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BL21 感受态细胞

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  • ¥180 - 1850
  • YBscience
  • YB07231
  • 进口/国产
  • 2025年07月09日
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    • 英文名

      BL21 Chemically Competent Cell

    • 保质期

      三年

    • 供应商

      上海钰博生物科技有限公司

    • 保存条件

      低温保存

    • 规格

      10×100ul / 20×100ul

    BL21 感受态细胞
    编号 名称 规格
    YB07231 BL21 Chemically感受态细胞 10×100ul
    BL21感受态细胞基因型:
    E. coli B F- dcm omphsdS(rB- mB-gal [malB+]K-12(λS)
    BL21感受态细胞说明:
    BL21是最早开发的用于原核表达的菌株,BL21(DE3)RosettaOrigamiB(DE3) 等一系列原核表达菌株均来源于BL21菌株。该菌株主要用于非毒性蛋白的表达,不含T7 RNA聚合酶,所以不能用于由T7启动子驱动的蛋白表达(如:pET系列);但含有大肠杆菌RNA聚合酶,可以用于tactrc等使用大肠杆菌RNA聚合酶的原核系统的表达(如:pGEXpMAL质粒)。BL21感受态细胞由特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率达107cfu/µg DNA
    BL21感受态细胞操作方法
    1.   BL21感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。
    2.   42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
    3.   向离心管中加入700ul不含抗生素的无菌培养基 (2YTLB),混匀后37℃,200 rpm复苏60分钟。
    4.   5000 rpm离心一分钟收菌,留取100ul左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YTLB培养基上。
    5.   将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
     
    BL21感受态细胞注意事项:
    1.   感受态细胞最好在冰中缓慢融化,插入冰中8分钟内加入目标DNA,不可在冰中放置时间过长,长时间存放会降低转化效率。
    2.   混入质粒时应轻柔操作。
    3.   转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
    4.   诱导时,IPTG浓度可选(0.1-2 mM均可)。
    5.   为获得需要量的蛋白,最佳诱导时间,温度,IPTG浓度需实验者优化。
     
    BL21感受态细胞保存条件: -80
     

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