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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
重组GFP标签
- 亚型:
和纯化兔IgG
- 形态:
液体
- 保存条件:
-20℃冻存,避光
- 克隆性:
多克隆
- 保质期:
二年
- 目录编号:
WE0347
- 级别:
多克隆
- 库存:
438
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 宿主:
兔
- 应用范围:
WB,ELISA
- 浓度:
1mg/ml
- 靶点:
GFP
- 抗体英文名:
Anti GFP-Tag Rabbit Polyclonal Antibody
- 抗体名:
抗GFP标签多克隆多克隆抗体
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括抗GFP标签多克隆抗体 一抗在内的一系列抗体抗原产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:抗GFP标签多克隆抗体 一抗
编号:WE0347
英文名:Anti GFP-Tag Rabbit Polyclonal Antibody
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
规格:100μl
GFP或其突变体EGFP与目的蛋白融合表达常用于检测目的蛋白的表达和分布。该抗体特异识别GFP以及EGFP等一些突变体。
抗体类型:亲和纯化兔多克隆抗体IgG
免疫原:人工合成多肽
应用范围:WB(1:1000-5000)、ELISA(1:1000-20000)
想要了解更多关于抗GFP标签多克隆抗体 一抗的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息,请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品:
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13755-38-9 硝普* Sodium Nitroprusside
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甲基纤维素 Sodium benzenesulfonate 9004-67-5
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DL-天冬*酸 L-tert-Leucine 617-45-8
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抗GFP标签多克隆抗体 一抗关键词:GFP抗体,WE0347,抗GFP标签多克隆抗体,兔抗重组GFP标签,重组GFP标签抗体
·高效多重PCR Mix
编号:WE0124
英文名称:Super Multiplex PCR Mix
规格:1ml|5ml
本品是由SuperStar DNA Polymerase、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂等组成的预混体系,专用于多重PCR扩增。本品所含的 SuperStar DNA Polymerase是全新高效热启动酶,在常温下没有聚合酶活性,可有效减少PCR反应初期因引物错配而产生的非特异性扩增。独特的缓冲体系与热启动酶的组合,显著提高了PCR的扩增效率,扩增范围更广泛。本产品适用于各种类型的多重PCR反应,比如微卫星分析、基因分型和SNP检测等。
产品组成:
| 组份 | 1ml | 5ml |
| 2×Super Multiplex PCR Mix | 1ml | 5×1ml |
| ddH2O | 1ml | 5×1ml |
注意事项:
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
2、避免反复冻融,反复冻融可能使产品性能下降。如果在短期内需要频繁使用,可在2~8℃保存。
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 |
| 2×Super Multiplex PCR Mix | 25μl |
| Primer Pool | 0.1-0.3μM |
| DNA or cfDNA | 5ng-100ng |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:引物浓度请以终浓度0.1-0.3μM作为设定范围的参考。
2、PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 2 min | |
| 变性 | 98℃ | 20 s | 30-40个循环 |
| 退火延伸 | 65℃ | 90 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 5 min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
抗GFP标签多克隆抗体 一抗关键词:GFP抗体,WE0347,抗GFP标签多克隆抗体,兔抗重组GFP标签,重组GFP标签抗体
·一步法快速WB试剂盒(兔源一抗)
编号:WE0298
英文名称:One Step Western Kit HRP(Rabbit)
规格:50次
本试剂盒是百奥莱博最新研发的Western Blot检测试剂盒,能够在1小时左右得到高质量的Western Blot结果,且操作简便、检测灵敏度高、背景低、不需再加入二抗、系统稳定性强。常规的Western Blot间接法检测过程(封闭、一抗结合和二抗结合)需要较长的时间,实验流程复杂且需要多步条件优化。胶上的蛋白转移到载体膜上后,使用试剂盒中的封闭液孵育5 min,再用抗体反应液处理后的一抗孵育载体膜,经洗涤三次(每次5 min)后,即可进行发光或显色检测。本试剂盒针对目的蛋白一抗为兔来源的实验系统使用。
| 组份 | 50次 |
| Blocking Buffer |
