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404
- 保质期:
24个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")2kb DNA Marker哪里买,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:2kb DNA Marker哪里买
编号:WE0246
规格:100次(500μl)|500次(5×500μl)
品牌:百奥莱博
产地:北京
2 kb DNA Marker由6条DNA片段组成,分别为2000bp、1000bp、750 bp、500 bp、250 bp和100 bp。本产品为已含有1×Loading Buffer的DNA溶液,可取5μl直接电泳,使用十分方便;电泳时750 bp的DNA片段量约为150ng,显示亮带,其他条带的DNA量约为50ng。
注意事项:
1、本产品可直接化冻混匀使用,无需加热。
2、请及时更换电泳缓冲液并使用新制琼脂糖凝胶,以免影响电泳结果。
3、DNA琼脂糖凝胶电泳时,凝胶的纯度对DNA条带的清晰度影响很大,因此尽量选用质量好的琼脂糖,推荐凝胶浓度为1%-2%,电压4-8 v/cm。
4、凝胶浓度与DNA片段的分离性能关系密切。凝胶浓度越大,对短片段DNA分离性能越好;反之,凝胶浓度越小,越有利于长片段DNA的分离。
使用方法:
取5μl 加入琼脂糖凝胶的加样孔中(如果加样孔较宽,大于6mm时,须适当增加上样量),进行电泳。
1%琼脂糖凝胶电泳图(5μl)
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期24个月。
除2kb DNA Marker哪里买外,我公司正在打折促销以下产品:
-Mouse IgG"
BTN120644 聚乙二醇 PEG
SV1581 甲基化DNA富集试剂盒
SV0319 EaeI限制性内切酶 EaeI Restriction Endonuclease
WE0107 Pfu DNA Polymerase Pfu DNA Polymerase
SY0774 柠檬酸*-EDTA抗原修复液(40×) Antigen Retrieval Buffer (40×Citrate-EDTA, pH 6.2)
SY0078 HIF-1-Luc荧光素酶报告基因质粒 HIF-1 luciferase reporter plasmid
BTN131276 Baker甲醛*中性固定液 Baker Fixative Solution
KFS054 Cy5标记抗小鼠免疫荧光染色试剂盒
SY0281 零背景TOPO-TA克隆试剂盒 Zero TOPO-TA Cloning Kit
YT367 酸性磷酸酶检测试剂盒 Acid Phosphatase Assay Kit
BTN140653 50mL亲和层析柱 Affinity Chromatography Colum(50mL)
HR0043 细胞蛋白提取试剂盒 Cell protein extraction kit
YT630 彩色预染蛋白质分子量标准(10-180kD) Prestained Color Protein Marker
YT014 蛋白酶K溶液(20mg/ml) Proteinase K Solution
BTN3180 *化乙锭溶液 Ethidium Bromide Solution
SV1412 pTXB1 载体
SV0053 ApeKI限制性内切酶 ApeKI Restriction Endonuclease
KFS299 PMA/TPA (PKC激活剂) Phorbol 12-myristate 13-acetate
SY0540 细胞膜固定剂 Cell Membrane Fixation Buffer
SV0606 PsiI限制性内切酶 PsiI Restriction Endonuclease
Glycosylase"
2kb DNA Marker哪里买关键词:百奥莱博,2kb DNA Marker,WE0246
RFT025 pUC18/MspI(34~501bp)
BTN160801 大肠杆菌TG1电击感受态细胞 E.coli TG1 Electroporation-Competent Cell
ALH174 口腔拭子基因组DNA提取试剂盒 Rapid genomic DNA kit for oral and pharyngeal swab
YT482 N端Myc标签融合蛋白质粒 N-Myc plasmid(with CMV promoter)
WE0251 TOP10感受态细胞 TOP10 Competent Cell
BTN130941 木材DNA提取试剂盒 Timber DNA extraction kit
SV1159 GpC 甲基转移酶(M.CviPI) GpC methyl transferase (M.CviPI)
Anti-Mouse IgG"
KFS196 TUNEL检测阳性对照制备试剂盒(可配套TUNEL系列试剂盒使用)
SY0435 Anti-His标签亲和纯化凝胶 Anti-His Affinity Gel
SV0303 DpnI限制性内切酶 DpnI Restriction Endonuclease
WE0102 2×Taq MasterMix(含染料) 2×Taq MasterMix(With Dye)
HR0329 BCA蛋白定量试剂盒 BCA protein quantitative Kit
SY0073 MEF2-Luc荧光素酶报告基因质粒 MEF2 luciferase reporter plasmid
BTN131093 荧光素标记的生物素 FITC-Biotin
BTN90708 即用型高保真PCR试剂盒 Instant HiFi PCR MasterMix
2kb DNA Marker哪里买关键词:百奥莱博,2kb DNA Marker,WE0246
·2×Babuddy MasterMix(含染料)
编号:WE0110
英文名称:2×Babuddy MasterMix(With Dye)
规格:1ml|5ml
