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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 样本:
人血清、血浆、细胞裂解液或细胞培养上清
- 库存:
84
- 标记物:
过氧化物酶
- 适应物种:
人
- 应用:
用于体外定量分析人血清、血浆、细胞裂解液或细胞培养上清中Legumain的含量
- 检测方法:
ELISA(双抗夹心法)
- 检测范围:
31.2pg/ml~2000pg/ml
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
96T
特别提示:包括人天冬酰胺内肽酶(Legumain)检测试剂盒(ELISA方法)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:人天冬酰胺内肽酶(Legumain)检测试剂盒(ELISA方法)
英文名称:Human Legumain ELISA Kit
产品货号:ZN2299
产品规格:96T
本试剂盒采用夹心法酶联免疫吸附法,用于体外定量分析人血清、血浆、细胞裂解液或细胞培养上清中Legumain的含量。预先包被的抗体为Legumain多克隆抗体。检测相抗体为Legumain单克隆抗体,经生物素标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的Legumain呈正相关。
Legumain又称天冬酰胺内肽酶(asparaginyl endopeptidase,AEP),是一种溶酶体半胱氨酸蛋白酶,属于半胱氨酸蛋白酶C13家族的新成员。最初是在豆类植物种子中发现的。随后在人体也发现了Legumain,其基因定位于14号染色体。研究表明,Legumain作为一种应激反应蛋白,只在特定条件下表达。在哺乳类动物具有抗凋亡作用,在炎性反应过程中起抗原呈递作用。在多种实体瘤、肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)、肿瘤新生血管的内皮细胞中高表达,与恶性肿瘤的血管生成、肿瘤侵袭、扩散和转移密切相关, 是近年来备受关注的一类靶标蛋白酶。对Legumain的深入研究将有利于阐明恶性实体瘤的发病机制,明确其作为肿瘤基因治疗新靶标的有效性。
检测指标:Legumain;LGMN;天冬酰胺內肽酶;AEP;半胱氨酸蛋白酶legumain
检测范围:31.2pg/ml~2000pg/ml
特异性:系统和其它细胞因子无交叉反应
敏感性:<4pg/ml
产品组成:
| 组分 | 规格 | 数量 |
| 预包被抗人Legumain抗体的96孔板 | 96T | 1板 |
| 重组人Legumain标准品(冻干) | 10ng/管 | 2管 |
| 生物素标记抗人Legumain(100X) | 130μl | 1管 |
| 亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)(100X) | 130μl | 1管 |
| 样品稀释液 | 30ml | 1瓶 |
| 抗体稀释液 | 12ml | 1瓶 |
| ABC稀释液 | 12ml | 1瓶 |
| TMB显色液 | 10ml | 1瓶 |
| TMB终止液 | 10ml | 1瓶 |
| 洗涤缓冲液(25X) | 20ml | 1瓶 |
| 封板膜 | 4张 |
储存条件:2-8℃(频繁使用时),-20℃(长时间不用时)。
有效期:6个月(4℃);12个月(-20℃)。
参考标准曲线数据:(取自某一批次质检数据,仅供参考,用户需要自己建立标准曲线)
| 浓度(pg/ml) | 0 | 31.2 | 62.5 | 125 | 250 | 500 | 1000 | 2000 |
| OD值 | 0.007 | 0.151 | 0.203 | 0.307 | 0.508 | 0.871 | 1.413 | 1.988 |
我公司销售的人天冬酰胺内肽酶(Legumain)检测试剂盒(ELISA方法),LGMN检测盒,天冬酰胺內肽酶测试盒,Legumain测试盒,AEP检测盒,Legumain检测盒,半胱氨酸蛋白酶legumain检测盒,天冬酰胺內肽酶检测盒,LGMN,LGMN测定盒,Legumain检测试剂盒,天冬酰胺內肽酶检测试剂盒,AEP测试盒,天冬酰胺內肽酶,Legumain,天冬酰胺內肽酶测定盒,Legumain测定盒,半胱氨酸蛋白酶legumain测定盒,半胱氨酸蛋白酶legumain检测试剂盒,半胱氨酸蛋白酶legumain测试盒,LGMN检测试剂盒,AEP测定盒,半胱氨酸蛋白酶legumain,AEP检测试剂盒,AEP,LGMN测试盒质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验一、反应曲线 首先,我们了解一下化学反应的时间与吸光度一个曲线图,可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,如下图所示: 二、反应原理 对于延迟区来讲,无规律可寻,对于指标检测没有意义。 等速区对应的指标检测方法是速率法。速率法又称连续监测法,是在测定酶活性或用酶法测定代谢产物时,连续选取时间-吸光度曲线中线性期内4个以上测光点作为读数点,并以单位时间吸光度变化值计算结果。线性期就是此期间内各测光点之间的吸光度差值相等,此线性期对酶促反应的底物来说属于零级反应。其测光点一般设置在加入
,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法(图a)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图b)以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。 (二) 操作步骤 方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法: 1. 包被:用0.05M PH9.�碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg
细胞仪检测。 二、荧光显微镜原位检测 注:本方法优点是可以原位观察细胞凋亡,缺点是部分凋亡由于贴壁不牢而检测不到。 如果条件可以,在诱导凋亡后,用多孔板离心机300 g离心5 min。 吸除细胞培养液,用PBS洗涤两次(如果条件允许,在此前做步骤A)。 离心后弃上清,加入500 μL稀释成1 × 的Annexin V Binding Buffer工作液。 加入5 μL的荧光素标记-Annexin V和5μL的细胞核染色液。 移液器轻轻混匀,室温避光孵育15~20 min。 Annexin V Binding
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