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荧光染料罗丹明123(Rh123)是一种可对活细胞线粒体染色的细胞染色试剂。Rh123可透过细胞膜且在活细胞的线粒体内聚集,并发出黄绿色荧光。Rh123用于对许多种细胞进行染色,包括植物细胞和细菌。由于细胞内ATP的量与Rh123的荧光强度之间有相关性,此荧光染料被应用于检测细胞内的ATP。Rh123还用于癌症研究。
染色例:
染色步骤
1. 将0.4 mg Rh123溶解到1 ml DMSO中制备成1 mM Rh123-DMSO溶液。
2. 用载玻片准备细胞。细胞数目应为5×104-5×105个/ml。
3. 孵育该载玻片,用PBS或Hank's液洗涤细胞。
4. 用培养基稀释1 mM Rh123溶液以制备1-20 µM Rh123缓冲液。
5. 将Rh123缓冲液a) 加入载玻片并在37℃下孵育30分钟至1小时。
6. 去除Rh123缓冲液并用培养基洗涤细胞。b)
7. 用带有荧光素滤光片的荧光显微镜观察细胞。
a) 加入细胞前将Rh123缓冲液放在37℃下孵育。
b) 洗涤细胞后为了固定,加入10%福尔马林缓冲液并孵育15-20分钟,接着用PBS洗涤。
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文献和实验|教育网,但不得超过24小时。羊水经1000—2000r/min离心10分钟后,取其上清液作多项生化检查。属中期妊娠的羊水细胞,作染色体核型分析或先天性代谢缺陷病检查;属晚期妊娠的羊水沉渣,多作含脂肪细胞及其他有形成分的检查。
培养等方法,对胎儿病理状况作出进一步诊断医`学教育网搜集整理。 (2)羊水标本的处理: 抽出的羊水应立即送检。若不能立即送检,应放在4℃冰箱内保存,但不得超过24小时。羊水经1000—2000r/min离心10分钟后,取其上清液作多项生化检查。属中期妊娠的羊水细胞,作染色体核型分析或先天性代谢缺陷病检查;属晚期妊娠的羊水沉渣,多作含脂肪细胞及其他有形成分的检查。
可以放宽。例如,对血液样品来说,有些酶是不要求立即冻存的。每一种组织的制备和保存方法均列在表1 中,表中同时列出了每种样品的用途。快速冻存时样品可放人液氮、干冰中或直接放入-70℃冰箱。冻存样品可在—70℃液氮、冰箱、干冰或-20℃冰箱中保存和运输。样品冻存及运输均以放入液氮中效果较好。非冻结冰箱是不能用的。 1.2.l 用于染色体研究的软组织的处理 室温下将全部或部分样品浸入0.9%的生理盐水中,在数分钟内将样品送至实验室,最迟也要在1~2 小时之内送到。 研究染色体能看到有丝分裂和减数
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