北京SP6 RNA聚合酶厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

百奥莱博专业生产销*(代"售")北京SP6 RNA聚合酶厂家，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京SP6 RNA聚合酶厂家
编号：BTN120307
规格：1000U
英文名：SP6 RNA Polymerase
品牌：百奥莱博
产地：北京
本酶是鼠伤寒沙门氏菌的噬菌体SP6 DNA编码的酶，对SP6启动子序列具有高度特异性，不能识别其它生物来源的启动子。本酶是依赖于DNA的RNA聚合酶，具有 5´→3´的RNA聚合酶活性，以含有SP6启动子序列的双链DNA为模板，以NTP为底物，合成与启动子下游的单链DNA互补的RNA。

产品用途：
1．为Northern杂交以及Southern杂交制作高标记探针。
2．制作RNA剪接反应的前体。
3．以帽类似物为引物，制作Capped mRNA。

产品组成：

 

成份	规格
SP6 RNA聚合酶	50μL(20U/μL)
5×转录缓冲液	0.25mL
使用手册	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

活性定义：1个活性单位是指在37℃、60分钟内将1nmol的AMP合成掺入到寡聚核苷酸片段(DE-81光吸收形式)所需的酶量。

除北京SP6 RNA聚合酶厂家外，我公司正在打折促销以下产品：

·一站式miRNA尿素-PAGE电泳套装
编号：BTN70606
英文名称：One-Stop miRNA Urea-PAGE Pack
规格：30次
尿素-聚丙*(代"烯")酰胺凝胶电泳(Urea PAGE)是目前分离200nt以下的小片段RNA，尤其是20nt左右的microRNA(miRNA)分子的主要方法，但是单独配制各种溶液十分繁琐，为此我们公司开发了本产品。

产品特点：
1.一站式，含有电泳所需要的所有试剂，即开即用，十分方便，免去了实验人员称取有毒物品。
2. 灵活，可以根据需要配制各种浓度的Urea-PAGE，以便对长度各异的RNA进行电泳。
3.电泳后可直接用于UV观察、银染、胶回收、Northern杂交和放射自显影等。
4. 使用新型缓冲液，可以防止甘油的干扰。

产品组成：

成分	规格
尿素	210g
丙*(代"烯")酰胺	60g
甲叉双丙*(代"烯")酰胺	3g
TBE电泳液，10×	250ml
TEMED	1.5ml
过硫*(代"酸")铵(干粉)	1g
miRNAload	10ml
miRNA Marker	30次
固相RNase清除剂	100ml
说明书	1份

储存条件：常温运输、4℃保存(miRNAload、miRNA Marker需要-20℃保存)。保存期为一年。

使用方法：

一、准备工作
1. 用固相RNase清除剂清洁工作的台面和器皿(详见该产品的使用手册)。
2. 配制1 X电泳缓冲液：将适量的10X电泳缓冲液用RNase-free水稀释10倍，得到1X电泳缓冲液待用。
3. 配制10%过硫*(代"酸")铵溶液：精确称取约100mg过硫*(代"酸")铵到一干净的1.5mL离心管中，按每1mg过硫*(代"酸")铵加10μl RNase-free水的比例加入RNase-free水，摇晃致溶，立即使用。注意：放置时间不要超过一周。

二、配制凝胶
1. 估计所需要的凝胶溶液的体积，一般配制一块13cm×15cm×0.8mm的胶需要15mL凝胶溶液，配制一块36cm×45cm×0.8 mm的胶需要120mL凝胶溶液。
2. 根据所需要的凝胶溶液的体积，在一的干净的三角瓶中按下表加入各成分(此处以配制100mL浓度为15%的凝胶为例):

成分	终浓度	用量
尿素	7M	42g
40% Acrylamide/Bis溶液	15%	37.5mL
10×电泳缓冲液	1×	10ml
补RNase-free水到100mL

注：Acrylamide/Bis的终浓度需要根据待分离RNA长度选择(见下表)。
 

需分离的RNA长度范围	Acrylamide/Bis工作浓度
6-100nt	20%
25-150nt	15%
40-200nt	12%
60-400nt	8%
80-500nt	5%
1000-2000nt	3.5%

