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- 2025年07月09日
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已收到实际货物为准
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北京诺博莱德科技有限公司
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已收到实际货物为准
·配制50 mM stock solution
例1) 使用100μl DMSO时,(BAPTA-AM的分子量=764.68)
50 mmol／L = (X g／764.68) mol／100 × 10-6 L
X g／764.68 = 50 × 10-7 mol
X =0.003823 g = 3.82 mg
例2) 使用20mg BAPTA-AM时,
50 mmol／L = (20 mg／764.68) mol／X L
X =0.00002615 ÷ 0.05 = 523μl
例3) 使用5mg BAPTA-AM时,
50 mmol／L = (5 mg／764.68) mol／X L
X =0.000006538 ÷ 0.05 = 130μl
例4) 使用25mg BAPTA-AM时,
50 mmol／L = (25 mg／764.68) mol／X L
X =0.00003269 ÷ 0.05 = 654μl
*保存stock solution的方法和保存时间
由于AM体遇水容易分解。所以我们推荐现配现用。
使用无水DMSO,再冷冻的条件下,可以保存约1-2个月。
(2) 使用方法
·稀释stock solution,添加细胞。
稀释浓度:少的 6 – 8 μM , 多的50 μM
例1) 8 μM, 使用10μl 50 mM BAPTA-AM stock solution
8 μM = 50 mM ×10μl / Xμl
X = 62,500μl = 62.5 ml
例2) 50 μM, 使用10μl 50 mM BAPTA-AM stock solution
50 μM = 50 mM ×10μl / Xμl
X = 10,000μl = 10.0 ml
*关于细胞的量,不同的细胞使用不同的细胞量。
一般来说,和Fura2-AM,Fluo3-AM一样的量。
论文里面有如下的条件。请参考。
例1) 1.75×10-4 cells/cm2, 25 μM BAPTA-AM
·培养
培养时间:20 – 60 分钟
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； 2、取25cm培养瓶（鼻咽癌贴壁细胞），4℃PBS清洗1min×3次，留1mlPBS，细胞刮顺方向刮下细胞，收集于2mlEP管中，2500rpm/5min，弃上清； 3、加入200ulRIPA，置于冰上30min，中间反复吹打细胞； 4、13000rpm/20min，4℃，取上清，10ul一管分装，-20℃冻存。 二、BCA法测蛋白浓度： 1、BCA试剂（碧云天）A：B=50:1配成工作液，4℃备用； 2、用PBS稀释BSA，10ul至100ul，浓度为0.5mg/ml； 3、96
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