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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 样本:
人血清、血浆、细胞裂解液或细胞培养上清
- 库存:
562
- 标记物:
过氧化物酶
- 适应物种:
人
- 应用:
用于体外定量分析人血清、血浆、细胞裂解液或细胞培养上清中CRLF2的含量
- 检测方法:
ELISA(双抗夹心法)
- 检测范围:
0.156ng/ml~10ng/ml
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 规格:
96T
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括人细胞因子受体样因子2(CRLF2)ELISA试剂盒促销在内的一系列ELISA试剂盒产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:人细胞因子受体样因子2(CRLF2)ELISA试剂盒促销
编号:ZN2119
规格:96T
英文名:Human Cytokine receptor-like factor 2 ELISA Kit
品牌:百奥莱博
产地:北京
本试剂盒采用夹心法酶联免疫吸附法,用于体外定量分析人血清、血浆、细胞裂解液或细胞培养上清中CRLF2的含量。预先包被的抗体是CRLF2单克隆抗体,检测相抗体是CRLF2多克隆抗体,经生物素标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人CRLF2呈正相关。
检测指标:Cytokine receptor-like factor 2;CRLF2;TSLPR;CRL2;IL-XR;胸腺基质淋巴细胞生成素受体;细胞因子受体样因子2
检测范围:0.156ng/ml~10ng/ml
特异性:系统和其它细胞因子无交叉反应
敏感性:<5pg/ml
产品组成:
| 组分 | 规格 | 数量 |
| 预包被抗人CRLF2抗体的96孔板 | 96T | 1板 |
| 重组人CRLF2标准品(冻干) | 100ng/管 | 2管 |
| 生物素标记抗人CRLF2(100X) | 130μl | 1管 |
| 亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)(100X) | 130μl | 1管 |
| 样品稀释液 | 30ml | 1瓶 |
| 抗体稀释液 | 12ml | 1瓶 |
| ABC稀释液 | 12ml | 1瓶 |
| TMB显色液 | 10ml | 1瓶 |
| TMB终止液 | 10ml | 1瓶 |
| 洗涤缓冲液(25X) | 20ml | 1瓶 |
| 封板膜 | 4张 |
储存条件:2-8℃(频繁使用时),-20℃(长时间不用时)。
有效期:6个月(4℃);12个月(-20℃)。
样品稀释的一般原则:
用户须估计样品待测因子的含量,决定适当的稀释倍数,以使稀释后样品中待测因子的浓度处于ELISA试剂盒的最佳检测范围。根据待测因子含量高、中、低的不同,分别采取不同的稀释方案:
高:指待测因子在10~100ng/ml,一般按1:100稀释,297μl样品稀释液加3μl样品。
中:指待测因子在1~10ng/ml,一般按1:10稀释,225μl样品稀释液加25μl样品。
低:指待测因子在15.6~1000pg/ml,按1:2稀释,100μl样品稀释液加100μl样品。
特低:指待测因子≤15.6pg/ml,样品一般不做稀释,或按1:2稀释。
以上方案仅供参考,样品的稀释应有详细记录。
参考标准曲线数据:(取自某一批次质检数据,仅供参考,用户需要自己建立标准曲线)
| 浓度(pg/ml) | 0 | 156 | 312 | 625 | 1250 | 2500 | 5000 | 10000 |
| OD值 | 0.034 | 0.090 | 0.146 | 0.249 | 0.497 | 0.931 | 1.489 | 2.095 |
欲咨询购买人细胞因子受体样因子2(CRLF2)ELISA试剂盒促销,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·RCET3 mRNA原位杂交试剂盒
编号:ZN1218
规格:100T
基本信息:
保存条件:4℃保存一年
工作量:100张切片。
有效期:一年。
适用种属:mouse
标记方式:3’—尾段标记
试剂盒中内容:
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml;
2.预杂交液2ml;
3.RCET3 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液2ml;
4.封闭液5ml;
5.生物素化鼠抗Digoxin5ml;
6.SABC-POD 5ml;
7.生物素化过氧化物酶5ml。
用户自备试剂:
原位杂交专用盖玻片;POLY-L-LYSINE;DEPC;20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,原位杂交用PBS)
一.培养细胞和冰冻切片
准备工作:
固定液:4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6);1%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g,柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O,分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序:
注意:最重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗Digoxin:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲*透明,封片。
二.石蜡切片
如果有条件的话,应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后,及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。
1.常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。
3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间,例如5分钟,10分钟,20分钟,30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察:
RCET3的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项:
