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246
- 英文名:
HIF-1α Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
HIF-1 α consensus oligo的序列如下:
5"-TCT GTA CGT GAC CAC ACT CAC CTC-3"
3"-AGA CAT GCA CTG GTG TGA GTG GAG-5"
EMSA突变探针-HIF-1α中HIF-1α的公认的结合位点发生了突变,从而使HIF-1α无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中,正常的标记探针和HIF-1α的结合的条带会被抑制;而在突变探针冷竞争反应中,正常的标记探针和HIF-1α的结合的条带不会被抑制。参考下图。
一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针);
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针);
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记探针);
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记突变探针);
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+目的转录因子的特异抗体)。
注意事项:
1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。
储存条件:-20℃,有效期一年。
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文献和实验这样一个问题: 某公司的激活-和转运检测试剂盒,监测是否激活NF-KB测试剂盒原理:NF-κB未被激活时和IκB-α形成一个复合物,分布在细胞浆中。在炎症因子、生长因子或趋化因子等可以激活NF-κB的刺激存在的情况下,IκB-α会在Ser32和Ser36被磷酸化,随后被泛素-蛋白酶体途径降解。NF-κB和IκB-α解聚后,其核定位序列被暴露,从而被转运到细胞核内促进NF-κB依赖的基因转录。通过免疫染色检测NF-κB的主要亚基p65是否被转移到细胞核内,就可以判断NF-κB是否被激活.本NF-κB
胰腺是分泌血糖稳态激素的重要器官,是人体内控制血糖动态平衡的中心。胰腺的内分泌功能主要是由胰岛来完成的,每个胰岛都是一个复杂的微器官,由上千个分泌细胞组成。经典的胰岛内分泌细胞包括 α 细胞、β 细胞、δ 细胞、ε 细胞和 PP 细胞,分别主要产生胰高血糖素(glucagon)、胰岛素、生长抑素(SS)、生长素释放肽及胰多肽,其在成体胰岛内分别约占 20%、75%、3%~5%、1% 和<2%【1】。 胰岛移植为 I 型和晚期 II 型糖尿病患者提供了卓越的长期血糖控制,但是成体胰岛组织的可
技术毕竟是一门动手性很强的科学,理论还是和动手还是有一定差别的, 希望我的一些理论能给大家帮助.下面我大概的介绍一下EMSA的一些理论和自己试验的心得,以便站友学习, 另外,EMSA是一个很大的试验.我一时间也不能把所有的都罗列出来,只能等大家遇到问题,只要我有时间在线就尽力帮忙交流, 呵呵 ! 我做的最多的还是NFKB,此外还有AP-1,STAT3,STAT5,HIF等,希望能于大家交流. 简介: EMSA ( Electrophoretic Mobility Shift Assay ) 凝胶迁移
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