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需确认
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2-8°C
- CAS号:
见产品外包装
- 供应商:
嵘崴达
- 英文名:
Western Blocking Reagent, Solution
- 保质期:
见产品外包装
- 规格:
100 mL
蛋白印迹封闭试剂,溶液
Western Blocking Reagent, Solution
别名: 蛋白印迹封闭液
Application
在蛋白质印迹实验和免疫荧光染色期间,Western Blocking Reagent(Western 封闭液)可用作通用封闭液。 该试剂用于膜封闭、膜洗涤和稀释检测抗体等步骤中。
Quality
每个批次都经过功能测试(斑点印迹)。
Physical form
Western Blocking Reagent(Western 封闭液)是一种 10x 浓缩液,它含有 10% 纯化的酪蛋白,溶解于马来酸缓冲液中。
Preparation Note
工作溶液:制备工作溶液
• Tris 缓冲液(TBS),pH 7.5
在 800 ml 双蒸水中添加 6.05g Tris 碱(50mM)和 8.76g 氯化钠(150mM),并用约 9.5 ml 1M 盐酸调节 pH 值至 7.5。然后用双蒸水稀释至 1L。在 2-8°C 下,TBS 可稳定储存 3 个月。
注意:叠氮hua钠对 POD 有抑制作用,因此在使用 POD 复合物时,不得将叠氮hua钠用作抗菌剂。
• TBS-Tween(TBST)
洗涤缓冲液 1:将 1 ml Tween 20 溶于 1L TBS 中。在 2-8°C 下,TBST 可稳定储存 3 个月。
注意:0.1% Tween 20 适用于大多数应用,但具体取决于所用的膜和抗体 - 不同的表面活性剂(如SDS、Triton X-100 和 Nonidet P40),以及表面活性剂浓度在 0.01 至 1% 之间可以产生更好的结果。
• 封闭液(1%)
使用 90ml TBS 稀释 10ml Western 封闭液(10x 浓缩液)。在 2-8°C 下,封闭液可储存 1 个月。
注意:叠氮hua钠对 POD 有抑制作用,因此在使用 POD 复合物时,不得将叠氮 hua钠用作抗菌剂。
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文献和实验Western blotting using ECL reagent
membrane (Amersham Life Science; cat # RPN2020D)Kodak X-OMAT (XAR-5, 18X24 cm; cat # 8532665)10X TBS12.11 g Tris-base (100 mM)87.66 g NaCl (1500 mM)1 liter dd H2OAdjust pH= 7.6Washing buffer (TBS-T): 100 ml 10X TBS + 900 ml dd H2O + 1 ml Tween-20.Blocking
Blocking of unwanted non-specific staining
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Extraction of DNA using DNAzol Reagent
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