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数,加上基因仅由四个碱基排列组合而成,因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照,基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时,用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释,一般稀释2—10倍;并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况;如果出现大量的细胞核着色,往往和标本固定时间过长有关,应重新处理标本。
人细胞因子受体样因子2(CRLF2)ELISA试剂盒促销关键词:ZN2119,人细胞因子受体样因子2(CRLF2)ELISA试剂盒,Human Cytokine receptor-like factor 2 ELISA Kit
ZN2826 大鼠趋化因子CXCL1检测试剂盒 Rat Chemokine(C-X-C motif) ligand 1 ELISA Kit
ZN2506 小鼠降脂蛋白(Adipsin)检测试剂盒 Mouse Complement factor D ELISA Kit
ZN2186 人趋化因子CX3CL1(Fractalkine)检测试剂盒(ELISA方法) Human Chemokine (C-X3-C motif) ligand 1 ELISA Kit
ZN2304 人凋亡抑制蛋白Livin检测试剂盒(ELISA方法) Human Baculoviral IAP repeat-containing protein 7 ELISA Kit
ZN2901 大鼠基质金属蛋白酶(MMP-8)检测试剂盒 Rat Matrix metalloproteinase 8 ELISA Kit
ZN2581 小鼠趋化因子CXCL10检测试剂盒 Mouse Chemokine(C-X-C motif) ligand 10 ELISA Kit
ZN2261 人白介素28A(IL-28A)(IFN-λ2)检测试剂盒(ELISA方法) Human Interleukin-28A ELISA Kit
ZN2379 人正五聚体蛋白3(PTX3)检测试剂盒(ELISA方法) Human Pentraxin-related protein PTX3 ELISA Kit
ZN2059 人组织蛋白酶S(CTSS)ELISA试剂盒 Human Cathepsin S ELISA Kit
ZN2656 小鼠白介素17F(IL-17F)检测试剂盒 Mouse Interleukin-17F ELISA Kit
ZN2336 人巨噬细胞刺激蛋白(MSP)检测试剂盒(ELISA方法) Human Macrophage-stimulating protein ELISA Kit
ZN2453 人组织基质金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)检测试剂盒 Human tissue inhibitor of metalloproteinases 2 ELISA Kit
ZN2133 人趋化因子CXCL9检测试剂盒(ELISA方法) Human C-X-C motif chemokine 9 ELISA Kit
ZN2730 小鼠磷脂转运蛋白(PLTP)检测试剂盒 Mouse Phospholipid transfer protein ELISA Kit
ZN2848 大鼠趋化因子CXCL3检测试剂盒 Rat Chemokine (C-X-C motif) ligand 3 ELISA Kit
ZN2528 小鼠心肌营养素1(CT-1)检测试剂盒 Mouse Cardiotrophin 1 ELISA Kit
ZN2208 人生长激素ELISA试剂盒 Human Growth Hormone ELISA Kit
ZN2805 小鼠胎肝激酶1(FLK-1)检测试剂盒 Mouse Fetal liver kinase 1 ELISA Kit
ZN2006 人ADAM12(Meltrin-α)ELISA试剂盒 Human A Disintegrin and Metalloprotease 12 ELISA Kit
ZN2603 小鼠内皮细胞蛋白C受体(EPCR)检测试剂盒 Mouse Endothelial protein C receptor ELISA Kit
人细胞因子受体样因子2(CRLF2)ELISA试剂盒促销关键词:ZN2119,人细胞因子受体样因子2(CRLF2)ELISA试剂盒,Human Cytokine receptor-like factor 2 ELISA Kit
·CCR6 mRNA原位杂交试剂盒
编号:ZN0230
规格:100T
基本信息:
保存条件:4℃保存一年
工作量:100张切片。
有效期:一年。
适用种属:rat
标记方式:3’—尾段标记
试剂盒中内容:
1.胃蛋白酶(×10; Pepsin)2ml;
2.预杂交液2ml;
3.CCR6 mRNA原位杂交试剂盒寡核苷酸探针杂交液2ml;
4.封闭液5ml;
5.生物素化鼠抗Digoxin5ml;
6.SABC-POD 5ml;
7.生物素化过氧化物酶5ml。
用户自备试剂:
原位杂交专用盖玻片;POLY-L-LYSINE;DEPC;20%甘油
缓冲液(3%柠檬酸,2×SSC,0.5×SSC,0.2×SSC,原位杂交用PBS)
一.培养细胞和冰冻切片
准备工作:
固定液:4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6);1%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6)
3%柠檬酸——100ml蒸馏水中加柠檬酸(C6H8O7•H2O)3g,PH2.0左右。
2×SSC——1000ml蒸馏水中加*化*17.6g,柠檬酸三*(C6H5O7Na3•2H2O,分子量294)8.8g。
0.5×SSC——300ml蒸馏水加100ml 2×SSC即可。
0.2×SSC——270ml蒸馏水加30ml 2×SSC即可。
20%甘油——20ml甘油加80ml蒸馏水即可。
原位杂交用PBS(1000ml蒸馏水加*化*30g,Na2HPO4•12H2O 6g,NaH2PO4•2H2O 0.4g),PH7.2-7.6。
操作程序:
注意:最重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。
1.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。切片厚度10-20μm。
