唾液基因组DNA提取试剂盒

特别提示：包括唾液基因组DNA提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：唾液基因组DNA提取试剂盒
英文名称：Saliva DNA Extraction Kit

产品货号：唾液基因组DNA提取试剂盒
产品规格：50次|200次

  本试剂盒适合于从新鲜唾液或唾液/保存液混合液中提取基因组DNA。本产品纯化过程不需使用苯*(代"酚")或氯*(代"仿")等有毒溶剂，无需乙醇沉淀。优化的缓冲体系使DNA高效特异地结合到硅基质离心吸附柱上，PCR和其他酶促反应的抑制剂可通过两步洗涤步骤被有效去除，最后使用低盐缓冲液或水洗脱，即可得到高纯度DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。

试剂盒组成：

组份	50次	200次
Buffer GL	25ml	100ml
Buffer GW1(浓缩液)	13ml	52ml
Buffer GW2(浓缩液)	15ml	10ml
Buffer GE	15ml	60ml
蛋白酶K	2×25mg	180mg
蛋白酶K 储存液	2×1.25ml	2×5ml
吸附柱DM及收集管	50套	200套

自备试剂：无水乙醇

实验前准备及重要注意事项：
1、向蛋白酶K 中加入指定用量(1.25ml/9ml)的蛋白酶K 储存液使其溶解，使其浓度为20mg/ml。配制好的蛋白酶K -20℃保存，勿长时间室温放置，以免影响其活性。其他组分可以在干燥、室温(15-25℃)环境下稳定保存一年。如需保存更长时间，可置于2～8℃。
2、样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
4、使用前请检查Buffer GL是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer GL于56℃水浴重新溶解。
5、如果下游实验对RNA污染比较敏感，可以在第3步中加入4μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml)，RNase A本试剂盒并未提供，如需要可单独向本公司订购，货号：WE0225。
6、若要在室温下长时间保存唾液DNA，推荐使用本公司的唾液DNA保存管(货号：WE0402)。

操作步骤：
1、加入唾液样本或唾液/保存液混合液400μl 。
注意：
1)加入保存液的唾液混合物需在提取前50℃水浴1小时或50℃空气温箱2小时。
2)如需要增加样本体积，则倍比增加步骤2-4中的蛋白酶K 、Buffer GL和无水乙醇的体积，步骤5中液体可分多次转入。
2、加入40μl 蛋白酶K 。
3、加入400μl Buffer GL，涡旋震荡充分混匀，56℃水浴15-30分钟。
注意：如需去除RNA，可在上述步骤完成后，加入4μl浓度为100 mg/ml的RNase A溶液(货号：WE0225)，涡旋15秒，室温放置2分钟。
4、短暂离心以去除管盖内壁的水珠。加入400μl无水乙醇，涡旋震荡充分混匀。短暂离心。
注意：
1)加入Buffer GL和无水乙醇后要立即涡旋震荡混匀。
2)加入Buffer GL和无水乙醇后可能会产生白色沉淀，不会影响后续实验。
3)GL和无水乙醇后可能形成溶胶状产物，此时推荐进行剧烈震荡或涡旋处理。
5、上一个步骤中所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱(Spin Column DM)中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm(～13400 ×g)离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
6、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤7。
8、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
9、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中，向吸附柱的中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE或灭菌水，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)Buffer GE在65-70℃水浴预热，离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。

储存条件：室温(15～30℃)。

除了唾液基因组DNA提取试剂盒,，我公司还供应以下相关产品：
 

货号	名称	规格
BTN3660	非冻型组织DNA保存液	250mL
BTN91102	柱式骨骼DNA提取试剂盒	50次
BTN80805	柱式毛发DNA提取试剂盒	50次
BTN130979	柱式血清血浆DNA提取试剂盒	50次
BTN100303	柱式真菌DNA提取试剂盒(玻璃珠法)	50次
BTN130831	丝状真菌线粒体DNA提取试剂盒	15次
BTN71101	一步法大提质粒DNA提取试剂盒	5次
BTN70804	一步法单菌落质粒DNA提取试剂盒	50次
WE0187	土壤基因组提取试剂盒	50次
WE0190	通用型柱式DNA提取试剂盒	50次|200次
WE0209	磁珠法口腔拭子DNA提取试剂盒	96次
WE0400	口腔拭子DNA样本保存管	200μl×20支
WE0402	唾液DNA样本保存管	20套
ALH158	细胞凋亡DNA Ladder抽提试剂盒(分离基因组DNA)	20次|50次
ALH180	尿液DNA提取试剂盒	50次
RFT028	高纯度质粒提取试剂盒	100次|200次
SY0004	蜗牛酶	5g
JN0131	DNA凝胶回收试剂盒	50次
QN0892	全血基因组DNA提取系统(沉淀法)	50T|200T
QN0929	DNA产物纯化试剂盒	50T|100T
CZ001	磁珠法血液DNA提取试剂盒	100次
ML011	植物基因组DNA提取试剂盒（磁珠法）	200T
BTN80930	微量样品核酸提取试剂盒	50次
BTN100307A	酸洗玻璃珠(100μm)	10g
MT0045	细菌基因组DNA提取试剂盒	50T
GL1196	DNA保存液	100ml|500ml
GL2815	λ噬菌体基因组DNA提取试剂盒(PEG沉淀法)	50T