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HiFi Cas9 蛋白是一种高保真 CRISPR Cas9 蛋白变体
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-20
- 库存:
A50576
- 供应商:
上海研卉生物科技有限公司
- 规格:
100ug
HiFi Cas9蛋白 (5 μg/μL)
Invitrogen TrueCut HiFi Cas9 蛋白是一种高保真 CRISPR Cas9 蛋白变体,经工程改造可展现出卓越的脱靶特征,同时可保持极高的靶向编辑效率。TrueCut HiFi Cas9 蛋白非常适合用于对脱靶事件敏感的应用和需要进行更精确的编辑时。
TrueCut HiFi Cas9 蛋白的特点包括:
- 在所有检测的细胞系(包括标准、免疫、原代以及干细胞)中几乎无脱靶事件
- 与 TrueCut Cas9 蛋白 v2 相比,可保持极高的靶向编辑效率
- 高质量—按照严格的 ISO 13485 质量标准生产
- 转染即用型,使用电穿孔或脂质介导的转染试剂
- 无需耗时的克隆步骤
- 有 2 种浓度可供选择:
- 1 μg/μL,用于标准编辑情况
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- 5 μg/μL,用于在更困难情况下优化编辑条件,例如原代或胚胎细胞中、显微注射时或一次筛选多个 gRNA 序列时
- 对于定制大小或浓度,请咨询相关销售人员
TrueCut HiFi Cas9 蛋白是经过工程改造的重组化脓性链球菌 Cas9 蛋白,从大肠杆菌中纯化而来,可用于基于 CRISPR 技术的基因组编辑。Cas9 蛋白可与向导 RNA (gRNA) 形成一种非常稳定的核糖核蛋白 (RNP) 复合物,作为 CRISPR/Cas9 系统的一种组分。核定位信号(NLS)的引入可帮助其入核,增加基因组DNA切割的几率。
订购与 TrueCut HiFi Cas9 蛋白配合使用的 CRISPR gRNA 的可选产品:
- 订购用于在人或小鼠中实现高效敲除的预设计 TrueGuide 合成 gRNA
- 提交您自己的设计以进行 CRISPR sgRNA 定制合成
- 使用我们的免费 TrueDesign CRISPR 基因组编辑器软件轻松完成设计,并可订购自定义 gRNA,以实现精确的基因组编辑
- 只需四小时便可生成转染即用型 gRNA,包括通过我们的 GeneArt 精确 gRNA 合成试剂盒完成的模板组装。
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文献和实验bovine serum (FBS). 4. GlutaMAX solution (Life Technologies). 5. 100× Pen-Strep: 100 U/μL penicillin, 100 μg/μL streptomycin. 6. OptiMEM medium (Life Technologies). 7. TrypLE® Express Enzyme (Life Technologies). 8. Transfection reagent
μM)5μlNaCl 100 mM(终浓度)Tris‐Cl pH7.4 50 mM(终浓度)加水补足 50 μl将配制好的退火反应缓冲液重复混合,短暂离心后放置 PCR 仪上,运行以下程序: 90℃ 4 min, 70℃ 10 min, 55℃ 10 min, 40℃ 10 min, 25℃ 10 min。退火后的寡核苷酸可以立刻使用或者在 ‐20℃ 长期保存。三、 pCas9/gRNA 基因敲除载体的构建用 EcoRV 酶切 2 μg pCas9/gRNA 载体(inovogen)。通常
Polyfect-V 转染试剂 20 μl pH1 载体 3.75 μg DMEM 无血清培养基 480 μl pH2 载体 1.25 μg - DMEM 无血清培养基 X μl - 总体积 500μl 总体积 500μl 4、充分混匀。 5、将转染试剂稀释液(离心管 2)加入质粒 DNA 溶液(离心管 1)中,立刻充分混匀。注意加入顺序非常重要。 6、室温孵育转染混合液 15 分钟。 7、将 1 ml 转染混合液逐滴加入步骤
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