500ml |
| Antibody Pretreat Solution(HRP/Rabbit) | 5×1ml |
| Dilution Buffer | 500ml |
| Wash Buffer(10×) | 500ml |
注意事项:
1、客户需自己准备兔来源的一抗。
2、使用Blocking Buffer封闭液、Antibody Pretreat Solution(HRP/Rabbit)抗体反应液(兔)、Wash Buffer(10×)漂洗液之前请充分混匀。
3、漂洗液如在2~8℃保存时出现沉淀,请恢复到室温,把沉淀溶解后正常使用,1×漂洗液可在室温保存一个月。
4、建议转膜完成后用丽春红等试剂染色,并把膜上多余部分剪去以增加试剂的使用效率。
5、一抗和抗体反应液HRP(兔)需要通过预实验来确定最佳的稀释用量。
6、抗体反应液HRP(兔)、抗体稀释液和抗体用量可根据膜的大小按比例放大或减少。
7、加入一抗的抗体稀释液可以回收重复使用一次。特异性及亲和力低的抗体不建议重复使用。回收后抗体如在1-2天内使用放置在2~8℃,长期保存请在-20℃冻存,避免多次反复冻融。
8、如果存在较高背景的情况,请调整抗体的用量,并增加洗膜次数。
9、试剂盒内所有试剂请于2~8℃保存,避免冻融。
操作步骤:
本产品适用于转膜完成后的封闭及抗体孵育步骤,以5cm×8cm 膜为例:
1、漂洗液准备:取10ml Wash Buffer(10×)用蒸馏水稀释至100ml,即为1×Wash Buffer,待用。每次洗膜用8-10ml。
2、封闭:转膜完成后,将膜浸没到10ml Blocking Buffer中,室温封闭5分钟。
3、漂洗:倒掉封闭液,加入8-10ml 1×Wash Buffer,于摇床上用较大速度漂洗1分钟。
4、洗膜的同时可准备抗体孵育液:取Antibody Pretreat Solution(HRP/Rabbit)100μl到离心管中,加入兔源一抗3-10μg,枪头吸打至充分混匀,室温孵育5分钟。加入至10ml Dilution Buffer中,充分混匀。
注意:
1)一抗的用量也可根据抗体的稀释度来进行调整。以抗体的最终稀释度1:1000为例,取100μl抗体反应液HRP(兔)到EP管中,加入10μl一抗,加入到10ml 抗体稀释液中,充分混匀,室温孵育5分钟。
2)如果膜面积较小,可按比例减少抗体、反应液及稀释液的用量。
5、完成步骤3后,倒掉漂洗液,将一抗、Antibody Pretreat Solution(HRP/Rabbit)及Dilution Buffer混合而成的抗体孵育液加到膜上(确保孵育液完全浸没膜表面),在摇床上以60 rpm左右的速度室温孵育40分钟。
6、弃去(回收)抗体孵育液,用配制的1×Wash Buffer漂洗3-5次,每次3分钟。
7、进行后续检测。建议采用ECL或者DAB法进行检测。
应用实例:
实例一 抗原为293T细胞全裂解液
A:普通WB对照:beta-actin兔多抗 3.3ug 室温孵育40min,洗膜后二抗羊抗兔-HRP(WE0394)1:10000稀释,室温40min,ECL(WE0308)曝光
实例二 抗原为293T细胞全裂解液
C:普通WB对照:PAK1,Epitomics兔单抗1:1000 室温孵育40min,洗膜后二抗羊抗兔-HRP(WE0394)1:10000稀释,室温40min,ECL(WE0308)曝光
D:一步法WB: Epitomics兔单抗1:1000 室温孵育40min,ECL(WE0308)曝光。
常见问题及解决方法:
| 问题 | 可能原因 | 解决方案 |
| 信号太弱或者 看不到条带 |
蛋白上样量太少 | 进行SDS-PAGE电泳时加大上样量。 |
| 蛋白转膜效率太低 | 优化转膜时间或者电流,确保转膜时膜与胶之间没有气泡。 | |
| 一抗亲和力较低 | 增加膜在溶液中的孵育时间或者增加抗 体浓度可以增加信号 |
|
| 一抗亲和力较低 | 对于低亲和力抗体来说,减少洗膜时间可以增加信号。由每次10 分钟,减少到每次5分钟可以增加信号。 | |
| 背景偏高 | 一抗使用过量 | 减少一抗的使用量。 |
| 一抗有非特异性结合或者 与封闭试剂有交叉反应 |
使用和二抗来源一致的血清或者无IgG的BSA。 | |
| 洗膜时间太短 | 增加洗涤的步骤可以进一步的降低背景。 | |
| 曝光显影时间过长 | 减少曝光时间。如果信号和背景都高,可以等待一段时间 ,等背景信号减弱后,再进行曝光。 |
|
| 容器或者试剂被污染 | 每次洗涤的时候使用清洁的容器。带手套,使用清洁的镊子处理膜。 |
储存条件:2~8℃保存,避免冷冻
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文献和实验【求助】用带GFP标签的microRNA质粒能用于luciferase实验吗?
dlh110 我构建了个microRNA的带GFP标签的质粒,不知道能不能与目的基因的3’UTR luciferase报告载体共转来检测luciferase的活性? bigbang_0_0 这个实验还要谨慎考虑一下,GFP的绿色荧光可能会干扰luciferase检测结果。 另外你说的microRNA带GFP标签,你要保证两个东西都要有表达且保持活性,建议你最好把这两个东西构建成两个转录单位,由两个启动
的话就只能现试试了。 国内好像有公司卖你所需要的抗体,可以检索下查查看! baisuilan 只要不是直接标记一抗,利用二抗带荧光或者酶,那就可以。 免疫荧光和免疫组化差不多,二抗带的标记不一样而已。 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号:shixiongcoming
superman211 拟通过WB进行AP-1的相关研究,在选择一抗时遇到如下困惑,望了解的战友予以解答。关于AP-1的出c-jun的一抗有多种,其中主要分为磷酸化一抗、非磷酸化一抗两大类。每一大类又包含若干,不知如何选择,它们之间有何区别?实验目的为研究某细胞AP-1的表达情况,及其蛋白磷酸化和DNA结合活性等。 superman211 自顶,望解答,谢谢! ziyunfei ampk细胞
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