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- 文献和实验
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小肠位于腹中,上端接幽门与胃相通,下端通过阑门与大肠相连,是食物消化吸收的主要场所。一般根据形态和结构变化将小肠分为三段,分别为十二指肠,空肠和回肠。
小肠壁结构一般分4层,由外向内依次为:浆膜层,平滑肌层,粘膜下层和粘膜层。粘膜层又分为3层:靠近粘膜下层的是一层平滑肌,称为粘膜肌层。其次为结缔组织,又称为固有层。最后面向肠腔的是一层柱状上皮细胞构成的粘膜。小肠粘膜有纵行和横行皱襞,并有无数细小的指状突起,称为绒毛。绒毛的基底处粘膜内陷成管状,称为利贝屈恩氏隐窝。隐窝基底部的上皮细胞不断地进行有丝分裂,产生新细胞。隐窝上皮中还有许多杯状细胞,它分泌粘液,起滑润食物和保护粘膜的作用。
细胞特性:
- 细胞来源于人正常小肠组织。
- 细胞鉴定:广谱角蛋白(PCK)免疫荧光染色为阳性。
- 经鉴定细胞纯度高于90%。
- 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
- 细胞生长方式:上皮样,多角形细胞,贴壁培养。
产品的运输和保存:
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
- 1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
- T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
推荐培养基:
我们推荐使用iCell原代上皮细胞培养体系(产品编号:PriMed-iCELL-001)作为体外培养原代肠粘膜上皮细胞的培养基。
产品使用:
- 本产品仅能用于科研
- 本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
- 本产品未通过用于活体诊断的审核
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文献和实验PriCells-原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长,既有上皮样细胞又有纤维样细胞,纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等。混杂的细胞会直接影响实验结果。在体外培养原代细胞时,为了保证实验结果的可靠性、一致性、稳定性、和可重复性,要求采用单一种类细胞来进行实验,这样才能对某一细胞的功能、形态等变化进行一系列研究,因而培养细胞的纯化就成为实验研究的重要一步,甚至需要从混杂的细胞群中分离出单个细胞来进行培养和开展实验研究。一、原代
原代 肺泡上皮 细 胞 ( Primary Alveolar Epithelial Cell s ) 的体外分离培养 1 、完全无血液残留肺 脏组织 2、消化肺 组 织 :常用细胞消化酶:胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。经支气管将酶灌注到完整的肺中消化,或把肺组织剪碎放入消化液中消化。前者比后者更有效。3 、分离 纯 化 细 胞 :原代肺泡上皮细胞的分离纯化主要方法:(1)密度梯度离心法:密度梯度离心分离细胞的原理是不同细胞的沉降系数不同,在密度梯度离心中细胞所处的位置也相应不同
③ 用PBS液洗去黏附在晶状体表面的虹膜色素及玻璃体。弃去洗液; ④ 将晶状体的凸面向下,用4号针头于晶状体赤道部稍靠后的部位环刺一圈,然后用两把无齿显微镊子轻轻分离出晶状体前囊膜; 2. 原代培养; ① 取下晶状体前囊膜后,一般不经洗涤。将其剪成余额1.5mm×1.5mm的植块; ② 用无齿显微镊子挑起植块,平贴于培养板中; ③ 置于37℃恒温箱中约5min,待组织块稍干后便可加入培养液; ④ 按常规方法培养。每周换培养液2次,每次更换2/3的培养液量; 3. 传代





