PCR Master Mix (含绿色电泳染料) 核酸扩增(

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PCR Master Mix (含绿色电泳染料) 核酸扩增(PCR)由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于生化科学研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多PCR Master Mix (含绿色电泳染料)等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。

名称：PCR Master Mix (含绿色电泳染料) 核酸扩增(PCR)
编号：YT383
英文名：PCR Master Mix (Green, 2X)
规格：400次|2000次10000次
品牌：百奥莱博
本品是含有蓝色和橙色染料(电泳位置分别约4kb和50bp)的2倍浓度的PCR预混液，含有2X Taq DNA Polymerase、2X PCR Buffer、2X dNTP和2X Loading Buffer，只需加入模板DNA、引物和水即可进行PCR扩增，并且扩增完毕后可以直接上样电泳。主要适用于cDNA或基因组DNA等的常规PCR扩增，特别适合于定性或半定量的PCR扩增，也可用于长度小于2kb的DNA片段的扩增和克隆。

本品中已经含有所有的通用组分，用户只需自备引物、模板DNA和水即可进行PCR扩增。大大简化了PCR操作，使操作更加快捷，也减少了PCR操作过程中可能导致的污染，使PCR的重复性更好。可以扩增出长达8kb的片段，但通常更适合用于扩增2kb以下的DNA片段。

本产品中加入了蓝色和橙色的电泳示踪染料(整体呈现绿色)，其在浓度为1%琼脂糖胶中的迁移位置分别大约位于4kb和50bp处。PCR结束后可直接进行电泳检测，无需再添加上样缓冲液。蓝色和橙色示踪染料不会影响对相应DNA条带的观察和检测。

本产品稳定性高，经测试，反复冻融15次后对PCR的扩增效果无显著影响。反复冻融15次前后，使用不同引物扩增100-1500bp间不同长度目的片段的效果如下图所示。


本产品反复冻融15次前后扩增不同长度产物的效果图。A. 反复冻融前本产品进行PCR的扩增结果。B.反复冻融15次后的本产品进行PCR的扩增结果。除本产品是否反复冻融15次外，A和B的反应体系完全相同，电泳的上样量也相同。

储存条件：-20℃，有效期一年。

我公司的PCR Master Mix (含绿色电泳染料) 核酸扩增(PCR)，性价比高，货期短，送货上门，欢迎您来电咨询购买，另外，我公司还生产供应销*(代"售")下列产品：

·C端EGFP标签融合蛋白质粒(绿色荧光蛋白)
编号：YT466
英文名称：C-EGFP plasmid（with CMV promoter）
规格：1μg
本质粒是哺乳动物细胞表达质粒，用于表达C端含EGFP(Enhanced GreenFluorescent Protein, 增强绿色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子，可以高效启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的后面有一个EGFP的完整编码序列，因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达C端含有EGFP标签的融合蛋白。利用EGFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位，也可以利用EGFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。

本质粒的主要信息如下：

 

Feature Nucleotide	Position
CMV promoter	1-602
T3 promoter and T3 primer binding site	620-639
Multiple cloning site	651-740
EGFP	741-1460
T7 promoter and T7 primer binding site	1510-1531
SV40 polyAsignal	1543-1926
f1 origin of ss-DNA replication	2064-2370
bla promoter	2395-2519
SV40 promoter	2539-2877
Neomycin/kanamycin resistance ORF	2912-3703
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal	3704-4162
pUC origin	4291-4958

本质粒(5010bp)的图谱如下：


使用说明：
1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，构建的质粒可以用常规方法转染细胞。

储存条件：-20℃。


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·绿色核酸染料(RNA染料)(DNA染料)
编号：YT016
英文名称：Nucleic Acid Green(2000X)
规格：1ml|5ml
本核酸绿色染料是*化乙锭(EB)的升级替代产品，用于凝胶中DNA、RNA等核酸的染色。本品核酸绿染料具有安全(未检测到致突变性和细胞毒性)、灵敏度高、稳定性好等优点，凝胶中的核酸在使用本产品后经约500nm波长蓝光(也可以使用约260nm紫外光)激发呈现绿色荧光，适用于原先使用SYBR Green或SYBR Gold为核酸染料的凝胶成像和检测系统。

