脂多糖（牙龈卟啉单胞菌），LPS-PG

脂多糖（牙龈卟啉单胞菌）LPS-PG，货号：tlrl-pglps

LPS-PG是从革兰氏阴性菌牙龈卟啉单胞菌中纯化的脂多糖（LPS）制备出来。LPS-PG是牙周疾病发病机制中的一个重要毒力因子。LPS是激活先天免疫系统的革兰氏阴性菌的主要成分。

 

LPS识别主要由TLR4介导，TLR4对LPS-PG的反应取决于关键辅助分子CD14和MD2的存在。LPS-PG呈现独特的异质化学结构，不同于传统公认的肠细菌来源的LPS。LPS-PG在C3H/HEJ小鼠中表现出缺乏TLR4的活性，这一事实导致人们普遍认为该LPS是TLR2配体。然而，LPS-PG的结构和功能研究表明，它通过TLR4激活细胞。

 

与市面上LPS-PG standard相比，LPS-PG Ultrapure用酶去除了脂蛋白，只激活TLR4，而LPS-PG standard是激活TLR2和TLR4。

 

所以针对激活TLR4可以选择LPS-PG Ultrapure，LPS-PG Ultrapure工作浓度如下：

 

● TLR4 activity: 100 ng- 10 μg/ml

 

同时Invivogen对LPS-PG standard的质检也非常严格，对TLR4活性验证使用HEK-Blue™ TLR4 cells细胞进行验证，使用HEK-Blue™ TLR2 cells细胞控制其他细菌成分(如脂蛋白)的存在。

LPS-PG (LPS from P. gingivalis)

Lipopolysaccharide from Porphyromonas gingivalis

LPS-PG is a purified preparation of lipopolysaccharide (LPS) from the Gram-negative bacteria Porphyromonas gingivalis. LPS-PG is an important virulence factor in the mechanisms of peridontal disease. LPS is the principal component of Gram negative bacteria that activates the innate immune system.

LPS recognition is predominantly mediated by TLR4 [1]. The TLR4 response to LPS-PG is dependent on the presence of key accessory molecules, CD14 and MD2 [2].
LPS-PG presents a unique and heterogenous chemical structure, which differs from traditionally recognized enteric bacterium-derived LPS. The fact that LPS-PG exhibits activity in C3H/HeJ mice, which are deficient for TLR4, led to a common belief that this LPS is a TLR2 ligand [3, 4].
However, structural and functional studies of LPS-PG have revealed that it activates cells through TLR4.
The TLR2 activity of LPS-PG is ascribed to a contaminant lipoprotein [5].

InvivoGen provides LPS-PG with two grades of purity:
• LPS-PG is a standard lipopolysaccharide (LPS) preparation.
• LPS-PG Ultrapure underwent enzymatic treatment to remove lipoproteins and hence only activates TLR4.
pecificity:
LPS-PG (Standard): TLR2/TLR4 agonist
LPS-PG Ultrapure: TLR4 agonist

Working concentrations :
LPS-PG (Standard):
• TLR4 activity: 100 ng - 10 μg/ml
• TLR2 activity: 10 ng/ml - 10 mg/ml
LPS-PG Ultrapure:
• TLR4 activity: 100 ng- 10 μg/ml

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LPS-PG Ultrapure (生物学活性检测，无菌）-超纯级别
tlrl-ppglps 3756元/1mg

LPS Extraction Kit 脂多糖提取试剂盒
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LPS Extraction Kit 脂多糖提取试剂盒 iNtRON 100T 1850元

试剂盒组成

组分	名称	规格	保存方法
1	Lysis Buffer	1x 100 ml	2~8℃
2	Purification Buffer	1x 80ml	2~8℃

LPS背景描述：
◆ 脂多糖（LPS）是革兰氏阴性菌细胞壁外膜的主要成分，结构很复杂、热稳定性极高（在250℃下干热灭菌2h才完全灭活）。受LPS发现的历史原因，如今LPS的概念几乎等同于内毒素（endotoxin）。LPS由多糖链和脂质A组成，不同细菌间的多糖链是高度变化的，决定细菌的血清型；而脂质A主要影响LPS的毒性作用。LPS可以引起免疫刺激的级联反应和机体的毒性病理生理活动，包括释放内毒素引起感染性休克从而导致末梢血管虚脱。临床常通过检测LPS的存在来诊断脑膜炎。
◆ 正是LPS与机体免疫机能的密切关系，生命科学研究常常提取LPS进行相关的研究，如阐明LPS的结构，代谢，免疫学，生理学，毒性，生物合成途径；诱导生长促进因子如白介素的合成与分泌；诱导疾病研究的动物模型如炎症反应，急性肺损伤，
产品描述：
◆ 最常用的LPS提取方法仍然是Westphal,O. (1965)使用的热酚-水法（hot phenol-water method），主要优势在于高产量，但是提取步骤繁琐，费时，以及常受蛋白质和核酸的污染，纯度低等缺点也常困扰科研工作者。
◆ iNtRON提供的LPS提取试剂盒是市场上的第一个商品化的产品，排除传统热酚-水法的缺陷，使得科研工作者能够快速方便的从细菌中提取LPS。
产品优势：
∷ 适用性广，能从所有G^-菌中提取LPS（见Fig. 2）；
∷ 操作时间短（包括裂解在内，60min内即可完成）；操作简单方便；
∷ 少量细菌即可获得足够的LPS；LPS产量与细菌培养物成正比，一般使用3~5ml培养物LPS产量最高；细菌最佳培养体积1~2ml（OD₆₀₀=0.8-1.2）
∷ LPS产率高，且重复性好（见Fig.1）；
∷ 提取LPS下游应用广，包括直接用于免疫刺激；
操作步骤：
1）室温离心收获细菌细胞，13，000rpm，30sec。
2）加入1ml裂解缓冲液（Lysis Buffer），剧烈涡旋混匀。
3）加入200μl氯仿，剧烈涡旋混匀10-20 sec，室温孵育5min。
4）4℃，13,000rpm离心10min，转移400μl上清到新1.5ml离心管中。
5）加入800μl纯化裂解液（Purification Buffer），并混匀。-20℃孵育10min。
6）4℃，13,000rpm离心15min。
7）用1ml 70%EtOH洗涤LPS颗粒，并完全干燥。
8）在LPS中加入70μl Tris-HCL（10mM，pH8.0），并超声。