肝素酶I(heparinase I)可降解肝素和硫酸乙酰肝素,是肝素结构研究、临床诊断和工业质控的有力工具。
肝素酶I选择性地切断肝素和硫酸乙酰肝素(相对活性约3:1)在葡萄糖胺和O-硫酸艾杜糖醛酸之间的连键,产物主要是二糖。此酶也能切断肝素分子中的抗凝血酶III结合五糖位点。
【肝素酶I的特点】
艾德豪克生产的肝素酶I具有以下特点:
- 天然肝素酶,来源于原生肝素黄杆菌
- 具有最高的比活性(最大 417 IU/mg)
- 纯酶,不含BSA或其他杂质蛋白
- 稳定性好,具有一致的批间重现性和降解特性
【肝素酶I的订购信息】
货号: AG00-2519
包装规格: 0.1 IU, 1 IU
报价(RMB): 7020/IU
货期: 现货
生产商: 北京艾德豪克国际技术有限公司
品牌: Aglyco
【肝素酶I的形态和成分】
肝素酶I为溶液形态。
主要成分: 肝素酶I
缓冲溶液: 磷酸缓冲溶液
【肝素酶I的性质和规格】
中文名称: 肝素酶I;肝素裂解酶I
英文名称: Heparinase I; heparin lyase I; heparin eliminase I
来源: 肝素黄杆菌(Flavobacterium heparinum)
EC编号: 4.2.2.7
CAS编号: 9025-39-2
MDL编号: MFCD00131317
分子量: 42.8 kDa
纯度: ≥ 99% (HPLC)
溶解性: 溶于纯水
比活性: > 400 IU/mg
浓度: 10 IU/mL
【肝素酶I的作用机理、底物特异性及单位定义】
肝素酶I的作用机理: 肝素酶可选择地剪切硫酸化肝素聚糖中葡萄糖胺和糖醛酸之间的α(1-4)糖苷键。此剪切过程通过消除反应完成,产生包含不饱和糖醛酸残基(双键位于C4和C5之间)的寡糖。降解产物可由紫外光谱仪检测(232 nm)。
肝素酶I的底物特异性: 肝素,硫酸乙酰肝素(相对活性约3:1)
肝素酶I的活性单位定义: 1 单位(1 IU)肝素酶I在pH 7.0及30 ℃条件下每分钟可产生1 μmol不饱和糖醛酸。1 IU约等于600 un(Sigma单位)。
【肝素酶I的使用方法】
按应用要求,加入适量缓冲溶液,得到所需浓度的肝素酶I溶液。
【肝素酶I的稳定性及储存方法】
肝素酶I在-20℃下避光保存,有效期12个月左右;
稀释后的肝素酶I请放置于-20℃下并防止污染。
肝素酶I进行长途运输时,需使用干冰作为冷冻剂。
【肝素酶I的注意事项】
肝素酶I适用于降解肝素和硫酸乙酰肝素,只能用于实验室科学研究、体外诊断和工业质量控制,不得用作药物或体内诊断。
【肝素酶应用示例】
肝素酶在科学研究和工业上具有广泛的用途,如:
- 降解肝素以进行结构分析,如依诺肝素钠1,6-成环率测试、肝素钠二糖谱分析
- 对肝素进行部分降解得到低分子肝素,并进行化学修饰或接枝到其他材料上
- 降解肝素粗品,从而检测其来源(qPCR法)
- 降解肝素和硫酸乙酰肝素,以制备肝素二糖和肝素寡糖
- 处理血浆或其他组织,以便实施进一步的研究
- 大规模生产亭扎肝素
肝素酶I、肝素酶II和肝素酶III通常一起使用。
【参考资料】
- 1. Linker, A., and Hovingh, P. Meth. Enzymol. 28, 902, (1972)
- 2. Lohse, D.L., and Linhardt, R.J. J. Biol. Chem. 267, 24347, (1992)
【关于肝素和硫酸乙酰肝素】
肝素(heparin)和硫酸乙酰肝素(heparan sulfate)属于糖胺聚糖(glycosaminoglycans, GAGs),为直链多糖混杂物,经由一个糖醛酸(D-葡萄糖醛酸或L-艾杜糖醛酸)和一个D-葡萄糖胺/N-乙酰葡萄糖胺组成的重复二糖单元连接而成。每个单糖残基上可发生不同程度的硫酸化,可包含零至三个硫酸基。通常,乙酰肝素的硫酸化程度少于肝素。
肝素(heparin)及其衍生物低分子肝素是广泛使用的抗凝血药。肝素酶在肝素和低分子肝素的研究和生产中具有十分重要的作用。
【关于Aglyco和艾德豪克】
Aglyco是艾德豪克旗下品牌,其产品线包括肝素酶、发色底物、凝血因子和寡糖对照品等。
艾德豪克拥有多个国外著名品牌的代理权,如:哈克系列水浴循环器,英国Dextra糖类试剂。