由于本品核酸绿染料在500nm左右处有最大的激发波长，可以使用对人体无害的蓝光灯或蓝光成像仪进行核酸检测，从而避免常规的紫外检测对核酸样品的致突变性，以及紫外对人的眼睛和皮肤的伤害。特别在切胶回收时，使用本品核酸绿染料并用蓝光灯具有很大的优势，不仅可以避免核酸样品的突变，也可以避免紫外光对人体的伤害。

本品核酸绿染料比EB或SYBR Green更安全。本品核酸绿染料在远高于其工作浓度范围时均没有细胞毒性及诱变性。艾姆斯氏试验(Ames test)结果表明，即使在S9代谢活化时，也没有检测到致突变性。本品核酸绿染料和百奥莱博另外一种安全型核酸染料核酸红色染料(YT015)，由于它们特殊的化学结构使其难以进入细胞，从而大大降低甚至避免了染料的致突变性和细胞毒性。艾姆斯氏试验结果表明，本品核酸绿染料比核酸红色染料(YT015)更安全，即便在S9代谢活化时，当本品核酸绿染料浓度高达约20微克/毫升时，也没有检测到致突变性。而SYBR Green染料可以穿透细胞膜，进入活细胞并染色DNA。并且有报道SYBR Green可以强烈增强紫外线诱导的基因突变。

本品核酸绿染料检测灵敏度高，对于小分子量核酸的染色效果好。本品核酸绿染料的检测灵敏度比EB高8-10倍，在检测低浓度、微量DNA或RNA方面比EB更佳，尤其对小分子量的DNA检测非常灵敏。在使用浸泡染色法时，本品核酸绿染料和SYBR Gold的灵敏度相近甚至更高；与SYBR Gold不同的是，本品核酸绿染料预先配制在凝胶中也有很高的灵敏度。EB对于小分子量核酸染色效果差，而本品核酸绿染料对于小分子量核酸的染色效果很好，便于观察酶切或PCR获得的小分子量核酸片段。本说明书推荐使用的本品核酸绿染料浓度，其检测效果略优于EB。如果希望获得更高的染色灵敏度，可以适当提高本品核酸绿染料的工作浓度。

本品核酸绿染料的稳定性好，染色重复性高。含SYBR Green的凝胶核酸染色的重复性比较差，这通常是由于SYBR系列染料的稳定性差导致的。而本品核酸绿染料的稳定性很好，可以室温长时间保存及使用微波炉加热。本品核酸绿染料的光稳定性良好，可以在室内正常光线下操作而无需避光。由于其热稳定性和光稳定性，含本品核酸绿染料的凝胶在核酸染色时的重复性非常好。

本品核酸绿染料可以使用和SYBR Green或EB相同的检测体系。本品核酸绿染料具有和SYBR Green或SYBR Gold几乎相同的光学性质，两者的激发光和发射光都非常接近，这样可以直接用本品核酸绿染料替换SYBR Green，以使用SYBR Green的凝胶观察、拍照或成像系统(约500nm激发)。对于原来用于EB染料观察的系统，可以考虑选用百奥莱博的核酸红色染料(YT015)染料来替代EB，但也可以使用没有致突变性的本品核酸绿染料来替代EB。使用本品核酸绿染料来替代EB，并且用EB的紫外检测体系时，检测灵敏度会比使用核酸红色染料(YT015)低约4-5倍。对于既可以观察EB也可以观察SYBR Green的具有紫外和蓝光两种激发光的凝胶成像系统，则推荐直接用本品核酸绿染料来替换EB。本品核酸绿染料的激发光谱和发射光谱请参考下图。


本品核酸红染料的激发光谱和发射光谱

本品核酸绿染料的使用方法和EB一致。本品核酸绿染料可以按适当比例直接加入琼脂糖中配制成凝胶，也可以在电泳完毕后对凝胶进行染色。前者更加方便，而后者灵敏度要更加高一些。但由于本品核酸绿染料本身已经非常灵敏，通常采用把本品核酸绿染料直接配制在凝胶中就可以了。对于一些特殊的情况，如核酸样品量特别少的情况等，则可以考虑电泳后再对凝胶进行染色。本品核酸绿染料对于核酸的迁移率影响非常小，小于SYBR Green对于核酸迁移率的影响。

