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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 抗体英文名:
Mouse IgG2b
- 宿主:
无
- 供应商:
佰泰科
- 保质期:
3年
- 抗原来源:
无
- 库存:
大量
- 级别:
亲和纯
- 是否单克隆:
多克隆
- 保存条件:
-20
- 规格:
1mg
1 . 将抗体结合到蛋白A或蛋白G微珠上。对于一般用途的层析柱,每毫升湿的微珠大约可以结合2mg单克隆抗体或亲和纯化的多克隆抗体。将抗体和蛋白A或蛋白G微珠混合制成稀薄的匀浆,在总量为10ml的溶液中加入大约lml微珠,室温孵育1h,轻轻摇动混匀。
2. 用10倍体积的0.2mol/L硼酸钠(pH9.0)洗涤微珠2次,每次以3000g离心2rain或10 000g离心30s。
3. 用10倍体积的0.2mol/L硼酸钠(pH9.0)重悬微珠,留取相当于10t~l湿微珠的样品。加入足量的二甲基庚二酸酯固体至微珠匀浆中,使终浓度为20mmol/L。
4. 室温孵育30min,并轻轻混匀。留取相当于10t~l偶联微珠的样品。
5. 用0.2mol/L乙醇胺pH8.0.洗涤微珠1次以终止反应。然后重悬于0.2mol/L乙醇胺,室温孵育2h,轻轻混匀。微珠用PBS洗涤后,重悬于PBS,加入硫柳汞保存。
6. 将偶联前和偶联后的微珠样品加入Laemmli样品缓冲液中煮沸后,检查偶联效果。分别取相当于1ul和9ul 2份样品在10%SDS—聚丙烯酰胺凝胶中电泳,并用考马斯亮蓝染色,偶联效果良好时,在偶联前的微珠样品中显示一条55kDa的重链带,而偶联后的样品无此区带。
7. 将抗体包被的微珠转入合适的层析柱中,用PBS冲洗容器收集残留的微珠。如果可能,仅使用结合制品中全部抗原所需的抗体微珠基质。
8. 用20倍柱床体积与制备抗原相同的缓冲液洗柱。
9. 将抗原液加到柱上,按每毫升柱体积大约lml/h的速度使抗原溶液流过层析柱,可以用一台蠕动泵控制。
10. 用20倍柱床体积的结合缓冲液(PBS)洗柱。
11. 用20倍柱床体积的预洗脱缓冲液洗柱,建议使用预洗脱缓冲液。
12. 采用分段洗脱法,连续以0.5倍柱床体积的洗脱缓冲液通过层析柱,分管收集每一组分。如果用过高或过低pH值的缓冲液洗脱,收集管内需加入0.1倍柱床体积的缓冲液。
13. 检测每管的抗原含量,将浓度高的各管合并。根据抗原的用途,需对获得的蛋白洗脱液透析以改变缓冲液。
14. 用20倍柱床体积的起始缓冲液流经基质,使层析柱再生。加入0.01%硫柳汞可长期保存(4℃)。
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文献和实验一、饲养环境 小鼠对环境的适应性的自体调节能力和疾病抗御能力较其他实验动物差,而小鼠的品种和品系繁多,各个品种和品系都有自己的特殊要求,因此必须根据实际情况给予一个清洁舒适的生活环境。不同等级的小鼠应生活在相应的设施中。 小鼠临界温度为低温 10℃,高温 37℃,温度中性范围 30~33℃。饲养环境控制应达到如下要求:温度 18~29℃;相对湿度 40~70%;最好控制在 18~22℃,湿度 50~60%。一般小鼠饲养盒内温度比环境高 1~2℃,湿度高 5~10%。 要保持温度、湿度相对稳定
原创 SOOF 生物学霸 2022-04-20 17:59 4 月 12 日,江苏集萃药康生物科技股份有限公司开启申购,在公司公开的招股书中显示该公司主营业务为实验动物小鼠模型的研发、生产、销售及提供相关技术服务。部分品系的小白鼠单价高达万元以上,部分品系毛利率更是高达95% 左右。 随后一条「如何看待南大教授靠卖基因敲除小鼠,一只11723元,年赚近4亿」的讨论登上知乎热榜。 图片来源:知乎 作为天坑专业之首的生物,一直以来在大家的印象里总是和辛苦,清贫,回报周期长的标签挂钩
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