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- 文献和实验
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- 保存条件:
低温保存
- 保质期:
见标签
- 库存:
现货
- 供应商:
鹿森生物
- CAS号:
151-21-3
- 规格:
瓶装
应用
- 制备2x提取缓冲液
- 作为用于免疫沉淀的洗脱缓冲液中的组分
- SDS-聚丙 烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分析
生化/生理作用



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文献和实验十二烷基硫酸钠―聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS ― PAGE) 第二相聚丙烯胺 胺凝胶的选择主要取决于需要分离蛋白质的相对分子质量的范围,这与单相的聚丙烯酰胺凝胶电泳的选择是相同的。当蛋白质相对分子质量在15 000~200 000时,电泳迁移率与相对分子质量的对数呈线性关系。SDS―PAGE不仅可分离蛋白质,且可在一定范围内粗略测定蛋白质的相对分子质量。其主要步骤如下。 (1)凝胶配制及灌胶:胶浓度越高,所分离蛋白质的相对分子质量范围也越大。薄的胶,其染色和脱色快,且背景
离心机2.试剂( 1 ) 2%琼脂2g 琼脂加电极缓冲液100ml,水浴中溶化。( 2)电极缓冲液Tris 6g ,Gly28.8g ,SDS 2g ,去离子水溶解后,用HCl调pH值至8.3,水定容至2000ml 。( 3 ) 30% Aer Acr 30g,水溶后定容至100ml,过滤,冰箱中贮存备用。( 4 ) 1% Bis Bis 1g ,水溶后定容至100ml,过滤,冰箱中贮存。( 5)分离胶缓冲液(1.5mol/L Tris,pH8.7)Ths 15.17g,适量水溶解,然后用lmol/L
;3. 用等体积酚/氯仿/异戊醇抽提样品,1700×g,离心 10 min。如果样品溶解得不好,再加 1 体积不含蛋白酶 K 的消化缓冲液,重复离心。如果在界面上有一层厚的白色物质,重复抽提一次,将上层 (水溶液) 转移至一个新离心管中;4. 加入 1/2 体积 7.5mol/L 乙酸铵和 2 倍体积 100% 乙醇,12 000 rpm 离心 2 min;5. 用 70% 乙醇洗涤,晾干,沉淀用 TE 缓冲液或无菌双蒸水重新溶解, 使终浓度在约 1 mg/mL。注: 加入 0.1% 的 SDS 和 1? 滋
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