生物素标记EMSA探针检测试剂盒

光敏生物素对探针的标记

步骤   1. 在一支灭菌的Eppendof离心管中加入20μl探针DNA(0.5-1μg/μl，溶解于水中 2. 避光条件下加等体积的光敏生物素醋酸盐并混匀。    3. 将装有反应液的离心管置于冰模中，暗室中在光标记灯下照射30分钟（灯距样品15cm）。 4. 加入无菌水至总体积为100μl 5. 加入100μl仲丁醇，混匀。10000rpm离心10min，去上层液，再加入仲丁醇，离心，使水相浓缩至30

酶促生物素标记cRNA探针的应用

酶促生物素标记cRNA探针基本方法和放射性标记cRNA探针同，所不同的是探针浓度为2.5μg/μl。显示探针反应步骤如下。 　　（1）用PBS冲洗粘附有切片的载片2×3min。根据情况也可用漂洗法。 　　（2）将载片浸入0.3%H2O2在PBS或甲醇内30min以封闭内源性过氧化物酶。 　　（3）PBS冲洗2×3min，用吸水纸拭干切片周围的水份，加入小鼠抗生物素血清1：100和PBS含正常羊血清（1：30），室温1h，或4℃过夜。 　　（4）PBS彻底冲洗。 　　

非放射EMSA实验技术讨论

性很强,而且半衰期为14天,所以从定购到标记再到做完试验,必须14天完成,种种制约因素导致现代科技发展非同位素EMSA试验技术,这就出现了地高辛标记为探针的非放射EMSA实验技术.在实践中没多久,地高辛标记为探针的非放射EMSA实验技术就暴露了一个严重的缺陷,标记的探真纯化后灵敏度弱,导致实验结果的信号不行,最终就出现了现在的生物素标记探真的EMSA实验技术.配合化学发光技术良好的解决了灵敏度的问题,到目前为止, 生物素标记探真的EMSA实验技术广为应用! EMSA试验成功的关键