重组人VRK3厂商

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北京百奥莱博专业生产供应重组人VRK3厂商，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。

名称：重组人VRK3厂商
编号：JN1247
规格：10μg|50μg|500μg|1mg
英文名：Recombinant Human Vaccinia-related kinase 3
品牌：百奥莱博
产地：北京
本品由我们的哺乳动物细胞表达系统制备而成，目的基因编码的Met1-Phe412在C端含有His标签。

VRK3质量控制：＞95%(还原性SDS-PAGE)

VRK3制剂：液体

VRK3保存：收到货后请置于-20℃，可保存6个月，避免反复冻融。

关于VRK3：
Inactive serine/threonine-protein kinase VRK3 is a 474 amino acids protein that belongs to the protein kinase superfamily, CK1 Ser/Thr protein kinase family and VRK subfamily. It contains a protein kinase domain. VRK3 is widely expressed in human tissues and the protein localizes to the nucleus. VRK3 regulates several transcription factors, nuclear envelope assembly, and chromatin condensation and is also required for cell cycle progression .

想要了解更多关于重组人VRK3厂商的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息，请和我们联*(代"系")。此外我公司还销*(代"售")下面的产品：
WE0180 粪便基因组DNA提取试剂盒 Stool Genomic DNA Extraction Kit
BTN3100 RNA长效保存液 RNA Long-term Preservative Solution
SY0152 慢病毒报告基因阳性对照 Lentivirus Luciferase Reporter positive control
BTN90313 10×TBE电泳液
KFS126 高尔基体红色荧光探针 Golgi-Tracker Red
SY0354 4×Tris-HCl-SDS分离胶缓冲液，pH8.8 4×Tris-HCl-SDS Separating Gel Buffer, pH8.8
YT451 NF-κB荧光素酶报告基因质粒 NFκB-luc Reporter gene plasmid
BTN100910 长效期SDS-PAGE还原剂 SDS-PAGE Reducing Agent
HR0189 真菌膜蛋白提取试剂盒(2D电泳用) Fungal membrane protein extraction kit (2D electrophoresis)
SY0003 溶壁酶(10U/μl) Lyticase (10U/μl)
YT089 免疫染色洗涤液 Immunol Staining Wash Buffer
BTN90605B TdT加尾法DNA生物素标记试剂盒 TdT-Tailing DNA Labeling Kit
SV1529 α1-2,4,6 岩藻糖苷酶
SV0244 BssSI限制性内切酶 BssSI Restriction Endonuclease
KFS369 胃蛋白酶测试盒
SY0617 反玉米素 Trans-Zeatin
SV0815 I-SceI归位内切酶 I-SceI归位内切酶
BTN120623 β-琼脂糖酶Ⅰ β-AgaraseⅠ
KFS024 成心肌鉴定cTnI免疫组化试剂盒(IHC)
SY0251 DNA上样缓冲液 6×DNA Loading Buffer
RFT160 5M甜菜碱溶液(PCR级) 5M Betaine Solution(PCR Grade)
重组人VRK3厂商关键词：百奥莱博,JN1247,重组人VRK3蛋白,重组VRK3,Recombinant Human Vaccinia-related kinase 3

YT597 色*酸酶 Tryptophanase (Crude Enzyme)
WE0324 BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒(WB IHC) BCIP/NBT Kit(40×)
BTN100307C 酸洗玻璃珠(400μm) Acid-Washed Glassbeads(400μm)
SV1366 RNase HII
YT187 EMSA上样缓冲液(Gel-Shift上样缓冲液)(无色，10X) EMSA/Gel-Shift Loading Buffer
KFS268 Ac-VEID-FMK(caspase 6 抑制剂 ) Caspase 6 Inhibitor Z-VE(OMe)ID(OMe)-FMK
SY0505 磺酰罗丹明B(SRB)细胞增殖和毒性检测试剂盒 SRB Cell Proliferation and cytotoxicity assay kit
SV0524 NcoI-HF限制性内切酶 NcoI-HF Restriction Endonuclease
WE0175 柱式小量血液基因组DNA提取试剂盒(0.1～20ml) Blood Genomic DNA Mini Extraction Kit(0.1-1ml)
HR0454 EB染色试剂盒 EB Staining Kit
SY0147 PPARγ-Luc报告基因慢病毒颗粒 Lentivirus PPARγ Luciferase Reporter
BTN100905 8M盐*(代"酸")胍溶液(RNase-Free)
重组人VRK3厂商关键词：百奥莱博,JN1247,重组人VRK3蛋白,重组VRK3,Recombinant Human Vaccinia-related kinase 3


