北京BaldStar TaqMan Mixture(dUTP

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(高含量ROX校正染料)价格在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：北京BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(高含量ROX校正染料)价格
编号：WE0156
规格：5ml
英*(代"文")名：BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG)(High ROX)
品牌：百奥莱博
产地：北京
  本品是专用于探针法(TaqMan，Molecular Beacon等)实时荧光定量PCR的预混体系，浓度为2×，包含 BaldStar Taq DNA polymerase、PCR Buffer、dNTPs(dTTP全部被dUTP所取代)、UNG酶和Mg2+，操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后的cDNA靶序列的检测，如基因表达分析，拷贝数分析，SNP基因型分析等。本产品中运用了dUTP-UNG防污染系统，在PCR反应体系配制过程中加入了dUTP，因此就形成了含有dU碱基的扩增产物。而此产物可以在下次进行PCR反应前，由PCR体系中的UNG酶处理消除。这样就有效的去除了PCR产物的残留污染，大大降低了由于扩增产物污染而导致的假阳性。UNG酶在PCR循环中的预变性步骤即可被灭活，因此不会影响新的含dU碱基PCR产物的形成。本品含有的 BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新高效热启动酶，在常温下没有聚合酶活性，有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的 PCR缓冲体系与热启动酶的组合，显著提高了PCR的扩增效率，荧光信号更强，灵敏度更高，可以检测单拷贝的模板。使用本产品可以得到更广的线性范围，对目的基因定量更准确。

  ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同，因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器(WE0154)：
Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-rad iCyler iQ，iQ5，CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器(WE0155)：
ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System，QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system，Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器(WE0156)：
ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。

产品组成：

 

组份	WE0154-5ml	WE0155-5ml	WE0156-5ml
2×BaldStar TaqMan Mixture(UNG)	5×1ml	5×1ml	5×1ml
50×Low ROX	-	200μl	-
50×High ROX	-	-	200μl
ddH2O	5×1ml	5×1ml	5×1ml

注意事项：
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2、避免反复冻融本品，反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃，避光。如果在短期内需要频繁使用，可在2～8℃保存。


使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×BaldStar TaqMan Mixture(UNG)	25μl	1×
Forward Primer，10μM	1μl	0.2μM
Reverse Primer，10μM	1μl	0.2μM
Probe，10μM	1μl	0.2μM
Template DNA	2μl
50×Low ROX or High ROX(可选)	1μl	1×
ddH2O	up to 50μl

注意：
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果，可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)使用的探针浓度，与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关，实际使用时请参照仪器说明书，或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
3)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定最佳的模板使用量。
4)不同仪器的激发光学系统有所不同，根据使用荧光定量的仪器选择加入50× Low ROX or 50×High ROX。

2、PCR反应程序
注意！本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成！

两步法PCR：

步骤	温度	时间	循环数
UNG酶消化	37℃/50℃	2-10 min
预变性	95℃	10 min
变性	95℃	15 s	35-40个循环
退火/延伸	60℃	1 min

注意：
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)建议采用两步法PCR反应程序，若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增。

三步法PCR：

步骤	温度	时间	循环数
UNG酶消化	37℃/50℃	2-10 min
预变性	95℃	10 min
变性	95℃	15 s	35-40个循环
退火	55℃-65℃	30s
延伸	72℃	30s

储存条件：-20℃，避免反复冻融

欲了解更多北京BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(高含量ROX校正染料)价格的品牌、产地、价格及说明书等产品信息，请致电北京百奥莱博科技有限公司，我们将竭诚为您服务，另外，以下产品正在火爆促销:
BTN131092 生物素 Biotin
SV0835 Phusion 超保真 PCR 试剂盒
SY0630 1-*乙酸(α-*乙酸) 1-Naphthylacetic acid
KFS383 一氧化*(代"氮")检测试剂盒(化学法测NO2-)
SV0278 BtgZI限制性内切酶 BtgZI Restriction Endonuclease
SV1553 M13KE 噬菌体
BTN100812 BLOTTO溶液 BLOTTO Solution
YT102 Alexa Fluor 350抗兔免疫荧光染色试剂盒 Immunol Fluorence Staining Kit with Alexa Fluor 350-Labeled Goat Anti-Rabbit IgG
SV1138 SET8 甲基转移酶 SET8 methyl transferase
HR0217 细胞蛋白快速提取试剂盒(离心柱法，2D电泳用) Cell protein extraction kit (centrifugal column method, 2D electrophoresis)
BTN100830 低pH缓冲液套装 Low pH Buffer Set
YT470 C端HA标签融合蛋白质粒 C-HA plasmid（with CMV promoter）
SY0368 0.5 M Tris-HCl缓冲液(pH 6.8)(无菌) 0.5 M Tris-HCl, pH 6.8, Sterile
北京BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(高含量ROX校正染料)价格关键词：WE0156,高含量ROX校正染料,dUTP+UNG酶,BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG)(High ROX),BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(高含量ROX校正染料)

