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- 2025年08月07日
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文献和实验第1节- 试剂1.1涂层缓冲液PBS（137 mM氯化钠，2.7 mM的氯化钾，8.1 mM的磷酸氢二钠，1.5 mM磷酸二氢钾）1.2封闭液5％脱脂乳于PBST中（0.05％Tween-20）1.3稀释剂2％脱脂乳于PBST中（0.05％Tween-20）1.4柠檬酸缓冲液3.65克柠檬酸，4.76克磷酸氢二钠，溶解于500毫升双蒸水1.5兔抗GST抗体兔抗GST抗体1.6 HRP结合山羊抗兔IgG（H + L）山羊抗兔IgG（H + L），結合过氧化物酶第2节- 分析方法注：以下方法是一个
与第一抗体种属相同的抗体Fc段(有种属特异性)作为抗原免疫动物。制备抗抗体．即第二抗体，并标记第二抗体。例如，第一次使用的特异性抗体(一抗)是由家兔产生，则第二次使用的抗体(二抗)用酶标记或其他标记物标记抗兔的免疫球蛋白(常用酶标记羊抗兔lgG)。染色时，顺次以第一抗体和标记的第二抗体处理标本，在抗原存在部位形成抗原一第一抗体一标记的第二抗体复合物，以达到检测该抗原的目的。间接法因第二抗体的放大作用。敏感性大大增高。 三、亲豪和免负疫组织化学 亲和免疫组织化学是从酶桥法和过氧
一、材料和方法1．试剂及耗材蛋白抽提试剂（改进型RIPA配方）BCA蛋白定量试剂盒5×还原样品缓冲液10×Tris-Glycine-SDS电泳缓冲液考马斯亮蓝染色液10×TBST pH8.0湿转缓冲液PVDF膜，0.22um孔径丽春红染色液PMSF蛋白酶抑制剂封闭液ECL发光液山羊抗兔IgG（H+L），HRP兔抗山羊IgG（H+L），HRPβ-actin 鼠单抗2．实验仪器Fresco低温冷冻离心机MultiSkan3酶标仪电泳槽湿转电泳槽电泳仪水平脱色摇床 二、 实验方法及结果3.1细胞
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