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- 百奥莱博
- WE0183-YNV
- 北京
- 2025年07月11日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
973
- 英文名：
CWhipro Circulating Nucleic Acid Extraction Kit
- 保质期：
1年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
室温
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京现货游离DNA提取试剂盒品牌，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。
名称：北京现货游离DNA提取试剂盒品牌
编号：WE0183
规格：50次
英文名：CWhipro Circulating Nucleic Acid Extraction Kit
品牌：百奥莱博
产地：北京
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻的血清、血浆、淋巴液、尿液等无细胞体液中提取游离DNA。本试剂盒采用可以特异性结合核酸的离心吸附柱和独特的缓冲液系统，样品裂解后，游离DNA在高盐条件下与硅胶膜结合，在低盐、高pH值时游离DNA从硅胶膜上洗脱下来。本品可以处理0.1-1ml的液体样本，配置的高效微量吸附柱洗脱体积可低至20μl。纯化的DNA产量高、质量好，最大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制性杂质污染，游离DNA得率与样品的类型，储存条件、时间以及个体间差异有很大关系。纯化得到的游离DNA质量稳定、可靠，可直接用于PCR、荧光定量PCR和二代测序等分子生物学实验。
试剂盒组成：
| 组份 | 50次 |
| Buffer CL | 45ml |
| Buffer CB(浓缩液) | 60ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 13ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 15ml |
| Buffer EBL | 10ml |
| 蛋白酶K | 100mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 5ml |
| 吸附柱DF及收集管 | 50套 |
| 离心管(L-1.5ml) | 50个 |
保存条件：吸附柱DF置于2～8℃保存1年，其他组分室温(15～30℃)。
自备试剂：无水乙醇、异丙醇。
产品特点：
1、适用于从新鲜或冷冻的血清、血浆、淋巴液、尿液等无细胞体液中提取游离DNA。
2、可以处理0.1-1ml的液体样本，配置的高效微量吸附柱洗脱体积可低至20μl。
3、纯化得到的游离DNA质量稳定、可靠，可直接用于PCR、荧光定量PCR和二代测序等分子生物学实验。
实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K 中加入5ml的蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置。
2、样品应避免反复冻融，否则会导致提取量下降。
3、本试剂盒可以提取0.1-1ml液体样品。
4、使用前请检查Buffer CL、Buffer CB是否出现结晶或者沉淀，如有结晶或者沉淀，请将Buffer CL、Buffer CB于56℃水浴孵育重新溶解。
5、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer CB中加入异丙醇，混合均匀，并在试剂瓶标签上做好标记。
6、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇，混合均匀，并在试剂瓶标签上做好标记。
7、实验开始前请将水浴锅预热至60℃。
8、可将洗脱缓冲液Buffer EBL预热至60℃后使用。
操作步骤：
1、向离心管(自备)中加入20μl 蛋白酶K 。
2、加入200μl血清/血浆样本。
注意：当样品量超过200μl时，请等比例增加蛋白酶K 、Buffer CL和Buffer CB试剂用量，具体试剂加入量可参考附表。
3、加入160μl Buffer CL，颠倒混匀，剧烈震荡至少30秒。
4、60℃孵育30分钟，其间颠倒混匀数次。
注意：200μl 血清/血浆样本60℃孵育10-15分钟即可。
5、加入360μl Buffer CB(使用前检查是否加入异丙醇)，震荡至彻底混匀。
6、冰浴5分钟，短暂离心，使管壁和壁盖上的液体集中到管底。
7、将步骤6所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱中，若一次不能加完溶液，可分多次转入。12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇), 12000rpm离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
