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- 2025年08月07日
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文献和实验到抗体或抗原分子上，利用微孔塑料反应板能吸附蛋白质的特性，将可溶性抗原或抗体吸附于反应孔表面，然后用酶标记的抗体或抗原与其特异性结合，洗去游离抗原或抗体，最后加入酶作用底物。由于酶分解底物而显色，根据底物颜色深浅来判断标本中特异性抗原或抗体的量。 【试剂与器材】 1. 待测抗原、抗体（马抗HBsAg）和酶标记抗体(HRP-抗HBsAg)。 2. 正常人血清和阳性对照血清。 3. 包被缓冲液(0.05M pH9.6碳酸盐缓冲液)。 Ｎa2CO3 1.59g NaHCO
物（Ab2-B 为生物素标记的第二抗体）（B ★为生物素标记的过氧化物酶）AB★C复合物是avidin与酶联biotin 1比1在使用前30min配置，混匀。1个avidin分子结合了3个biotin分子，剩下1个结合点与2抗的生物素结合，avidin起桥联作用。ABC法敏感性更高，比PAP法敏感20~40倍，背景也更清晰。个人理解：SP法和SABC法相差不大，一般都可以用.SP法：一抗+ 生物素标记二抗+ 辣根酶标记链霉卵白素+ 辣根酶底物显色SABC法：一抗+ 生物素标记二抗+ 滴加试剂SABC
的Anti IgE （epsilon） Antibody等。【二抗的种属来源】 一般来说，不同的种属来源与二抗的质量没有必然的联系，来源于山羊的二抗与来源于驴的二抗在一般的实验里没有太多的差别。然而在一些特殊的实验里， 如双标实验里，如果其中一个一抗是山羊来源的，一个是小鼠来源的，则相应的二抗分别要抗山羊和抗小鼠的二抗，这时候，二抗就不能选择山羊或者小鼠来源的。 艾美捷有相应的驴来源的二抗，非常适合做类似双标的免疫实验。 【二抗的耦联标记】 一般来讲，耦联到二抗上的探针主要有酶（辣根
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