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文献和实验胶体金标记蛋白质的原理,一般认为是由于pH值等于或稍偏碱于蛋白质等电点时,蛋白质呈电中性,此时蛋白质分子与胶体金颗粒相互间的静电作用较小,但蛋白质分子的表面张力却最大,处于一种微弱的水化状态,较易吸附于金颗粒的表面。由于蛋白质分子牢固地结合在金颗粒的表面,形成一个蛋白层,阻止了胶体金颗粒的相互接触,而使胶体金处于稳定状态,如果=低于蛋白质的等电点时,蛋白质带正电荷,胶体金带负电荷,二者极易静电结合形成大的聚合物。如果pH高于蛋白质等电点时,蛋白质带负电荷,与金颗粒的负电荷相互排斥而不能互相
免疫金标记技术 胶体金(colloidal gold)是氯金酸(chloroauric acid)的水溶液,具有高电子密度,并能与多种生物大分子结合,已成为继荧光素、放射性核素和酶之后,在免疫标记技术中较常用的一种非放射性示踪剂。1971年,Faulk和taylor首先报道将胶体金与抗体结合,应用于电镜水平的免疫细胞化学研究,随着技术的不断改进和完善,免疫金标记术已建立了免疫转印、流式细胞术、液相免疫测定、固相斑点金/银染色(dot IGS/IGSS)及斑点免疫渗滤测定
胶体金标记技术是以胶体金作为示踪标志物或显色剂,应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。由于它不存在内源酶干扰及放射性同位素污染等问题,且利用不同颗粒大小的胶体金还可以作双重甚至多重标记,使定位更加精确。因此已成为继荧光素、酶、同位素及乳胶标记技术之后的一种新型标记技术。现已广泛应用于电镜、流式细胞仪、免疫印迹、蛋白染色、体外诊断试剂的制造等领域。用胶体金作为特殊标记物的研究始于60年代初,1962年Feldberr等报道了用胶体金标记细胞进行电子显微镜的研究。1971年,Taylor
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