9、向吸附柱中加入750μl Buffer GW2(使用前检查是否加入无水乙醇)，12000rpm离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
10、向吸附柱中加入750μl 无水乙醇，12000rpm离心30秒，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
11、12000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应。
12、将吸附柱置于新的离心管中，向吸附柱的中间部位悬空加入20-100μl Buffer EBL或灭菌水，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存DNA。
注意：
1)如果下游实验对pH值敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)将洗脱缓冲液Buffer EBL预热至60℃后使用,且离心之前室温孵育5分钟，可以增加产量。
3)如果要提高DNA的终浓度，可以将得到的溶液重新加入到吸附柱中，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟。
4)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响，如需长期保存，推荐用Buffer EBL洗脱并于-20℃保存。
附表：不同样本量推荐试剂加入量：
| 加入物 | 加入量(μl) | ||||
| 样本 | 200 | 300 | 600 | 800 | 1000 |
| Buffer CL | 160 | 240 | 480 | 640 | 800 |
| Buffer CB | 360 | 540 | 1080 | 1440 | 1800 |
| 蛋白酶K | 20 | 30 | 60 | 80 | 10 |
储存条件：室温(15～30℃)。
欲了解更多北京现货游离DNA提取试剂盒品牌的品牌、产地、价格及说明书等产品信息，请致电北京百奥莱博科技有限公司，我们将竭诚为您服务，另外，以下产品正在火爆促销:
·Annexin V-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒
编号：WE0325
英文名称：Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit
规格：50次
本试剂盒是一种采用Annexin V-FITC与PI双染法进行细胞早期凋亡分析的检测试剂盒。
细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝*酸(PS)从细胞膜内转移到细胞膜外，使PS暴露在细胞膜外表面。PS是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使PS暴露在细胞膜外。Annexin V具有易于结合到磷脂类如PS的特性，对PS有高度的亲和性。因此，该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的PS。PS转移到细胞膜外不是凋亡所独特的，也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的，而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就被破坏。另外一种活细胞非透过性荧光染料碘化丙啶(Propidium Iodide，PI)不能通过完整的活细胞，但能够对坏死和凋亡晚期的细胞进行染色， 因此通常将Annexin V与PI配合染色， 以区别凋亡早期细胞与坏死细胞和凋亡的晚期细胞。
试剂盒组成：
| 组份 | 50次 |
| 4×Binding Buffer | 10ml |
| Propidium Iodide，PI | 500μl |
| Annexin V-FITC | 250μl |
注意事项：
1、本试剂盒需使用流式细胞仪进行检测。
2、需自备PBS和去离子水。
3、荧光染料均存在淬灭问题，保存和使用过程中请尽量注意避光，以减缓荧光淬灭。
4、PI对人体有刺激性，请注意适当防护。
5、请穿实验服并戴一次性手套操作。
操作步骤：
1、细胞样品的准备：
a．对于贴壁细胞：小心收集细胞培养液到一离心管内备用。用胰酶消化细胞，至细胞可以被轻轻用移液管或枪头吹打下来时，加入前面收集的细胞培养液，吹打下所有的贴壁细胞，并轻轻吹散细胞。再次收集到离心管内。1000×g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50μl左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1ml 4℃预冷的PBS，重悬细胞，再次离心沉淀细胞，小心吸除上清。再次加入1ml 4℃预冷的PBS，重悬细胞，再次离心沉淀细胞。
b．对于悬浮细胞：1000×g左右离心3-5分钟，沉淀细胞。对于特定的细胞，如果细胞沉淀不充分，可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清，可以残留约50微升左右的培养液，以避免吸走细胞。加入约1ml 4℃预冷的PBS，重悬细胞，并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞，小心吸除上清，可以残留约50μl左右的PBS，以避免吸走细胞。再次加入1ml 4℃预冷的PBS，重悬细胞，再次离心沉淀细胞。
