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- 详细信息
- 技术资料
- 库存:
396
- 英文名:
One-tube DNA agarose gel recovery reagent
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
常温运输,4℃保存,有效期一年。  溶液A呈淡黄色,溶液B呈红色,如果颜色发生变化,则表示pH已经改变,请弃之不用。溶液C为无色液体,会在瓶底产生少量晶体状产生沉淀,用前无需溶化,避开沉淀直接取上清液使用)。使用方法:1.从琼脂凝胶上切下目的DNA片段,放入1.5mL离心管中。尽可能多地去掉不含DNA的胶。如果方便最好称重以便估计需要的溶胶液(空的1.5mL离心管EP 约0.9 克,一片普通胶片的重量在0.05-0.1 克左右)。2. 按0.1 克胶加300μL溶液A的比例加入溶液A,65℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
百奥莱博专业生产销*(代"售")一管式琼脂糖凝胶DNA回收试剂现货促销,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:一管式琼脂糖凝胶DNA回收试剂现货促销
编号:BTN60706
规格:30次
英文名:One-tube DNA agarose gel recovery reagent
品牌:百奥莱博
产地:北京
本产品可以直接从溶化的琼脂糖凝胶中沉淀回收单双链DNA的产品,也堪称最快速的胶回收试剂,操作时间只有玻璃奶式和柱式胶回收方法的1/3左右。本产品也可以用于单双链RNA胶回收。
产品特点:
1.超快,整个过程不到15分钟(对一个样品而言),由溶胶(3分钟),放置(2分钟),沉淀(5分钟)和两次洗涤(各1-2分钟)几步组成。
2. 纯度高,回收产物可以直接用于连接、酶切、PCR、测序等各种反应,不影响后续酶反应。
3. 回收率高,一般大于50%。
4.适用范围广,可用于回收普通琼脂糖凝胶能够分离的DNA片段(一般在100bp-50 Kb 之间),而柱式同类产品几乎都不能回收50 Kb的超大片段。
5.一管式操作,不需要任何样品转移步骤,使大片段DNA 保持完整,同时减少了污染的可能。
6. 既可用于回收单双链DNA,又可用于回收单双链RNA。
7.扩容性好,可以在一个离心管中(包括15mL或50mL离心管)进行大规模回收,没有最大吸附量的限制;而柱式胶回收试剂都受最大吸附量的限制。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| 溶液A | 9ml |
| 溶液B | 3ml |
| 溶液C | 30ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:常温运输,4℃保存,有效期一年。
溶液A呈淡黄色,溶液B呈红色,如果颜色发生变化,则表示pH已经改变,请弃之不用。溶液C为无色液体,会在瓶底产生少量晶体状产生沉淀,用前无需溶化,避开沉淀直接取上清液使用)。
使用方法:
1.从琼脂凝胶上切下目的DNA片段,放入1.5mL离心管中。尽可能多地去掉不含DNA的胶。如果方便最好称重以便估计需要的溶胶液(空的1.5mL离心管EP 约0.9 克,一片普通胶片的重量在0.05-0.1 克左右)。
2. 按0.1 克胶加300μL溶液A的比例加入溶液A,65℃保温3分钟使胶融化。其间可用摇晃几次以促进凝胶融化。如果放量使用,溶化胶的时间可能需要延长。
3. 待胶完全溶化后,按0.1 克胶加100μL溶液B的比例加入溶液B,充分混匀。如果回收20 Kb以上的DNA片段,混匀时需要温和震荡;对20 Kb以下的DNA片段,可以剧烈震荡。
4.室温静置至少2分钟,此时管内将出现大量红色颗粒状沉淀。此步十分关键,不能省略而直接离心。
5. 13000 g室温离心5分钟后,小心吸弃上清,管底将有黄豆大小的红色沉淀。
6. 加入0.8mL溶液C,充分震荡混匀。注意:溶液C瓶底有晶体状沉淀,用前无需溶解,但取用溶液C时需要避开沉淀。
7. 13000 g室温离心2分钟,小心吸弃上清,管底将有芝麻大小的白色沉淀。
8. 再用0.2mL溶液C重复第6-7 步一次,管底还有芝麻大小的白色沉淀。
9.小心吸弃上清后即得纯化的DNA沉淀,加入少量TE或水,充分吹打溶解。最后还会有少量白色不溶沉淀,属于正常现象。
疑难解答:
Q:电泳为何不能检测到回收的DNA?
A:最可能原因是各步加入溶液后没有充分震荡混匀,其次是沉淀在各步吸弃上清时候不小心吸走而丢失,三是溶液A和溶液B的pH发生改变。
Q:电泳时为何有残留荧光物在加样孔中?
A:可能是琼脂糖凝胶中的杂质吸附的DNA,吸取DNA样品时最好短暂离心,只取上清液。这些不溶杂质一般不影响后续反应。使用高纯度的琼脂糖可以减少杂杂质的污染。我们一般使用OXOID的琼脂糖,得到的DNA可以用于常见的分子生物学后续反应。
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