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- Bio-Tc
- Ov02-02-01
- 洛阳
- 2026年01月17日
- 山羊
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- 文献和实验
- 技术资料
- 抗体英文名：
Goat anti-mouse IgA,IgG
- 宿主：
山羊
- 抗原来源：
小鼠
- 库存：
大量
- 供应商：
佰泰科
- 是否单克隆：
多克隆
- 规格：
1mg
本品为亲和纯化级羊抗小鼠IgA抗体，与小鼠IgA有特异性反应,效价测定（ELISA）>1：40万。与小鼠IgM、IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG3、人IgG、兔IgG等类/亚型无交叉反应；可用于ELISA, IHC, Blot等科学研究实验。
聚丙烯酰胺凝胶电泳纯度＞９6％。
4℃可短期存放，-２０℃分装可长期储存，避免反复冻融。
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法：
- 包被：用0.05M PH9.6 碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗涤，下同)。
- 5%脱脂乳（SMP）或者BSA 37℃（或者RT封闭）封闭1小时。弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。
3. 加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
4. 加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。
5. 加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。
6. 终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
7. 结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测O·D值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔O·D值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
方法二 用于检测未知抗体的间接法：
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml， 每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。
加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔 中,置37℃孵育1小时,洗涤。
同时做空白、阴性及阳性孔对照于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml， 37℃孵育30-60分钟，洗涤,最后一遍用DDW洗涤。
其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
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文献和实验，不抗凝。【试剂】 免疫比浊仪配套IgG、IgM、IgA试剂，内含有稀释液、缓冲液、抗血清等，按说明书配制。【仪器】 全自动特种蛋白分析仪。【检测步骤】1、标本处理，3 500rpm离心l0min，分离血清。2、根据程序要求进行样品测定：(1)输入杯号；(2)选择所测项目IgG、IgM、IgA；(3)存盘；(4)编程完毕后，将标本放人标本杯中，且放人标本盘中相应位置，将所做项目的试剂放人试剂盘中相位置，确认无误后，开始运行特种蛋白分析仪。【正常参考值】 IgG：8．00～16．00g／L IgM
我是用来做筛选IgG型单克隆抗体,用它做二抗,筛到的阳性克隆化和扩大培养后用SIGMA亚类试剂盒鉴定却是IgM,郁闷!!!这个试剂盒能与IGM交叉?是不是抗轻链?我这种方式不对吗?谁知道有较好的抗鼠IgG而与IgM不交叉的抗体?? 试剂盒说明书:Anti-mouse IgG-HRP Antibody FOR RESEARCH USE ONLY. NOT FOR USE IN HUMANS. R&D Systems, Inc. 1-800-343-7475 2/21/06
及重链和轻链之间由二硫键连接，形成的构象与英文大写字母“Y”类似。根据重链的不同将Ig分为5个同种型（isotype）,分别是IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。其中IgG、IgD和IgE只有单体形式，而IgA和IgM具有由数个相同单体组成的多聚体形式。 图2：抗体结构示意图 Ig轻链和重链中氨基酸序列变化较大的区域称为可变区（variable region, V）,氨基酸序列较保守的区域称为恒定区（constant region, C）。重链和轻链可变区（VH和VL）各有3个区域的氨基酸组成
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