北京现货类鼻疽伯克霍尔德菌荧光PCR检测试剂盒折扣价

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博生产销*(代"售")的北京现货类鼻疽伯克霍尔德菌荧光PCR检测试剂盒折扣价，是高品质的细菌PCR检测试剂盒产品，欢迎的您垂询订购。

北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京现货类鼻疽伯克霍尔德菌荧光PCR检测试剂盒折扣价，产品信息：

类别：细菌PCR检测试剂盒

产品名	产品编号	等级含量	包装规格
类鼻疽伯克霍尔德菌荧光PCR检测试剂盒	SYA771	科研试剂	48次/盒

编号：SYA771

规格：48次/盒

品牌：百奥莱博

产地：北京

一、简介

本试剂盒用一对类鼻疽伯克霍尔德菌特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光PCR技术对类鼻疽伯克霍尔德菌进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

 

二、用途

该试剂盒适用于检测血液、痰、脑脊液、尿、浓性渗出物等样品中的类鼻疽伯克霍尔德菌(BM)，用于类鼻疽伯克霍尔德菌(BM)的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。

 

三、试剂盒组成(48T)

组份 数量 规格

BM反应液(BM-qPCR MIX) 1管 672μL/管

DNA抽提液(DNA Extraction) 2管 1.5mL/管

酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管

阴性对照(NTC) 1管 50μL/管

BM阳性对照(BM-PTC) 1管 50μL/管

 

四、荧光PCR仪器适用范围

ABI系列、MJ系列、Roche系列，博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。

 

五、储存条件及有效期：

本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

 

六、样品前处理与DNA提取

6.1 样本前处理：

取抗血液、痰、脑脊液、尿、浓性渗出物。

6.2 DNA提取

可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-荧光配套)或其他合适的商业化产品，并按照相应试剂盒说明进行操作。

对上述处理好的样本加入50uL核酸提取液，100℃恒温处理10min，13000rpm离心5min，取上清液转移至新的1.5mL EP管，-20℃保存；

 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议最后在样品制备区域加入阳性对照。

 

七、检测步骤：

7.1 试剂的准备

从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BM-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。

设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：

试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量

荧光PCR反应液 14µL N×14µL

酶液 1µL N×1µL

总量 15µL N×15µL

向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(BM-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。

7.2 qPCR反应条件

将各反应管放入实时荧光PCR仪器的反应槽内。

推荐循环条件:

1循环 50℃ for 2 min

预变性 1循环 95℃ for 10 min

PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec

60℃ for 60 sec

在60℃ 延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX 参比荧光。

 

八、结果分析

8.1 结果分析条件设定

直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的最高点为准。

8.2 试验成立判定

（1） 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。

（2） 阳性对照(BM-PTC)：均产生扩增曲线。

（3） 以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。

8.3 结果判定

（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明类鼻疽伯克霍尔德菌核酸阳性。

（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明类鼻疽伯克霍尔德菌核酸阴性。

（3） 如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。

（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行类鼻疽伯克霍尔德菌qPCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明类鼻疽伯克霍尔德菌核酸阳性；否则判为样本阴性。

 

九、注意事项：

（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。

（2） 所有使用的离心管应高压灭菌，而且必须不含DNA酶。

（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。

（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。

（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。

 

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