细菌脂多糖(LPS)提取试剂盒

特别提示：包括细菌脂多糖(LPS)提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：细菌脂多糖(LPS)提取试剂盒
英文名称：Bacterial lipopolysaccharide (LPS) Extraction Kit
产品货号：HR8082
产品规格：50T/100T

脂多糖(LPS)是革兰氏阴性菌细胞壁外膜的主要成分，结构很复杂、热稳定性极高(在250℃下干热灭菌2h 才完全灭活)。受LPS 发现的历史原因，如今LPS的概念几乎等同于内毒素(endotoxin)。LPS 由多糖链和脂质A组成，不同细菌间的多糖链是高度变化的，决定细菌的血清型；而脂质A 主要影响LPS的毒性作用。LPS可以引起免疫刺激的级联反应和机体的毒性病理生理活动，包括释放内毒素引起感染性休克从而导致末梢血管虚脱。临床常通过检测LPS的存在来诊断脑膜炎。
由于LPS 与机体免疫机能的密切关系，生命科学研究常常提取LPS 进行相关的研究，如阐明LPS的结构，代谢，免疫学，生理学，毒性，生物合成途径；诱导生长促进因子如白介素的合成与分泌；诱导疾病研究的动物模型如炎症反应，急性肺损伤。
本试剂盒采用简单步骤即可快速提取细菌脂多糖，提取产量高，省时，蛋白质和核酸污染低。

储存条件：2-8℃保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

产品特点：
1．适用性广，能从所有革兰氏阴性菌中提取LPS。
2．操作时间短，将LPS 提取的时间缩短至1-2小时。
3．操作简单方便。
4．提取LPS 下游应用广，包括直接用于免疫刺激

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管 ● 涡旋振荡器 ●冰箱，冰盒

使用方法：
1．室温8000g离心3分钟收获细菌细胞
2．加入500μl试剂A重悬细菌，8000g离心3分钟，弃上清。
3．收集沉淀，加入500μl试剂A重悬沉淀，8000g离心3分钟，弃上清。
4．收集沉淀，加入500μl提取液B重悬沉淀。
5．300w 超声10秒间隔10秒，超声20分钟。
6．10000g离心10分钟取上清。
7．上清中加入100μl提取液C，剧烈涡旋20秒充分混匀，室温孵育30分钟。
8．4℃，10000g离心10分钟。
9．转移400μlzuì上层上清至另一干净离心管，即得脂多糖样品。

除了细菌脂多糖(LPS)提取试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：



名称：APMSF溶液(10mg/mL)
货号：BTN130535
规格：1mL
本产品为浓度为10mg/mL的水溶液，其工作浓度为10-40μg/mL(10-20μM)。对脒苯基甲磺酰氯(4-Amidino Phenyl Methane Sulfonyl Fluoride，APMSF,p-APMSF)分子量为216.2，溶于水。可以特异性、不可逆抑制胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶活性，如，胰蛋白酶、凝血酶、血浆酶等。毒性比PMSF低，不能抑制胰凝蛋白酶或乙酰胆碱酯酶。


储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期6个月。

名称：枸橼酸缓冲液
货号：SNM489
规格：500ml

名称：TRA-1-81免疫组化试剂盒(IHC)
货号：KFS020
规格：50T
本试剂盒可用于免疫组织化学方法以显示人、大、小鼠来源的组织样本TRA-1-81抗原分布。

本试剂盒适用于常规福尔马林固定石蜡包埋切片、冰冻切片、培养固定的细胞涂片等。我司即用型一步法免疫组化检测试剂盒与常规免疫组化染色试剂盒相比，具有高灵敏性、高特异性及操作简便的优点。多个HRP聚合物直接与二抗相连，大大放大了抗原抗体结合的信号，减少了孵育步骤，孵育时间缩短为10分钟。试剂盒不含有生物素，完全避免了内源性生物素造成的背景影响。试剂盒提供的DAB显色试剂为增强型显色试剂，且自带稀释液，避免了由于水质的不同对DAB显色造成的影响；与一般DAB试剂相比，增强型的稳定性显著提高，显色更醒目，敏感性更高。

使用注意事项：
1. 检测标本时需同时做阴性对照和阳性对照。
2. 增强剂中含有0.1% ProClin 300 防腐剂，使用时请注意自我防护。
3. DAB 显色液需现用现配，避光放置，且在2 小时内染色。
4. 在超过有效期的试剂盒中一种或多种试剂的活性可能降低，因此不得使用过期的试剂盒，不同批号间试剂盒也不能交叉混用。

名称：27mm透析袋(透析分子量25kDa)
货号：SY0414
规格：1卷（1米）
透析袋通常为半透膜制成的袋状，以此为屏障对目的蛋白进行脱盐以及进行缓冲液的置换，透析的主要原理是：透析袋内样品的生物大分子被截留在袋内，而盐和小分子物质不断扩散透析到透析袋外，直到透析袋内外两边的浓度达到平衡为止。透析袋透析的动力是扩散压，扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析袋透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度，还正比于膜的面积和温度，通常是4℃透析。

