- ￥500
- 原平皓生物
- RQ101
- 2025年07月07日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
原平皓生物
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大量
- 规格：
1 ml
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· 产品介绍：
YStart SYBR Green qPCR SuperMix-UDG是一种即用型实时定量PCR(qPCR) 的试剂，该试剂包含结合有特异性抗体的热启动 DNA聚合酶、SYBR GreenI荧光染料、dATP、dUTP、dGTP、dCTP、UDG(尿嘧啶DNA转葡糖基酶)以及PCR增强剂和稳定剂。SuperMix混合试剂的浓度为2×，使用时只需加入模板、引物及水，使其工作浓度为1×，即可进行荧光定量PCR反应。
· 产品特点：
• 使用结合有特异性抗体的热启动酶，增加了荧光定量PCR反应的特异性和灵敏性。
• SuperMix中的UDG和dUTP可以阻止前次反应的残余PCR产物的重复扩增。dUTP确保扩增后的DNA中均含有尿嘧啶，而UDG可从单链或双链DNA上去除尿嘧啶残基，从而保证真正的目的序列得以扩增，有效防止PCR产物的交叉污染。
• SYBR GreenI染料是一种直接与双链DNA结合的荧光染料。SuperMix中的SYBR GreenI染料荧光信号强，检测灵敏度高，可以检测出低至10拷贝的目的基因以及1 pg的模板DNA或RNA，适合溶解曲线分析。
• 试剂组成中提供的ROX Reference Dye可以调整PCR加样误差所引起的管与管之间的差异。
· 产品储存：
-20°C避光保存一年。
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文献和实验SYBR Green Quantitative PCR Protocol
the relative values for your gene of interest’s change in expression. SYBR qPCR Quick Protocol StandardsØ Dilute the cDNA ~4-fold (e.g. 21μl sample + 59μl H2 O = 80μl)Ø Pool an appropriate amount from each sample to create standard 1 (i.e. 30μl x
几个复孔，选择重复性好的 CT 值参与计算。 （2）CT＜30，重复性较差。这种情况一般同操作有关。 解决办法：从以下几个方面进行问题的排查：①加样准确度；②移液器吸取液体的准确度；③定期校准 qPCR 仪。 ①加样准确度 避免小体积加样，减少加样误差。可以将引物、SYBR Green Mix、ddH2O 配置成混合体系，并且增加模板的稀释梯度，大体积加样。如：原液 cDNA 添加 1μl，可以更改为原液 cDNA 稀释 5 倍，添加 5μl，使用 ddH2O 补齐体系至 20μl 即可
大家一臂之力，里面包含单独成管的 Oligo (dT)20VN 及 Random hexamers，可以根据模板类型和后续实验需求灵活选择或按比例混和；还有 HiScript® III RT SuperMix for qPCR (+gDNA wiper)（R323），包含逆转录反应所需的所有组分，当然 Random primers 和 Oligo (dT)20VN 的混合引物也直接在这管 SuperMix 中，只需加入模板 RNA，20 min 内即可完成逆转录反应，极为方便！ 第三个选择就是基因
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