2.细胞在多聚赖*酸处理的盖玻片上进行培养,条件为37℃和5%的CO2,所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。
3.培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定:固定液为4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定20--30分钟。蒸馏水充分洗涤,干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。
4.30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合,室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。
5.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。
6.后固定:胃蛋白酶消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.2-7.6),含有1/1000 DEPC。室温固定10分钟。蒸馏水洗涤3次。
7.预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,不洗。
8.杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
9.杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次;37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色,重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。
10.滴加封闭液:37℃30分钟。甩去多余液体,不洗
11.滴加生物素化鼠抗Digoxin:37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
12.滴加SABC:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。
13.滴加生物素化过氧化物酶:37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。
14.DAB显色:使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂A,B,C各一滴,混匀,加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。
15.必要时苏木素复染,充分水洗。
16.酒精脱水,二甲*透明,封片。
二.石蜡切片
如果有条件的话,应尽可能地采用新鲜标本。标本离体后,及时予以固定。固定液为4%多聚甲醛/0.1M PBS(PH7.0-7.6),含有1/1000 DEPC。标本较大时用刀片切成厚度不超过4mm的小块,固定1小时即可,较大的标本固定不要超过2小时。某些组织对过度固定尤其敏感,如动物大脑,固定时间30-40分钟,一般不要超过1小时。
1.常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。
2.玻片的处理:一般采用多聚赖*酸或APES。
3.石蜡切片经常规脱蜡至水。30%H2O2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
4.暴露mRNA核酸片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3%柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温消化3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。用户可以比较不同的消化时间,例如5分钟,10分钟,20分钟,30分钟。以找到最佳的消化时间。原位杂交用PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。其余步骤和冰冻切片6-16步相同。
结果观察:
CCR6的细胞胞浆着色呈棕黄色。
注意事项:
由于特定的mRNA序列仅占总mRNA的极少数,加上基因仅由四个碱基排列组合而成,因此原位杂交容易出现非特异性染色。通过不加探针和用阴性标本做对照,基本可以确定染色是否为特异性的。有明显的非特异性染色现象时,用预杂交液对含探针的杂交液进行稀释,一般稀释2—10倍;并应加强探针杂交后的洗涤。如果有少量的细胞核着色属于正常情况;如果出现大量的细胞核着色,往往和标本固定时间过长有关,应重新处理标本。
北京百莱博科技有限公司专业生产人ELISA试剂盒产品,欢迎来电咨询选购人细胞因子受体样因子2(CRLF2)ELISA试剂盒促销。
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文献和实验进口分装 F00510 细胞色素 C(Cytochrome C) ELISA 48T/96T 2000/3000 进口分装 F00511 CXC趋化因子受体 1(CXCR1) ELISA 48T/96T 1800/2800 进口分装 F00512 CXCR3(CXCR-3) ELISA 48T/96T 1800/2800 进口分装 F00513 人 CXCL-11(I-TAC) ELISA 48T/96T 1800/2800 进口分装 F00514 CXC趋化因子配体
反应。 ✔与其他种属相同靶点蛋白的交叉反应。 ✔与血清中常见因子的交叉反应。 5干扰试验 判断其他分子与抗原-抗体对之间相互作用的影响。干扰性越大,待测物测定值越不准确。 ✔评估靶蛋白配体的干扰。 ✔评估靶蛋白受体的干扰。 6稳定性 判定试剂盒在规定条件下储存时间长短的标准。一般通过热加速稳定性实验验证。 ✔将试剂盒在 37℃ 条件下放置 7 天,与 4℃ 条件下放置的相同产品进行比较。 ✔各项性能检测结果的偏差均应 <15%。 7 精密度 试剂盒重复实验时,误差大小的评估标准。通常用 CV 表示
上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 人趋化因子受体5 (CCR5)ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和尿液生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 CCR5 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 CCR5与单抗结合,加入生物素化的抗人 CCR
技术资料暂无技术资料 索取技术资料