本透析袋参数：扁平宽度为34mm，直径27mm，截留分子量25kDa。
储存条件：4℃，有效期2年。

注意事项
1）每次使用后将余下的膜放回袋子并密封好，以防干裂。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法
1）把透析袋剪成适当长度（10-20cm）的小段，具体长度需根据待透析的样品而定。
2）在大体积（eg.500mL）的2%（W/V）的碳酸氢钠和1mmol/L EDTA (pH=8.0)中将透析袋煮沸10min。
3）用蒸馏水彻底清洗透析袋。
4）放在大体积（eg.500mL）的1 mmol/L EDTA (pH=8.0)中将之煮沸10min。
5）冷却后，存放于4℃，必须确保透析袋始终浸没在溶液内。【注】：从此时起取用透析袋必须戴手套。
6）在使用前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗干净。
7）使用时，一端由透析夹夹紧，另一端灌满水，用手指稍加压，检查不漏，方可装入待透析液。
【注】：
① 通常要留1/3～1/2的空间，以防透析过程中，透析的小分子量较大或样品含盐量较高时，袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋涨破。
② 为了加快透析速度，除多次更换透析液外，还可使用转子边搅拌边透析。透析的容器要大，如大烧杯等。

名称：胞质蛋白提取试剂盒
货号：HR0023
规格：50T/100T
本试剂盒提供全套试剂，适用于从细胞和动物组织制备胞浆蛋白。提取过程简单方便，可在1小时内完成。制备的胞浆蛋白不仅纯度高，保持天然活性，而且绝少交叉污染。提取的蛋白可用于Western Blotting、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活性测定等蛋白研究。

储存条件：-20℃保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。
使用注意事项：
1．旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
2．实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

使用方法：
A．细胞蛋白提取
1．取5-10×106个细胞，在4℃，500×g条件下离心2-3分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
2．用冷 PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
3．每 20μl细胞压积中加入200μl冷的胞浆蛋白提取液，2μl蛋白酶抑制剂混合物，高速涡旋振荡15秒，置冰上10分钟。
4．再次高速涡旋振荡 5秒，然后在4℃，16000×g条件下离心5分钟。
5．快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到胞浆蛋白，请置于冰上或-80℃冰箱保存备用。
B．组织蛋白提取
1．取适量组织样本剪碎，加冷PBS，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体(或用液氮研磨)，冰上静置5分钟，小心将上清吸入另一预冷的干净离心管。
2.在 4℃，500×g条件下离心2-3分钟，弃上清。
3．按照细胞蛋白的提取方法的第 3 步骤往下操作即可。
上述蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用。

名称：磷酸酶抑制剂混合物1(100×)
货号：MT0070
规格：100μl|100μl×3
本制品包含100mM Sodium Fluoride 、100mM Sodium Orthovanadate、400mM Sodium Tartrate、115mM Sodium Molybdate、200mM Imidazole，用于非磷酸及磷酸化蛋白的研究，可抑制Acid phosphatases、Alkaline phosphatases、PTPs、ATPases、Acid phosphatases、Acid and phosphoprotein、Alkaline phosphatases等。

使用方法：
磷酸化蛋白的提取：在使用前数分钟内向RIPA裂解缓冲液(货号：MT0066)中，加入蛋白酶抑制剂混合物 、磷酸酶抑制剂混合物1 、磷酸酶抑制剂混合物2各2.5μl，使其zuì终浓度为1×。如242.5μl RIPA裂解缓冲液(Western Blot)，加入2.5μl蛋白酶抑制剂混合物、2.5μl磷酸酶抑制剂混合物1 、2.5μl磷酸酶抑制剂混合物2，混合均匀，进行后续样品裂解和蛋白提取。

储存条件：-20℃

名称：蓝色预染蛋白Marker（18～94kDa)
货号：WH0175
规格：20次（100μl)
本制品为几种蛋白质分别纯化预染后混合而成的蛋白质溶液，这些蛋白混合物与蓝色或彩色染料共价偶联，可在凝胶电泳时出现强度均匀的蛋白带，可以直接观察蛋白电泳及判断Western转移效果。同未预染的蛋白标准相比，预染蛋白Marker因与染料共价偶联而在SDS-PAGE电泳时的迁移特性发生某些改变。如果要精确判定分子量，推荐将我公司的非预染蛋白质Marker（目录号：WH0177）与预染蛋白Marker配合使用。本制品适合于12%-15% SDS-PAGE电泳。无需加热，直接上样，使用更方便。本制品中每种蛋白约0.2-0.3μg/μl。



贮存液成分：30mM Tris-HCl（pH7.5)；10mM EDTA；33％甘油；2％ SDS

附：
1× SDS-PAGE buffer：3.0g Tris.base（25mM)，18.8g Glycine（250mM)，1g SDS，用ddH2O定容至1L。
1× Transfer buffer（干转)：5.8g Tris.base（48mM)，2.9g Glycine（39mM)，0.37g SDS，20％*醇，用ddH2O定容至1L。

保存条件：短期内多次使用置于4℃，-20℃保存一年。

使用方法：
使用前请将其置于室温或37-40℃数分钟，彻底溶解并震荡混匀后使用（请不要煮沸）。取10μl加入到凝胶（1mm厚mini-gel)孔内；若加样孔较大，可适当增加其用量。适用于蛋白质凝胶电泳和蛋白质转膜等（从PAGE胶转移到NC膜或PVDF膜上）实验。

电泳条件：
凝胶浓度为12-15％ SDS-PAGE，120-200 V电泳30-50min（Mini电泳装置）。

注意事项：
1．电泳时间过长将导致蛋白条带发散现象。
2．不适合低电压长时间（过夜)转膜。