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- 2025年07月11日
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北京诺博莱德科技有限公司
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高灵敏的DTNB循环检测
检测范围从1 μg-100 μg
谷胱甘肽（GSH）是动物组织，植物组织，细jun和酵母内最为丰富的巯基（SH）化合物。GSH具有多种功能，如抵御活性氧和维持蛋白巯基等。在这些反应中，GSH转变为二硫代谷胱甘肽（GSSG: GSH的氧化型）。由于GSSG会被谷胱甘肽还原酶酶促还原，因此GSH是机体内的主要形式。
DTNB(5,5’-二硫基-双(2-***甲酸))，一种Ellman试剂，可以用来检测巯基化合物。1985年，Dr.M.E.Anderson建立了利用谷胱甘肽在DTNB和谷胱甘肽还原酶作用下循环反应来检测谷胱甘肽含量的高灵敏度的方法。DTNB和谷胱甘肽(GSH)反应，生成2-nitro-5-thiobenzoic acid（2-**-5-硫代苯甲酸）以及GSSG。由于2-硝基-5-硫代苯甲酸为一黄色产物，那么通过测量其在412 nm处的吸光度就能确定样品中GSH的浓度。GSSG在谷胱甘肽还原酶作用下生成GSH，然后再和DTNB反应再次生成2-硝基-5-硫代苯甲酸。因此，这种循环反应使得总谷胱甘肽含量的检测灵敏度大大加强了。
总谷胱甘肽检测试剂盒包含了除用于样品制备以外的其它所有必要的检测试剂。推荐使用5-磺基水杨酸来去除样品溶液中的蛋白以及防止GSH氧化型和γ-谷氨酰转肽酶反应。样品的最佳制备方法要根据样品而异，所以请先查阅相关资料。运用标准的检测方法，该试剂盒能够检测浓度在1 μM到100 μM之间的总谷胱甘肽。如果要检测较低浓度的谷胱甘肽（如血液样品），可以延长培养的时间。
试剂盒内含：
Enzyme Solution………… 50 μl × 1小管
Co-enzyme(冷冻干燥)……2小管
Substrate(DTNB)……………………2小管
Standard GSH(冷冻干燥)…1小管
Buffer solution…………… 50 ml × 1瓶
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