·一步定向无缝克隆试剂盒
编号：JN0001
英文名称：One step directed seamless cloning Kit
规格：20次|100次
  本试剂盒可以不依赖于连接酶，不受载体和目的片段的酶切位点限制，而直接用同源重组的方法，完成目的片段与载体相连接的基因克隆技术。该技术操作简单，PCR产物一步定向克隆，目的片段与载体无缝连接，反应时间短至20分钟，阳性率达到95%以上，让您轻松完成实验。

试剂盒组成：

 

组份	JN0001-20次
BalbRec重组酶	20μl
10×重组缓冲液	50μl

收到后请立即离心；可在-20℃长期保存，避免反复冻融

产品特点：
1、无酶切位点限制，无多余序列；
2、PCR产物无需酶切，一步克隆；
3、克隆效率高，阳性率＞95%；
4、省时省力，操作简单；
5、多片段定向拼接，妙用无穷；
6、定向克隆，任意载体。

使用方法：
A.线性化载体的获得

线性化载体可以通过两种方法获得，不管采取哪种方法，最终线性化载体的浓度需>15ng/μl。(高浓度的载体有利于提高效率)。
1、酶切选取合适的位点，单酶切或双酶切皆可，并且5´端突出，3´端突出或平末端均适用本Kit。
2、PCR选取合适的位点，设计正向和反向引物，引物长度一般在18-20bp左右，一般载体长度均大于3kb，建议用高保真的聚合酶扩增（推荐使用百奥莱博pfu DNA聚合酶，货号：JN0016）。为了避免模板质粒DNA对后续试验的影响，建议载体酶切后再用PCR扩增，自连背景更低，阳性率更高。

B.目的片段获得
目的片段通常通过PCR获得。引物设计要保证目的片段两端有至少15bp序列与线性化载体的两端一致，特殊应用引物设计请参照技术手册。为保证PCR扩增的特异性及灵敏度，请尽可能选用pfu等高保真酶（推荐使用百奥莱博pfu DNA聚合酶，货号：JN0016）。PCR每条引物长度至少在35-40bp，包括5´端与载体同源的15bp以及目的片段特异性序列20-25bp，（注意事项：如果是表达载体克隆构建，引物设计完全后，请注意检查读码框的正确）。引物设计方法：使用BalbRec PCR一步定向克隆试剂盒（无缝克隆）时，引物设计是很重要的，在设计引物时同样要遵循引物设计的基本原则，只不过上下游引物要加上15-18bp的载体同源序列。
载体同源序列如何添加主要分以下两种情况：
(1)载体酶切后是5"端突出或平末端，则引物上的同源序列包括5"端突出部分的序列；
(2)载体酶切后是3’端突出，则因无上的同源序列不包含突出部分。（如下图，红色碱基为希望保留原有的酶切位点所额外添加的碱基，不计算在15bp之内。
注：15bp同源序列不要求严格从载体最末端一届碱基计算，这是载体末端非同源序列将会被删除，同时导致重组效率的下降。当非同源序列达到20bp时，效率下降一半。

BalbRec一步定向克隆试剂盒（无缝克隆）引物设计方法

C.目的片段与载体的重组
1.将目的DNA片段和线性化载体以一定的摩尔比加到管子中进行重组反应
2.混匀后在37℃放置20分钟;
3.立即进行转化，剩余连接液可保存在4℃或-20℃待用。（注意：1.目的片段与载体的摩尔比在3：1-10：1之间，摩尔比低于3：1效率会降低2.反应时间在20-40分钟，时间太长不利于重组反应）

D.转化
建议所使用的感受态细胞效率要达到或>5X106 cfu/μg.
1.冰上融化一管100μl的DH5a感受态细胞，轻弹管壁使细胞重悬起来。加入10μl的反应液到感受态细胞中，轻弹数下，置冰上孵育45分钟。
2.42℃水浴中热激90秒后快速放入冰上5分钟。
3.加入500μl S℃液体培养基，37℃孵育45-60分钟。
4.5k离心3分钟收集菌体，根据需要将一定量的菌体均匀的涂布在含抗生素平板上。

E.阳性克隆鉴定
一般的，我们建议采用菌落PCR进行阳性克隆鉴定(推荐使用百奥莱博2x specificTM PCR MasterMix货号：JN0034)。
鉴定引物的选择：为避免假阳性结果，我们建议一条引物为载体特异性引物，另一条引物为目的片段特异性引物。

常用反应体系

试剂	体积
10×重组缓冲液	2μl
BalbRec重组酶	1μl
线性化载体（>15ng/μl）	N
插入片段	N
ddH2O	至20μl

注：载体与目的片段的摩尔比在1:3～1:10之间，如果摩尔比低于1:3，转化效率会下降。

储存条件：-20℃，避免反复冻融

北京百莱博科技有限公司是重组蛋白产品的专业生产供应销*(代"售")商，恭候您的咨询选购重组人VRK3厂商。