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414
- 英文名:
Random Primer DNA Labeling Kit(Biotin)
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
低温运输,-20℃
- 规格:
5次
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文献和实验随机引物法探针标记 随机引物法的原理是使被称为随机引物(random primer)的长6个核苷酸的寡核苷酸片段与单链DNA或变性的双链DNA随机互补结合(退火),以提供3, 羟基端,在无5, →3, 外切酶活性的DNA聚合酶大片段(如Klenow片段)作用下,在引物的3, 羟基末端逐个加上核苷酸直至下一个引物。当反应液中含有标记的核苷酸时,即形成标记的DNA探针。6个核苷酸混合物出现所有可能结合序列,引物与模板的结合以一种随机的方式发生,标记均匀跨越DNA全长。当以RNA
的探针比32P标记的探针要稳定,可以在半年内多次重复使用。 对于Southern、Northern和多组织Northern预制杂交膜(MTN)、多组织表达矩阵(MTE)等以尼龙膜为基质的杂交、印迹反应,可以选用SpotLight随机引物标记试剂盒进行标记,和同位素标记一样简单,但却更加安全、容易处理,而且生物素标记的探针稳定时间更长。 配套通用的杂交检测试剂盒里提供特殊配方的SpotHyb杂交液,能有效降低背景,减少非特异杂交,提高灵敏度。HRP偶联的Streptavidin能高效专一地结合生物素
非常高,一般情况下同位素是首选。如今Atlas SpotLight标记试剂盒特别提供逆转录所需的试剂,可以将2μg以上的mRNA或者50μg以上的RNA样品制备成生物素标记的单链cDNA探针,由于没有竞争性抑制,单链探针的灵敏度要大大高于双链探针。另外生物素标记的探针比32P标记的探针要稳定,可以在半年内多次重复使用。 对于Southern、Northern和多组织Northern预制杂交膜(MTN)、多组织表达矩阵(MTE)等以尼龙膜为基质的杂交、印迹反应,可以选用SpotLight随机引物标记试剂盒
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