3. 搅拌并加热到40-50℃左右，直到尿素完全溶解。
4. 冷却到室温后，将三角瓶接上真空系统抽真空处理10-15分钟以充分去除溶液中的氧气(氧气会降低聚合反应效率)。但如果实验条件有限，此步也可以省略。
5. 边摇晃溶液变加入50μl TEMED和500μl 10%过硫*(代"酸")铵。注意：即使选择其他工作浓度的Acrylamide/Bis，TEMED和10%过硫*(代"酸")铵的用量也不需要随之改变。但如果配置的凝胶溶液的体积变化，TEMED和10%过硫*(代"酸")铵的用量也要按比例改变。
6. 再充分摇晃约30秒后迅速灌胶，然后插入样品梳。
7.室温放置30-60分钟使胶凝固。
8. 将凝胶板放置在电泳装置上后，在上下层分别加入适当量的1×电泳缓冲液。如果不马上使用，需要有湿纸将上样孔端盖住以防凝胶过度干燥。
9. 拔出梳子后用加样枪吸取电泳缓冲液，充分将每个加样空中未聚合的Acrylamide/Bis、尿素和气泡吹打出来。

三、电泳
1.在上样前，预电泳 20-30分钟以使多余的过硫*(代"酸")铵跑出加样空，同时还可以使凝胶的温度升高(到 50℃左右)，有利于RNA电泳时维持在变性状态。预电泳电流见下面第 5 条。
2. 将miRNA样品与等体积的miRNAload 混合，70℃保温 2-3分钟后迅速放置在冰上冷却，快速离心半分钟，放冰上待用。
3. 关电泳仪后开始上样。注意：每次上样后如果不更换枪头，则需要充分吹打洗净枪头以防样品的交叉污染。
4. 同时上样 miRNA Marker。
5. 重开电泳仪，对 13cm×15 cm的胶，以20-30mA的电流电泳，直到红色染料移动到凝胶边缘为止；对 36cm×45cm的胶，则以50-60mA的电流电泳，直到红色染料移动到凝胶边缘为止。

四、后续处理
1.染色观察：将凝胶一面的玻璃板揭开，直接用仍然附着在另一玻璃板上的凝胶进行各种染色，包括银染(固定、漂洗、显影和定影等步骤)、EB(每100mL 1×TBE中加 20μL 10mg/mL的EB溶液)、我们公司低毒核酸染料 DNAgreen(每100mL 1×TBE中加10μL DNAgreen 原液)。UV下观察并拍照。
2. miRNA回收：按上法用EB等染料染色后，UV下确定所需要的miRNA条带的位置，切胶后进行胶回收处理。
3. Northern杂交：按上法用EB等染料染色后，UV下确定所需要的miRNA条带的位置，切胶后电转移到带正电的尼龙膜上，然后进行杂交处理。
4. 放射自显影：如果miRNA样品电泳前经过同位素标记，则将凝胶一面的玻璃板揭开，用滤纸将附着在另一玻璃板上的凝胶吸附过来，然后包上保鲜膜，真空抽干，然后使胶跟X光片向对置进行放射自显影。


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·电泳级SDS溶液(10%)
编号：BTN100881
英文名称：SDS Solution，EG
规格：250mL
本产品是电泳级的SDS溶液，专门用于配制SDS-PAGE和Tricine-SDS-PAGE凝胶，也可用于制备变性上样液。当SDS与蛋白质的重量比超过4：1时(一般终浓度为0.1%即可)，就能够打开蛋白质的二级结构，并且使蛋白质的在SDS-PAGE胶中的泳动速度只取决于分子大小。如果蛋白质含有二硫键，必须在上样液中补充足够b-巯基乙醇。

