IgG纯化试剂盒用于分离和纯化山羊、小鼠、兔及其他动物的免疫球蛋白G。该试剂盒包含固定的蛋白质A或G以及用于回收IgG的缓冲液。从血清或其他含有IgG的溶液中分离和纯化IgG的总时间约为30分钟。由于蛋白质A或G的支持物为硅胶,离心后凝胶上的残留溶液的体积非常小。因此,可用两次洗涤去除所有不与蛋白质A结合的蛋白质或其他物质。此外,洗脱过程中IgG的变性是最少的,因为结合到凝胶上的IgG的释放过程是非常快速的。此试剂盒中的凝胶可重复利用10次或更多次而效能不变。用过的凝胶在0-5℃的洗涤缓冲液中仍可稳定存放一年。 试剂盒内含 Protein G Cartridge tube……………… 1 管 Washing buffer……………13 ml × 1瓶 Elution buffer………………1.8 ml × 1瓶 Catching buffer…………… 1 ml × 1瓶 1.5 ml Microtube……………5 管 × 2
a) 倾斜筒式试管并用手指使杯旋转10-20次。 b) 通过此步骤,IgG的回收率可以提高25-30%以上。可重复此步骤以得到最大的IgG回收率。 c) 如果IgG的回收率低,则使用此滤出液再次回收IgG。从步骤2开始按照操作说明进行实验。 d) 不要丢弃储蓄池。在步骤13中将用到它。 e) 将该杯放回步骤9中保留的储蓄池中。按照步骤6和7用洗涤缓冲液洗涤凝胶。加入200 μl洗涤缓冲液并使蛋白质A凝胶筒式试管保持在0-5℃中。离心该试管并在使用前去除洗涤缓冲液。 f) 可加入等量丙三醇,并储存于-20℃中。