通过凝胶回收试剂盒(YT010)或酚*仿抽提，可以有效去除与DNA或RNA结合的本品核酸绿染料，从而确保不会影响后续的连接、酶切、PCR、测序等常规的分子生物学用途。

储存条件：室温，避光，有效期一年。

注意事项:
1. 使用蓝光灯来检测本品核酸绿染料染色的核酸胶时，需要注意避免使用一些实为紫外灯的假冒伪劣的蓝光灯，以减少紫外线对于核酸样品和人体的伤害。比较简单的判断方法是，对于EB或核酸红色染料(YT015)染色的核酸胶，蓝光灯照射后是不会出现荧光条带的，而仅对于本品核酸绿染料染色的核酸胶，蓝光灯照射后才会出现荧光条带。如果对于EB或核酸红色染料(YT015)染色的核酸胶照射后也能观察到荧光条带，则说明使用的蓝光灯实际为紫外灯。
2. 本品核酸绿染料和EB一样作为荧光染料均需避光保存，但在使用过程中的常规室内光照不会影响其使用效果。
3. 制备好的本品核酸绿染料琼脂糖凝胶，在4oC避光条件下通常可以保存3-5天。
4. 本品核酸绿染料琼脂糖凝胶再次熔化使用时，为取得更好的观察效果，需要添加适量本品核酸绿染料。
5. 电泳之后的凝胶不建议重复使用。
6. 电泳后再使用本品核酸绿染料染色的凝胶一般不需要脱色，如果发现背景太高，可以使用不含核酸酶的水进行脱色处理。
7. 本品核酸绿染料和核酸红色染料(YT015)除了可以染色双链DNA外，也可染色单链DNA和RNA。核酸红色染料(YT015)对单链核酸的染色灵敏度约为对双链DNA染色灵敏度的一半。核酸红色染料(YT015)对单链核酸的染色灵敏度约为本品核酸绿染料的5倍。
8. 如果使用聚丙*(代"烯")酰胺凝胶，请使用浸泡染色法染胶，并延长染色时间至30分钟-1小时。
9. 如果观察到条带弥散或者分离不理想，建议使用浸泡染色法染色以确认是否与染料有关。如果浸泡染色法染色后仍然出现类似的问题，说明与染料无关，请尝试以下方法：使用新鲜配制的电泳缓冲液、降低核酸的上样量、降低染料的浓度、降低琼脂糖浓度、选用更长的凝胶、降低电泳电压一倍以上并延长凝胶电泳时间以改善电泳效果、使用更薄的梳齿等。
10. 本产品兼容常用的电泳缓冲液，例如TAE和TBE。
11. 本品核酸绿染料适用于约500nm或260nm激发的成像系统，如果使用普通的适用于核酸红色染料(YT015)或EB的紫外灯或成像系统(约300nm激发)，也能较好地观察到荧光，但强度会略弱一些。


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·海因消旋酶
编号：YT601
英文名称：Hydantoin Racemase (Crude Enzyme)
规格：100ml|1L
本酶为大肠杆菌表达的海因消旋酶，并经简单纯化获得的可以确保达到一定酶活力的粗酶液，用于催化D-5-monosubstituted hydantoin与L-5-monosubstituted hydantoin之间相互转化。

CAS：111310-51-1
外观：半透明黄色溶液
酶促反应：D-5-monosubstituted hydantoin = L-5-monosubstituted hydantoin
储存条件：-20℃，有效期1个月。

注意事项：
1. 由于本产品需新鲜制备，在您确认订购后约8个工作日才能发货。
2. 粗酶液的每次冻融均可能会引起部分失活，所以收到酶液后请根据需要进行分装，并置于-20℃或更低温度保存。
3. 随着保存时间的延长，酶活力会有一定程度的下降，收到产品后应尽快使用。
4. 本产品在生产和保存的过程中可能会有混浊或沉淀产生，融化后混匀即可，不影响正常使用。

北京百莱博科技有限公司专业生产供应销*(代"售")生物试剂、化学试剂、抗原抗体、血清血浆、Elisa试剂盒，更多试剂产品需求，欢迎来电咨询选购PCR Master Mix (含绿色电泳染料) 核酸扩增(PCR)。