2、用去离子水按 1:3 稀释Binding Buffer(4ml Binding Buffer +12ml 去离子水)。
3、用 250μl Binding Buffer重新悬浮细胞，调节其浓度为 1×106/ml。
4、取 100μl 的细胞悬液于 5ml 流式管中，加入 5μl Annexin V/FITC 和 10μl 20μg/ml的PI溶液。
5、混匀后于室温避光孵育 15 分钟。
6、在反应管中加 400μl PBS，流式细胞仪(FACS)分析。
实验图例
储存条件：2～8℃，避光保存
北京现货游离DNA提取试剂盒品牌关键词：游离DNA提取试剂盒,CWhipro Circulating Nucleic Acid Extraction Kit,WE0183
·蛋白印迹膜再生液
编号：WE0304
英文名称：Stripping Buffer
规格：100ml|500ml
本产品采用温和洗涤配方，可在不影响目的蛋白的情况下，去除结合在印迹膜上的一抗和二抗，使同一张膜可进行多次抗体检测，无需反复电泳和转膜，节省样品和时间，适用于使用NC或PVDF膜进行Western Blot检测时条件的优化或同一样品不同蛋白的检测。
注意事项：建议先检测表达量较低的目的蛋白，用再生液处理后检测表达量高的蛋白，如内参蛋白等。
操作步骤：
1、将曝光后的膜取出，加入适量的Stripping Buffer(蛋白印迹膜再生液)，再生液充分覆盖膜表面，8.5 cm×5.5 cm膜加入15ml左右蛋白印迹膜再生液，室温振摇孵育15分钟左右(孵育时间应根据不同的目的蛋白来调整：比如内参抗体等表达量较高的蛋白，使用蛋白印迹膜再生液时可以延长孵育时间至1小时或者在37℃孵育30分钟)。
2、弃去蛋白印迹膜再生液，用15ml缓冲液(PBST或TBST)洗膜3次，每次5 分钟，室温振摇。
3、为了检测酶标二抗洗脱是否完全，此时可以用显色方法来确定二抗是否洗脱掉。
4、待检测完毕，确认膜上无残留的酶活性，再生后的膜通过加入15ml的封闭液进行封闭，室温30分钟或者4℃封闭过夜。
5、重新加入待测一抗，进行下一轮的WB实验。
储存条件：室温
北京现货游离DNA提取试剂盒品牌关键词：游离DNA提取试剂盒,CWhipro Circulating Nucleic Acid Extraction Kit,WE0183
YT191 封闭液(YT190专用) Block Solution For YT190 Chemiluminescent EMSA Kit
KFS273 Bafilomycin A1 (自噬抑制剂，质子泵抑制剂) Bafilomycin A1
SY0510 细胞增殖示踪荧光探针 CFDA, SE
SV0535 NheI限制性内切酶 NheI Restriction Endonuclease
WE0180 粪便基因组DNA提取试剂盒 Stool Genomic DNA Extraction Kit
HR0458 吖啶橙染色试剂盒 Acridine orange staining kit
SY0151 慢病毒报告基因阴性对照 Lentivirus Luciferase Reporter negative control
BTN90313 10×TBE电泳液
KFS125 DiOC6(3)碘化物 3,3’-Dihexyloxacarbocyanine iodide
ALH116 大量全血基因组DNA提取试剂盒(10ml) Whole blood genomic DNA extraction kit
YT451 NF-κB荧光素酶报告基因质粒 NFκB-luc Reporter gene plasmid
BTN100912B 长效期SDS-PAGE电泳液(2-30 KD)(干粉) Stable SDS-PAGE Running Buffer
BTN130812 凋亡DNA提取试剂盒 Apoptotic DNA extraction kit
SV1110 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基化酶 Fpg 8- oxygen generation guanine DNA glycosylation enzyme Fpg
YT088 免疫染色一抗稀释液 Immunol Staining Primary Antibody Dilution Buffer
BTN90605B TdT加尾法DNA生物素标记试剂盒 TdT-Tailing DNA Labeling Kit
SY0407 12ml重力层析空柱 Gravity Chromatography Columns
SV0242 BssSαI限制性内切酶 BssSαI Restriction Endonuclease
KFS369 胃蛋白酶测试盒
SY0616 玉米素 Zeatin
SY0047 dNTP混合溶液(10 mM each) dNTP Mix (10 mM each)
BTN120623 β-琼脂糖酶Ⅰ β-AgaraseⅠ
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