北京小鼠上皮性钙粘附分子(E-Cadherin)检测试剂盒厂

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北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京小鼠上皮性*粘附分子(E-Cadherin)检测试剂盒厂家价格，我公司供应的ELISA试剂盒品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京小鼠上皮性*粘附分子(E-Cadherin)检测试剂盒厂家价格
编号：ZN2596
规格：96T
英文名：Mouse Epithelial-cadherin ELISA Kit
品牌：百奥莱博
产地：北京
本试剂盒采用夹心法酶联免疫吸附法，用于体外定量分析小鼠血清、血浆、细胞裂解液或细胞培养上清中E-Cadherin的含量。预包被抗体和检测相抗体都是近100%纯度的E-Cadherin亲和纯化多克隆抗体。检测相抗体经生物素标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后，PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应；经过PBS或TBS的彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠E-Cadherin呈正相关。

ECAD属于粘附分子的*粘附分子家族。在细胞浆内和cateninα,β,γ之一偶合。*粘附分子在组织成型中起作用。也起维护组织形态的作用。上皮性*粘附分子在肿瘤的发展中起一定作用。典型的*粘附分子包括一大块细胞外部分，含DXD和DXNDN重复序列，执行着*依赖性粘附作用。跨膜和细胞内部分较短。本试剂盒所用的标准品是基因重组表达产物，是ECAD位于细胞膜外的部分。

检测指标：E-Cadherin；Cadherin-1；CDH1；E-Cad；CD324
检测范围：156pg/ml～10000pg/ml
特异性：系统和其它细胞因子无交叉反应
敏感性：＜15pg/ml

产品组成：

 

组分	规格	数量
预包被抗小鼠E-Cadherin抗体的96孔板	96T	1板
重组小鼠E-Cadherin标准品(冻干)	10ng/管	2管
生物素标记抗小鼠E-Cadherin(100X)	130μl	1管
亲和素-过氧化物酶复合物(ABC)(100X)	130μl	1管
样品稀释液	30ml	1瓶
抗体稀释液	12ml	1瓶
ABC稀释液	12ml	1瓶
TMB显色液	10ml	1瓶
TMB终止液	10ml	1瓶
洗涤缓冲液(25X)	20ml	1瓶
封板膜		4张

储存条件：2-8℃（频繁使用时），-20℃（长时间不用时）
有效期： 6个月(4℃)；12个月（-20℃）

样品稀释的一般原则：
用户须估计样品待测因子的含量，决定适当的稀释倍数，以使稀释后样品中待测因子的浓度处于ELISA试剂盒的最佳检测范围。根据待测因子含量高、中、低的不同，分别采取不同的稀释方案：
高：指待测因子在10～100ng/ml，一般按1:100稀释，297μl样品稀释液加3μl样品。
中：指待测因子在1～10ng/ml，一般按1:10稀释，225μl样品稀释液加25μl样品。
低：指待测因子在15.6～1000pg/ml，按1:2稀释，100μl样品稀释液加100μl样品。
特低：指待测因子≤15.6pg/ml，样品一般不做稀释，或按1:2稀释。
以上方案仅供参考，样品的稀释应有详细记录。

参考标准曲线数据：(取自某一批次质检数据，仅供参考，用户需要自己建立标准曲线)

浓度(pg/ml)	0	156	312	625	1250	2500	5000	10000
OD值	0.015	0.076	0.134	0.239	0.509	0.904	1.457	2.265

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·SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(变性)(1×)
编号：ZN1876
规格：10ml
产品保存：-20℃保存，一年有效
产品说明：SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(SDS-PAGE Sample Loading Buffer，1×)，是一种经过改良的以*酚蓝为染料的蛋白上样缓冲液。可以直接用于细胞或组织样品的裂解，并用于后续常规的SDS-PAGE 蛋白样品的上样。使用 SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(1×)直接裂解蛋白样品的优点是比较便捷；缺点是裂解好的蛋白样品不能用常规的Bradford 法或 BCA 法测定蛋白浓度。这样蛋白上样量的均一性就较难控制，需要借助考马斯亮蓝等的染色结果或
Western的检测结果，来调整上样量。当细胞量或组织用量能控制得比较均一时，使用本裂解液直接裂解获取蛋白样品会比较便捷。
本产品也可以用于 SDS-PAGE 时待上样蛋白样品的稀释等。
注意事项：
1．SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(1×)中含少量 DTT，有轻微刺激性气味，但不含剧毒的巯基乙醇。
2.SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(1×)必须完全溶解后再使用。
使用说明：
1.在室温或不超过 37℃的水浴中溶解 SDS-PAGE 上样缓冲液(1×)。水浴溶解后立即室温存放，尽量避免长时间 置于水浴中。
2.对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升 SDS-PAGE 上样缓冲液(1×)的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使 SDS-PAGE 上样缓冲液(1×)和细胞充分接触。通常 SDS-PAGE 上样缓冲液
(1×)接触细胞 1-2 秒后，细胞就会被裂解。裂解后的样品收集到一洁净离心管内。
3.对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升SDS-PAGE上样缓冲液(1×)的比例加入 SDS-PAGE 上样缓冲液(1×)。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成 50-100 万细胞/管，然后再进行裂解。
4.对于组织样品：
A.把组织剪切成细小的碎片。
B.按照每 20 毫克组织加入 150-250 微升 SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(1×)的比例加入 SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(1×)。(如果裂解不充分可以适当添加更多的SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(1×)，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少 SDS-PAGE 蛋白上样缓冲液(1×)的用量。)
C.用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
D.充分裂解后，将样品收集到一洁净离心管内。
说明：如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈 vortex 使样品裂解充分。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
5.100℃或沸水浴加热 5-10分钟，以充分变性蛋白。说明：煮沸前通常会发现蛋白样品内有粘稠的半透明状物体，通常在本上样缓冲液内沸水浴煮沸 8-10分钟后可以确保该粘稠的半透明状物体消失，以便于后续的上样操作。
注意：如果起始时细胞或组织的用量较大，基因组 DNA 含量较高，煮沸 5-10分钟后有可能仍然比较粘稠或者有粘稠状的半透明物体。此时需要再煮沸 5-10分钟或者加入适量 1×的蛋白上样缓冲液后再煮沸 3-5分钟。充分煮沸后一方面可以使结合在基因组 DNA 上的蛋白充分释放，同时会导致基因组 DNA的部分断裂从而使粘稠感消失，这样就不会影响后续的上样操作了。
6.冷却到室温后，室温稍离心一下以沉淀可能出现的杂质等，上清即可直接上样到 SDS-PAGE 胶加样孔内即可。通常电泳至蓝色染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。

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