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

·PCR污染清除剂
编号：BTN140648
英文名称：DNA Contamination Scavenger
规格：250mL
微量核酸污染导致的PCR假阳性是广大实验者最头痛的问题之一。为解决此难题，本公司开发了本款PCR污染清除剂，本产品无毒、无腐蚀性，可将裸露的核酸完全降解至无法作为扩增模板的小片段，且无法恢复，从而彻底消除PCR 过程中由于各种环境污染而导致的假阳性扩增。

产品特点：
1．本产品为非酶类试剂，所有组分可生物降解、无毒无害。不含有机溶剂或者挥发性物质，不含无机酸或者碱性物质，不会对金属形成腐蚀。
2．产品中各组分协同作用，快速、非序列特异性的降解核酸污染。
3．使用简单，操作方便。喷洒或浸泡处理15分钟即可完成清除作用。
4．可广泛用于清除实验操作台、仪器、塑料和玻璃器皿、移液器、解剖刀、镊子、手套等各种实验器材表面的DNA污染。
5．与传统的PCR污染清除方法，如：稀酸处理法、紫外照射法、尿嘧啶糖苷酶(UNG)法和酶解变性等相比，本产品具有能彻底破坏DNA分子、有效清除小片段核酸等优点。

储存条件：常温运输和保存，有效期两年。

使用方法：
注意：以下操作均需要戴手套进行。本产品可重复使用5-10次，使用后建议密封保存。

工作平台的清洁：
直接将本产品喷于台面，最少15分钟后用普通吸水纸擦净，最后用吸水纸擦净，晾干。
实验仪器的清洁：
用浸有本品的纸擦拭仪器表面，再用吸水纸擦净，晾干。用本品处理金属器械的时间不能超过15分钟。
玻璃和塑料器皿的清洁：
将器皿浸泡在本产品中，静置处理最少15分钟后取出，再用蒸馏水浸泡二次以上，倒立晾干后备用。
移液枪的清洁：
根据生产厂家的使用手卸下移液枪的前端，留下接口塞和圈套后将其浸放在本产品中最少15分钟，再用蒸馏水彻底冲洗后，晾干，装回移液枪。
塑料离心管和滴头的清洁：
将反应塑料离心管和滴头充分浸泡在本产品中最少15分钟以上(最好不要有气泡)，然后蒸馏水充分浸泡两次，试管或离心管可立即使用或干燥后备用。


北京SP6 RNA聚合酶厂家关键词：SP6 RNA Polymerase,BTN120307,SP6 RNA聚合酶

KFS178 细胞pH指示荧光探针BCECF,AM
SY0417 70mm透析袋(透析分子量14kDa) Dialysis Tube MD77 (Mw14,000)
SV0263 BstUI限制性内切酶 BstUI Restriction Endonuclease
BTN140436 非蛋白型Western封堵液 Nonprotein Western Blocking Solution
HR0293 蛋白酶抑制剂混合物(植物蛋白提取) Protease inhibitor mixture (plant protein extraction)
SY0055 鸟苷三磷酸溶液(100 mM)(GTP) GTP Solution(100 mM)
BTN131087 AP标记亲和素 AP-Avidin
BTN131038 dUTP溶液，100mM dUTP Solution，100mM
SV1604 BG-NH2
YT344 NF-κB抑制剂/抗氧化剂(PDTC) Ammonium pyrrolidinedithiocarbamate
WE0129 一步法RT-PCR试剂盒 UltraRT One Step RT-PCR Kit
BTN70401 软骨RNA提取试剂盒 Cartilage RNA Extraction Kit
SV0913 LongAmp 热启动 Taq DNA 聚合酶
WE0395 口腔拭子DNA样本保存管
KFS075 SDS-PAGE凝胶快速配制试剂盒
SY0303 CHAPS
RFT197 蛋白酶抑制剂混合物(真菌或酵母蛋白提取用) Protease inhibitor cocktail for fungal and yeast extracts
KFS276 阿霉素(Doxorubicin) Adriamycin,Doxorubicin
HR0087 血细胞蛋白提取试剂盒 Blood cell protein extraction kit
YT892 Hoechst 33258细胞蓝色荧光染料 Hoechst 33258

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