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详见说明书
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上海抚生
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低温阴凉处保存
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1.5ml
产品名称:脂质体2000
CAS号:
包装:1.5ml
纯度:BR
脂质体20001.5ml订购说明:
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脂肪酸介绍:
脂肪酸是由碳、氢、氧三种元素组成的一类化合物,是中性脂肪、磷脂和糖脂的主要成分。许多脂类的物理特性取决于脂肪酸的饱和程度和碳链的长度,其中能为人体吸收、利用的只有偶数碳原子的脂肪酸。
必需脂肪酸:维持哺乳动物正常生长所必需的,而动物又不能合成的脂肪酸,如亚油酸,亚麻酸。
亚麻酸及N-3系列:
1. α-亚麻酸(AIpha-linolenic acid,ALA),ALA的主要功能在于它是n-3多不饱和脂肪酸(EPA、DHA)合成前体。
2. 二十碳五烯酸(Eicosapentaenoic acid,EPA),是一类重要的多聚不饱和脂肪酸化学信使物,在免疫和炎症反应上起至关重要的作用。
3. 和二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA)。动物实验显示,DHA是视网膜正常发育和发挥其正常功能所必需的。大脑和神经组织中DHA含量远远高于机体其他组织,对神经功能发挥着至关重要的作用。
4. 二十二碳五烯酸(Docosapentaenoic acid,DPA),是ALA在体内生成EPA和DHA的中间产物,对人体而言不具有生理活性。Simon(1995)观察到血浆磷脂中DPA的水平与冠心病的发病率呈反比,推测DPA对冠心病具有潜在的抑制作用。
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文献和实验本次实验采用的脂质体是promega公司的TransFast脂质体试剂,它是一种阳离子脂质体和中性脂质体的混合物,是对于本次实验中采用的293T细胞优化的转染试剂。 三、实验材料与器材 1、材料 293T细胞 MyoD表达质粒和EGFP表达质粒 DMEM培养基 链霉素/青霉素(双抗) FCS(小牛血清) PBS(磷酸盐缓冲溶液) 胰酶/EDTA消化液 转染试剂(TransFast2、器材 20ul/200ul/1ml微量移液器和Tip头 酒精
-MEM漂洗细胞2次,加入无血清基础培养基opti-MEM 1.5mL; 3. 将溶解后的siRNA稀释于250?l无血清的基础培养基opti-MEM中;取5-10ul脂质体混匀于250?l无血清的基础培养基opti-MEM中。静置5min; 4. 将脂质体稀释液及siRAN稀释液混合,轻轻混匀,室温放置20分钟; 5. 将脂质体-siRNA混合液加入细胞培养孔中; 6. 6小时后吸弃转染复合物,换入含10%胎牛血清的新鲜培养基; 7. 细胞在 CO2 培养箱中 37 ℃温育
板液体每孔在 2ml 左右,不宜太多,或者太少。取两个 1.5mlEP 管,记为 A 管,B 管,每个 EP 管加入 250ul Opti-MEM I,然后 A 管加入 5-10ul lipofectamine 2000,B 管加入 100pM-200pM 的 siRNA(见买来的 siRNA 说明书),然后静置 5min,混合在一起,静置 20min,用 AB 混合液加入到 1.5ml 的无血清培养基 C 内,混匀; 将六孔板里的细胞的液体吸出,用 PBS 清洗两遍; 将 ABC 混合液 2ml
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