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嵘崴达
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Transcriptor Universal cDNA Master
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100 reactions
Transcriptor 通用 cDNA 预混液
Transcriptor Universal cDNA Master
即用型反应混合物适用于所有实时PCR系统上的两步法RT-qPCR。
Transcriptor Universal cDNA Master是一种便捷的解决方案,可为两步法RT-qPCR缩短cDNA合成所需的时间。两管试剂包含所有所需的试剂,包括随机六聚体引物、核苷酸、缓冲液和酶,最大限度地减少了移液操作。通过将Transcriptor Universal cDNA Master预混液与RealTime ready Cell Lysis Kit相结合,可以直接使用细胞裂解物,从而进一步加速实时PCR,实现了最大的便利性。该试剂盒包含的独特酶具有广泛的温度范围,适用于高温逆转录。 Transcriptor Universal cDNA Master具有极高的特异性和灵敏度,即使是困难的复杂RNA模板也适用。在实时RT-PCR中,对低拷贝和高拷贝基因均获得了出色的性能和线性响应。 Transcriptor Universal cDNA Master兼容LightCycler®仪器以及所有其他需要用参比染料进行标准化的实时PCR仪器。
灵敏、准确的RT-PCR分析是实现有价值的分子遗传分析的先决条件。为逆转录和cDNA合成过程选择合适的酶,对于获得高产量的高质量全长cDNA是至关重要的,这忠实于原始细胞RNA。
我们提供全面的Transcriptor逆转录产品,包括:
• 在实时PCR中具有精细性能和广泛动态范围的酶。
• 用于高温逆转录并且从具有二级结构的RNA合成cDNA的酶。
• 高保真Transcriptor产品,具有校对活动,适用于需要序列精度的应用。
Application
逆转录是分子生物学的标志。使用PCR或实时PCR将RNA转化为DNA并进行定性和定量RNA分析的能力,已经彻底改变了基因表达分析。定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR或qRT-PCR)现在是mRNA检测和定量的标准,其灵敏度足以定量单个细胞的RNA。
RT-PCR还用于cDNA文库创建、PCR的分子克隆以及测序。 Transcriptor Universal cDNA Master是一种方便快速的cDNA合成和实时PCR分析解决方案。无论您使用哪款PCR仪器,这种两管式预混液都能够充分发挥您的qRT-PCR分析潜力。
Features and Benefits
• 通过轻松设置,即可节省宝贵的资源。
只需添加您的RNA。该试剂盒中的两管试剂包含逆转录所需的所有试剂,包括随机六聚体引物、核苷酸、缓冲液和酶
• 快速的实验方案,可节省时间。
经优化的预混液能够显著缩短逆转录时间(10分钟)和设置时间。
• 将这种预混液与用于细胞裂解物的Roche RealTime ready Cell Lysis Kit相结合,能够最大限度提高便利性,省去RNA纯化步骤。
• 能够对最困难的模板进行转录。
Transcriptor逆转录酶的高热稳定性和经过特殊优化的缓冲系统,能够耐受高达+ 60°C的培养温度,即使是最具挑战性的二级结构也能准确转录。
• 对您的qRT-PCR实验实现可靠的标准化和定量。
在至少六个数量级的线性动态范围内获得灵敏的可重现结果。
• 提高两步法qRT-PCR的灵敏度和特异性。
产生较低的循环阈值(Ct),从低至0.1pg总RNA的目标量开始。
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文献和实验相关专题 随着定量PCR 在不断改善,多重qPCR同样如此。多重qPCR是将几个PCR分析合在一起,同时扩增并独立检测目标,它在提高通量的同时也节省了样品。与单重qPCR相比,尽管它需要更多时间和精力,但用户得到了丰富的数据。 然而,多重qPCR 并不是单重反应的简单叠加,因为在一个反应管中,任何一个目标的扩增都能影响其他目标的扩增。让反应条件同时适合这么多个目标,这似乎不太容易,但使用qPCR预混液可能有帮助。预混
基(DMEM、1640、F12 等) ✘ 此种培养条件细胞处于饥饿状态,会将培养基中的营养物质(包括外泌体)全部消耗掉的,上清液中的外泌体含量低。 4 外泌体专用无血清培养基 ✔ 不含异源外泌体 常见的肿瘤细胞培养通常都可以维持生长,而那些血清培养都困难的细胞就难以通用了,需要通过预实验摸索。 第二步细胞上清液预处理:获得高质量外泌体预处理也很重要。细胞上清液中有什么物质?除了我们感兴趣的外泌体外,还有少量细胞、细胞碎片、游离蛋白、脂类等。需要做的就是通过差速
一段时间的生长后收集细胞上清液。但是这两种方法都会存在一定的不足的,去外泌体血清难以做到 100% 的去除的,因此即使 1% 的血清外泌体残留也带来大量的异源外泌体,而外泌体专用无血清培养基,也不是适合所有的细胞,常见的肿瘤细胞培养通常都可以维持生长,而那些血清培养都困难的细胞就难以通用了,所以也需要一些预实验的摸索。 还有,那些 DMEM、1640、F12 的基础培养基是否可以替代血清或者外泌体专用无血清培养基呢?这样是不行的。因为细胞在这些基础培养基的环境下,是处于饥饿状态的,细胞会将培养
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