SY0165 Nanog-GFP报告基因质粒 Nanog GFP Reporter Plasmid
BTN80918 Tris盐*(代"酸")溶液(1M,pH8.5)(RNase-free) RNase-free Tris·HCl Solution(1M,pH8.5)
WE0194 病毒RNA提取试剂盒 RNAtiqu Virus RNA Extraction Kit
SV0577 PacI限制性内切酶 PacI Restriction Endonuclease
SY0525 胰酶-EDTA溶液(0.25%)，含酚红 Trypsin-EDTA (0.25%), phenol red
BTN130806 胚胎裂解液 Embryonic Cell Lysis SolutionEmbryonic Cell Lysis Solution
YT205 生物素标记ARE凝胶迁移探针(0.2μM) Biotin-labeled ARE Probe For EMSA
SV1398 p19 siRNA 结合蛋白
HR0399 Annexin V-FITC/PI 双染细胞凋亡检测试剂盒 V-FITC/PI Annexin double staining cell apoptosis detection kit
BTN111009 端粒酶重复片段扩增试剂盒(TRAP试剂盒) Telomeric Repeat Amplification Protocol Kit
YT616 His-tag蛋白纯化树脂(镍柱) His-tag Purification Resin
HR0019 膜蛋白和胞浆蛋白提取试剂盒 Membrane protein and Cytoplasmic Protein Extraction Kit
KFS242 50×蛋白酶K 5×Proteinase K
RFT167 Top10化学感受态细胞 Top10 Competent cell
SY0269 总RNA提取试剂(同Trizol) Total RNA Extraction Reagent
KFS042 kFluor594标记抗兔免疫荧光染色试剂盒 Immunol Fluorescence Staining Kit with kFluor594-Labeled Goat Anti-Rabbit IgG
WE0298 一步法快速WB试剂盒(兔源一抗) One Step Western Kit HRP(Rabbit)
SV0845 Phusion 超保真 DNA 聚合酶
SY0748 Alexa Fluor 594标记链霉亲和素 Alexa Fluor 594 Streptavidin
BTN60203 硫*(代"酸")新霉素干粉 Neomycin Sulfate Powder
北京BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(高含量ROX校正染料)价格关键词：WE0156,高含量ROX校正染料,dUTP+UNG酶,BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG)(High ROX),BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(高含量ROX校正染料)


·2×Taq MasterMix(含染料)
编号：WE0102
英*(代"文")名称：2×Taq MasterMix(With Dye)
规格：1ml|5ml|25ml
  Taq MasterMix是由Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系，浓度为2×。预配好的PCR混合液可根据使用量的多少调节扩增产物的特异性和得率，使操作更加简单快捷，并可最大限度地减少人为误差和污染。独创的MasterMix配方使扩增产物得率高，重复性强，稳定性好。本产品已加入染料(蓝色)，反应结束后可直接进行电泳检测，无需再使用上样缓冲液。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基，因此可直接用于T/A克隆。主要适用于PCR法扩增DNA、DNA序列测定等实验。

产品组成：

组份	1ml	5ml	25ml
2×Taq MasterMix(With Dye)	1ml	5×1ml	5×5ml
ddH2O	1ml	5×1ml	5×5ml

注意：2×Taq MasterMix含有Taq DNA Polymerase, 3 mM MgCl2 和400μM each dNTP。

质量控制：
1、经检验无外源核酸酶活性；
2、PCR方法检测无宿主残余DNA；
3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因。

使用方法：
以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系：
 

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×Taq MasterMix(With Dye)	25μl	1×
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50μl
ddH2O	up to 50μl

注意：引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2、PCR反应条件：
 

步骤	温度	时间	循环数
预变性	94℃	2 min
变性	94℃	30 s	25-35 个循环
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	30 s
终延伸	72℃	2 min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。


储存条件：-20℃，避免反复冻融。

我公司强烈推荐核酸扩增(PCR)系列产品，热情期待您的咨询选购北京BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)(高含量ROX校正染料)价格。