蛋白提取定量PAGE电泳试剂盒

WB 样品粘稠像「鼻涕」怎么办？

过粘稠，移液吸取时会整体带出，无法分离上清液。 2. 定量困难 无法测定及定量：样品粘稠无法成为均一液体，导致蛋白定量 OD 值 out，无法进行定量测定。 3. 样品很难进入胶孔 上样困难：尽管加了 loading 进行煮样，上样样品仍然特别粘稠，很难加入到胶孔。 4. 样品很难跑出孔发生拖带 电泳结果不佳：SDS-PAGE 时粘稠样品会卡在点样孔里，条带不成直线，有很严重拖尾，条带不集中

免疫荧光有结果 WB 却没条带？问题可能出在这一步…

蛋白的定位、相对表达和激活状态；而 WB 则通过分析条带位置和着色条带深度来获取目的蛋白质在细胞或组织中表达情况的信息。 IF 的数据评估依赖于视觉判断，其结果的解释具有主观性[1]。因此，通常情况下，IF 实验更适合对目的蛋白分布范围、空间相互关系进行评价；而 WB 实验常用于对目的蛋白进行定性和半定量分析[2]。 二、可能的原因 IF 实验是原位检测技术，而 WB 实验则需要先将靶蛋白提取出来再进行检测。IF 实验能检测到目的蛋白，而在 WB 中却没有出现目的条带，其常见的原因有两个：一是目的

如何做好 WB 方案设计？你需要了解这些信息

设计 1. 首先明确实验目的，为什么要做这个 WB 实验？要验证哪些问题？ 例如：是想验证目标蛋白的表达情况？还是要验证目标蛋白在细胞几个不同组分中表达差异？或者是进行蛋白定位、蛋白转运过程的研究？ 2. 明确好实验目的后，根据样品种类，目标蛋白表达量及细胞定位情况，确定蛋白提取方案。 例如： * 目标蛋白表达量正常，但小分子量蛋白或是膜蛋白这类目标蛋白很难提取，使用常用的 RIPA（Radio Immunoprecipitation Assay）裂解液进行提取时，容易丢失