本品是由Babuddy Super Fidelity DNA Polymerase、PCRBuffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系,浓度为2×。Babuddy Super Fidelity DNA Polymerase是一种快速、高扩增效率的高保真DNA聚合酶,具有5"-3"DNA聚合酶活性和3"-5"外切核酸酶活性。经过改造的聚合酶其活性区域融合有一段聚合增强结构域,独特的结构极大提升了保真性和延伸速度。Babuddy Super Fidelity DNA Polymerase的保真性是普通Taq DNA Polymerase的50倍,是普通Pfu的6倍。其延伸速率为15-30s/kb,成功克服了普通Pfu酶扩增效率低、扩增速度慢的缺陷,大大缩短了反应时间。
本品特别适合于在基因克隆实验中扩增长片段DNA,尤其在扩增>10 kb的DNA片段时,优势更加明显,所扩增的片段最长可达20 kb。预配好的PCR混合液使操作更加简单快捷,可最大限度地减少人为误差和污染。
使用本产品扩增得到的PCR产物的3"端不带有“A”碱基,可直接克隆于平末端载体中。如需进行T/A克隆,需在PCR产物末端添加“A”后进行克隆。本产品具有延伸速度快、扩增效率高、保真性强的特点。适用于基因克隆、基因定点突变、SNP等实验。本产品已加入染料(蓝色),反应结束后可直接进行电泳检测,无需再使用上样缓冲液。
产品特点:
1、高保真性:保真性是普通Taq DNA Polymerase的50倍,普通Pfu的6倍。
2、扩增速度快:其延伸速率为15-30sec/kb,成功克服了普通Pfu酶扩增效率低、扩增速度慢的缺陷。
3、特别适合于扩增长片段:扩增的片段长度可长达20kb。
产品组成:
| 组份 | 1ml | 5ml |
| 2×Babuddy MasterMix(With Dye) | 1ml | 5×1ml |
| ddH2O | 1ml | 5×1ml |
注意:2×Babuddy MasterMix含有Babuddy DNA Polymerase,2×PCR Buffer, 3 mM MgCl2和400μM dNTP mix。
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 20μl反应体系 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×Babuddy MasterMix | 10μl | 25μl | 1× |
| Forward Primer,10μM | 1μl | 2.5μl | 0.5μM |
| Reverse Primer,10μM | 1μl | 2.5μl | 0.5μM |
| Template DNA | 适量 | 适量 | <250ng |
| ddH2O | up to 20μl | up to 50μl |
a.模板:在50μl PCR反应体系中,DNA模板的建议用量为低复杂度模板(如质粒DNA,λDNA等)1 pg- 10ng,高复杂模板(如基因组DNA)50-250ng。
b.引物:引物浓度请以终浓度0.2-1.0μM作为设定范围的参考,推荐终浓度为0.5μM。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件
常规三步法PCR反应:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 98℃ | 30 s-3 min | |
| 变性 | 98℃ | 5-10 s | 25-35 个循环 |
| 退火 | 45-72℃ | 10-30 s | |
| 延伸 | 72℃ | 2-4 kb/min | |
| 终延伸 | 72℃ | 5-10 min |
a.变性:简单模板的预变性温度为98℃,预变性时间为30 s。对于比较复杂的模板,预变性时间可延长至3分钟。
b.退火:使用本产品时,退火温度设定的基本原则是,当引物长度小于或等于20 nt时,退火温度为引物最低的Tm;当引物长度大于20 nt时,退火温度应在最低Tm的基础上以Tm+3℃退火10-30 s。当无法得到理想的扩增效率时,应以最低的Tm值逐步提升至模板延伸温度。对于Tm高的引物可以使用两步法PCR。
c.延伸:本产品中所包含的Babuddy DNA Polymerase的扩增效率为2-4 kb/min,复杂性低的模板可用4 kb/min,复杂性高的基因组DNA模板,延伸时间则应为2 kb/min,对于一些cDNA模板,延伸时间可增加到1.5 kb/min。
d.循环次数:可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以,在保证产物得率的前提下,应尽量减少循环次数。
当引物的退火温度较高时,建议使用两步法进行PCR扩增:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 98℃ | 30 s-3 min | |
| 变性 | 98℃ | 5-10 s | 25-35 个循环 |
| 延伸 | 72℃ | 2-4 kb/min | |
| 终延伸 | 72℃ | 5-10 min |
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
我公司正在优惠促销核酸电泳和回收等系列产品,期待您的咨询选购2kb DNA Marker哪里买。
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文献和实验1、Marker选择标准(1)应选择在目标片段大小附近ladder较密的marker,这样对目标片段大小的估计较准确。(2)所选marker应能清楚反映目标片段的大小,且次要片段大小也能反映出来。如作酶切鉴定时,目的片段和切后载体片段最好能在同一个marker中反映出来,若二者不能兼顾,将前者作为主要考虑要素。2、常见问题分析Q:为什么marker条带非常模糊,无法辨别具体条带?A:出现上述情况,可能有以下几个原因:1. marker条带出现了降解。请确保在使用过程中避免核酸酶污染;2. 电泳
DL5000 DNA Marker.doc
1.Marker选择标准 (1)应选择在目标片段大小附近ladder较密的marker,这样对目标片段大小的估计较准确。 (2)所选marker应能清楚反映目标片段的大小,且次要片段大小也能反映出来。如作酶切鉴定时,目的片段和切后载体片段最好能在同一个marker中反映出来,若二者不能兼顾,将前者作为主要考虑要素。 2.常见问题分析 Q:为什么marker条带非常模糊,无法辨别具体条带? A:出现上述情况,可能有以下几个原因:1. marker
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