢酶等的作用而被氧化。
以色素为辅基的复合蛋白质的总称。因辅基分子团种类的不同各自显有特异的色调及生物体内氧载体或氧化还原反应、光化学反应的触媒以至媒体等的生理机能。例如:(1)含铁卟啉的色素蛋白质:血红蛋白、肌红蛋白、血红蛋白(无脊椎动物)、血绿蛋白、过氧化氢酶、过氧化物酶、细胞色素等;(2)含金属络离子(络合物)的色素蛋白质:血蓝蛋白(铜)、胞浆素(铜)铁蛋白(铁)、蚯蚓血红蛋白(铁)等;(3)含黄素的:氨基酸氧化酶、葡萄糖氧化酶等;(4)含胡萝卜素的色素蛋白质:视紫红质;(5)含吡咯衍生物的:叶绿素、植物
溶液用于测定激活前的蛋白含量及酶活性。原溶液中加入5mg结晶胰 蛋白酶 ,轻轻搅拌均匀,25℃放置2~4h,或4℃放置12~16h,使胰 蛋白酶 原活化。每隔1h取样测定胰蛋白酶活性增长情况,直至酶激活速度变慢或停止增长。一般比活可达到3 500~4 000 BAEE单位/mg。留取2mL溶液用于测定激活后的蛋白质含量和酶活性。激活酶溶液用2mol/L硫酸调pH至2.5~3.0,滤纸过滤,滤去硫酸钙沉淀,收集滤液,4℃保存备用。方法二称取冷冻猪胰脏100g
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